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专利名称：一种全血检测式免疫层析装置的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种全血检测式免疫层析装置。
背景技术：
免疫层析技术是在酶联免疫结合试验的基础上发展起来的一种固相 标记免疫测定新技术。检测全过程仅需数分钟，但敏感度却与需数小时完
成的ELISA相仿。其原因在于ELISA样品中的待检抗原需缓慢地扩散才能 与吸附于固相表面的抗体反应，而在免疫层析试纸中，待检液体层渗滤时 抗原抗体紧密接触形成免疫浓縮，从而提高了反应效率，可应用于免疫学 检测的所有方面，主要用于检测正常体液中不存在的抗原性物质以及正常 含量极低而在特殊情况下异常升高的物质。因其具有单份测定、简便、決 速、不需任何仪器设备、数分钟即可用肉眼观察结果的特点而成为临床快 速诊断的手段之一，如应用于检测心梗标志物、变态反应、应激反应、 毒理学等。
可以直接用于检测全血或指血的免疫层析装置将省去采血后分离血 浆或血清的繁琐程序，从而真正实现一步法快速检测，顺应了临床快速诊 断的需求。目前用于全血检测的免疫层析装置多采用全血分离膜分离红细 胞，即在样品垫上加全血分离膜，当全血样本滴入加样孔后，通过全血分 离膜分离了红细胞后的液体经样品垫通过毛细扩散作用向吸水垫涌动的 过程中发生反应。其缺点在于若加样区和全血分离膜压合太紧，则全血样 本难以滤过；若压合过松，则部分血液通过全血分离膜表面直接涌动至检 测区膜，使得检测区背景太深而影响结果判读。因此，如果测试卡的厚度
或者加样孔的尺寸稍有变化，将会影响全血分离的速度和分离效果，使得 检测效果差异较大。即使加样区和全血分离膜吻合较好，由于全血分离时
间较长，此类装置判读结果的时间在15分钟以上。因此，本实用新型针
对目前全血检测式免疫层析装置全血分离效果不稳定、检测时间偏长的缺
点，发明人经过精心研究完成了本发明的内容。 发明内容
本实用新型的目的在于提供一种通过全血分离膜和快速促凝血液相 结合的方法的全血检测式免疫层析装置，达到稳定快速分离血细胞的目 的，从而縮短检测时间并提高检测的稳定性。
本实用新型的上述目的是通过以下的技术方案实现的-
一种全血检测式免疫层析装置，如图l， 2所示，该装置由上下扣合 的卡盒和置于其间的测试卡5组成，所述的上卡盒1上依次设置有加样孔 3和检测窗4，下卡盒2中间为放置测试卡5的卡槽6，卡槽6的尺寸与测 试卡5的尺寸相契合，测试卡5可置于卡槽6中并固定，卡槽6—侧为U 型样品处理区7，其对应着上卡盒l的加样孔3，测试卡5上的检测区膜 IO正对应上卡盒1的长方形检测窗4，使测试卡5上的检测区显露。
一种优选的技术方案，其特征在于所述的卡槽6与下卡盒1之间以固 定结构连接。
一种优选的技术方案，其特征在于所述的上下卡盒可为任意形状，例 如长方形、正方形，圆形或其他不规则形状；卡盒的材料可以是塑料、树 脂等适合应用的材料，并没有特别的限定。
一种优选的技术方案，其特征在于所述的加样孔3为方形或圆形，其 长度或直径大小为4 8mm。
所述的上下卡盒的接口可以是通常的卡口，也可以是特殊的卡口，只 要能使上下卡盒紧密卡紧即可，并没有特别限定。
一种优选的技术方案，其特征在于所述的测试卡5为在塑料底板支架 上依次粘贴如下部分(如图2， 3所示)样品垫8、显色剂垫9、检测区 膜10、吸水垫11，以上各部份首尾互相衔接，所述的测试卡宽度为3 4mrn， 长度根据卡槽的长度而定。
一种优选的技术方案，其特征在于所述的检测区膜IO上有可被结合 含显色剂桥联物的物质点样形成的检测线12和质控线13，检测线和质控 线之间的宽度为3 6mrn。
所述的样品垫8为吸水滤纸或玻璃纤维膜，其上为一层全血分离膜； 所述的显色剂垫9为聚酯纤维或玻璃纤维膜；所述的检测区膜10为硝酸 纤维素膜；所述的吸水垫11为吸水滤纸；以上各组份首尾互相衔接，组 装成复合大卡，将复合大卡切成预定宽度即为测试卡5。
一种全血检测式免疫层析装置的制作方法
