专利名称：一种化妆品中多种防腐剂残留量的检测方法
技术领域：
本发明涉及分析化学、食品安全领域，具体地说，是一种化妆品中防腐剂残留量的检测方法。
背景技术：
由于化妆品中添加了各种营养物质，而这些营养成分是微生物增生和繁殖的培养基，因此在化妆品生产、使用和保存中，有可能受到细菌污染而使产品产生异味或改变外观，为抑制细菌生长繁殖，必须在产品中加入一定量防腐剂。