1、制作卡盒上卡盒l的加样孔3的2/3区域正对应下卡盒2中的 U型样品处理区7的凹型区域，该凹型区域的底部和槽壁表面粗糙不平， 另1/3区域对应的样品处理区7的边缘与测试卡样品垫8区的全血分离膜 相接(如图2， 3所示)，全血分离膜在样品处理区7的U型开口处的长度 为2 3mm。卡槽6位于下卡盒2的中间部分， 一侧为U型，另一侧为长方 形，卡槽6的尺寸与测试卡5的尺寸相契合，测试卡5可置于卡槽6中 并固定。测试卡5上的检测区正对应上卡盒1的检测窗4，使测试卡5上 的检测区显露。
2、制作测试卡
2. 1标记抗体或抗原用显色剂颗粒标记血液中待检测物质所相应的 抗体或者抗原，形成含显色剂的桥联物。所述显色剂为胶体金、彩色微球 或磁珠。
2.2固定受体将含显色剂的桥联物固定到聚酯纤维或玻璃纤维膜上 形成显色剂垫；将可特异性结合含显色剂桥联物的物质(如可特异性结合 待检物质的抗体或者抗原)线状点样到硝酸纤维素膜上形成检测线；将可 非特异性结合含显色剂桥联物的物质(如羊或兔抗鼠IgG)线状点样到硝 酸纤维素膜上形成质控线，点样宽度0. 5-1. 5mm。
2.3制作测试卡在塑料底板支架上依次粘贴如下部分(如图2， 3所 示)样品垫8、显色剂垫9、检测区膜IO、吸水垫ll，以上各部份首尾 互相衔接，组装成复合大卡，将复合大卡切成预定宽度的测试卡。
3、 喷涂血液促凝剂，组装试剂盒在U型的样品处理区7的凹型区 域底部和槽壁喷涂血液促凝剂，将测试卡5装入卡槽6，扣合上下卡盒， 即制作完成一种全血检测式免疫层析装置。
在加样孔3处滴加全血样品时，血液在样品处理区7处被促凝析出血 清，血清通过样品垫8上的全血分离膜和吸水滤纸，经毛细扩散作用流向 吸水垫11处，当液体经过显色剂垫9时，吸附在其上的桥联物即被溶解， 与样品中的待测物发生反应而结合，并随液流一起前移至检测线12时，被 检测线中的物质捕获，显色剂在检测线上聚集而出现肉眼可见的线条；当 液流前移至质控线13时，质控线中的物质非特异性结合含显色剂的桥联 物，显色剂在质控线上聚集而出现肉眼可见的线条。未结合的显色剂桥联
物继续前移至吸水垫11处被吸收。
结果判定如图4所示，以检测区膜10出现2条肉眼可见的线为阳 性结果；若检测线不显色，而质控线显色则为阴性；若两条线均不显色则 为该检测装置失效。
本实用新型的优点本实用新型将快速促凝血液和全血分离膜结合起 来对全血进行分离。本装置样品处理区7的U型卡槽壁及凹形的底部喷涂 促凝剂，可使血细胞在槽壁和底部凝集，血清成分析出表面，U型开口处 与测试卡5的样品垫8区的全血分离膜相接，这样在加入全血样本时即使 少量血液接触测试卡5的样品垫区，也可以通过全血分离膜进行缓慢分离， 不会有红细胞涌动至检测区影响结果。当血清逐渐析出的时候，可以快速 通过全血分离膜至样品垫，通过毛细扩散作用经过显色剂垫，水化显色剂 桥联物，使待分析样品与桥联物相互作用结合，其复合物涌动至检测区膜 上的检测线时，被检测线上固定的能结合待分析样品的物质捕获而形成肉 眼可见的线条；余下的显色剂复合物被质控线上的物质捕获形成肉眼可见 的线条，表明测试完成。促凝剂使血液凝固析出血清的时间不超过4分钟， 血清涌动至检测区膜使对照线显色的时间在3分钟以内，因此该实用新型 用于全血检测，检测完成可控制在10分钟内，与目前常规的全血检测式 免疫层析装置相比，检测时间短且全血分离效果稳定，更符合该类产品简 便快速的特点，并且该装置具有单一试剂、 一步操作、全部试剂可在室温 长期保存、简便快速的优点。可被广泛应用于临床，也可用于病人的自我 检测。

图1为本实用新型装置的主视图。
图2为打开上卡盒后本实用新型装置的主视图。
图3为打开上卡盒后本实用新型装置的剖视图。
图4为本实用新型装置实际检测后，显示阳性结果、阴性结果和试 剂失效的示意图。 附图标记
1——上卡盒；2——下卡盒；3——加样孔；4——检测窗；5——测试卡； 6——卡槽；7——样品处理区；8——样品垫；9——显色剂垫；10——检 测区膜；11——吸水垫；12——检测线；13——质控线
具体实施方式实施例1
待检测物质为人血液中的心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)。
1、 制作卡盒卡盒外形为长方形，为塑料材质，上下卡盒通过通常 接口扣紧，上卡盒的加样孔为长方形，大小为4x8mm，在其2/3区域正对应 下部卡盒2的U型样品处理区7的凹型区域，该凹型区域的底部和槽壁表 面粗糙的不平，另1/3区域对应的样品处理区7的边缘与测试卡5样品垫 8区的全血分离膜相接，全血分离膜在样品处理区U型开口处的长度约为 3腿，卡槽6位于下卡盒2的中间部位， 一侧为U型，测试卡5置于卡槽6 中并固定，并且卡槽6固定在下卡盒2中，测试卡5上的检测区正对应上 卡盒1的长方形检测窗4，使测试卡5上的检测区显露(如图3所示)。
2、 制作测试卡
2. l标记抗体用胶体金标记鼠抗人H-FABP的单克隆抗体1，形成胶 体金一H-FABP单克隆抗体1的桥联物。
2. 2固定受体将胶体金一H-FABP单克隆抗体1的桥联物固定到聚酯 纤维上形成显色剂垫9;将H-FABP单克隆抗体2线状点样到硝酸纤维素膜 上形成检测线12;将兔抗鼠IgG线状点样到硝酸纤维素膜上形成质控线 13，点样宽度为l誦，检测线与质控线的距离为5腦
2.3制作测试卡在塑料底板支架上依次粘贴如下部分吸水滤纸的
样品垫8，其上为一层全血分离膜；显色剂垫9为聚酯纤维；检测区膜10
为硝酸纤维素膜；吸水垫11为吸水滤纸，以上各组份首尾互相衔接，切 成宽度为3mm的测试卡。
3、 喷涂血液促凝剂，组装试剂盒在U型样品处理区的凹型区域底 部和槽壁喷涂血液促凝剂，将测试卡5装入卡槽6，扣合上下卡盒，即制 作完成一种全血检测式免疫层析装置。
结果判定在加样10分钟时，目测结果，如图4所示，以检测区膜
10出现2条肉眼可见的红线为阳性结果；若检测线不显红色，而质控线显 红色则为阴性；若两条线均不显示则为该检测装置失效。 实施例2:
待检测物质为人血液中的HIV抗体1.
制作卡盒卡盒外形为长椭圆形，为ABS树脂材质，上下卡盒通过通 常接口扣紧，上卡盒的加样孔椭圆形，大小为4X6mm，其2/3区域正对应 下卡盒2的U型样品处理区7的凹型区域，该凹型区域的底部和槽壁表面 粗糙的不平，另1/3区域的对应的样品处理区7的边缘与测试卡5样品垫 8区的全血分离膜相接，全血分离膜在样品处理区U型开口处的长度约为 2mm，卡槽6位于下部卡盒2的中间部位， 一侧为U型样品处理区7，测试卡5置于卡槽6中并固定，并且卡槽6固定在下卡盒2中，测试卡5上的 检测区正对应上卡盒1的检测窗4，使测试卡上的检测区显露(如图3所 示)。
2、制作测试卡
2. 1标记抗体用胶体金标记人HIV的gp41、 gp36基因工程抗原和 p24合成肽，形成胶体金一HIV抗原的桥联物。
2.2固定受体将含胶体金一HIV抗原的桥联物固定到玻璃纤维膜上 形成显色剂垫9;将人HIV的gp36、 gp41和p24基因工程抗原)线状点样 到硝酸纤维素膜上形成检测线；将鼠抗人IgG线状点样到硝酸纤维素膜上 形成质控线。点样宽度为0. 8mm，检测线与质控线的距离为4mm.
2.3制作测试卡在塑料底板支架上依次粘贴如下部分玻璃纤维膜 的样品垫8,其上为一层全血分离膜；显色剂垫9为玻璃纤维膜；检测区膜 10为硝酸纤维素膜；吸水垫11为吸水滤纸，以上各组份首尾互相衔接， 切成宽度为4mm的测试卡。
3、 喷涂血液促凝剂，组装试剂盒在U型样品处理区7的凹型区域 底部和槽壁喷涂血液促凝剂，将测试卡5装入卡槽6，扣合上下卡盒，即 制作完成一种全血检测式免疫层析装置。结果判定在加样10分钟时，目测结果，如图4所示，以检测区膜 10出现2条肉眼可见的红线为阳性结果；若检测线不显色，而质控线显红 色则为阴性；若两条线均不显示则为该检测装置失效。实施例3:
待检测物质为人血液中的脑钠肽(BNP)
1、 制作卡盒卡盒外形为不规则形，以塑料为材质，上下卡盒通过
通常接口扣紧，上卡盒的加样孔为圆形，直径大小为6mm，其2/3区域正对 应下部卡盒2的U型样品处理区7的凹型区域，该凹型区域的底部和槽壁 表面粗糙的不平，另1/3区域对应的样品处理区7的边缘与测试卡5样品 垫8区的全血分离膜相接，全血分离膜在样品处理区7U型开口处的长度 约为2mm，卡槽6位于下卡盒2的中间部位， 一侧为U型，测试卡5置于 卡槽6中并固定，测试卡5上的检测区正对应上卡盒1的检测窗4，使测 试卡5上的检测区显露(如图3所示)。
2、 制作测试卡
2. 1标记抗体用彩色磁珠标记鼠抗人的BNP单克隆抗体1，形成磁 珠一BNP单克隆抗体1的桥联物。
2.2固定受体将磁珠一BNP单克隆抗体1的桥联物固定到玻璃纤维 上形成显色剂垫9;将BNP单克隆抗体2线状点样到硝酸纤维素膜上形成 检测线12;将羊抗鼠IgG线状点样到硝酸纤维素膜上形成质控线13。点 样宽度为1. 5mm,检测线与质控线的距离为6腿.
2.3制作测试卡在塑料底板上依次粘贴如下部分吸水滤纸的样品 垫8,其上为一层全血分离膜；显色剂垫9为玻璃纤维；检测区膜10为硝 酸纤维素膜；吸水垫11为吸水滤纸，以上各组份首尾互相衔接，切成宽 度为3. 5鹏的测试卡。
3、 喷涂血液促凝剂，组装试剂盒在U型样品处理区7的凹型区域 底部和槽壁喷涂血液促凝剂，将测试卡5装入卡槽6，扣合上下卡盒，即 制作完成一种全血检测式免疫层析装置。 结果判定在加样10分钟时，目测结果，如图4所示，以检测区膜 10出现2条肉眼可见的线条为阳性结果；若检测线不显色，而质控线显色 则为阴性；若两条线均不显示则为该检测装置失效。
权利要求1、一种全血检测式免疫层析装置，该装置由上下扣合的卡盒和置于其间的测试卡组成，所述的上卡盒上依次设置有加样孔和检测窗，其特征在于下卡盒中间为放置测试卡的卡槽，卡槽的尺寸与测试卡的尺寸相契合，测试卡可置于卡槽中并固定，卡槽一侧为U型的样品处理区，其对应着上卡盒的加样孔，测试卡上的检测区膜正对应上卡盒的长方形的检测窗，使测试卡上的检测区显露。
2、 根据权利要求1所述的一种全血检测式免疫层析装置，其特征在 于上卡盒的加样孔的2/3区域正对应下卡盒的U型样品处理区的凹型区 域，该凹型区域的底部和槽壁表面粗糙不平，另1/3区域对应的样品处理 区的边缘与测试卡样品垫区的全血分离膜相接，全血分离膜在样品处理区 的U型开口处的长度为2~3mm。
3、 根据权利要求1或2所述一种全血检测式免疫层析装置，其特征 在于所述的测试卡为在塑料底板支架上依次粘贴如下部分样品垫、显色 剂垫、检测区膜、吸水垫，以上各部份首尾互相衔接，所述的测试卡宽度 为3 4mm,长度根据卡槽的长度而定。
4、 根据权利要求3所述一种全血检测式免疫层析装置，所述的样品 垫为吸水滤纸或玻璃纤维膜，其上为一层全血分离膜；所述的显色剂垫为 聚酯纤维或玻璃纤维膜；所述的检测区膜为硝酸纤维素膜；所述的吸水垫 为吸水滤纸。
5、 根据权利要求1所述一种全血检测式免疫层析装置，其特征在于 所述的加样孔为方形或圓形，其长度或直径大小为4~8mm。
6.根据权利要求1或2所述一种全血检测式免疫层析装置，其特征 在于所述的检测区膜10上有可被结合含显色剂桥联物的物质点样形成的 检测线12和质控线13，点样宽度0. 5-1.5im,检测线和质控线之间的宽 度为3~6mm。
专利摘要本实用新型涉及一种全血检测式免疫层析装置，该装置由上下扣合的卡盒和置于其间的测试卡组成，所述的上卡盒上依次设置有加样孔和检测窗，下卡盒中间为放置测试卡的卡槽，卡槽的尺寸与测试卡的尺寸相楔合，测试卡可置于卡槽中并固定，卡槽一侧为U型样品处理区，其对应着上卡盒的加样孔，测试卡上的检测区膜正对应上卡盒的长方形检测窗，使测试卡上的检测区显露。本实用新型的装置检测时间短且全血分离效果稳定，更符合该类产品简便快速准确的特点。
文档编号G01N33/558GK201177631SQ200820078900
公开日2009年1月7日 申请日期2008年2月1日 优先权日2008年2月1日
发明者莉 张, 颖 王, 陈莉莉 申请人:陈莉莉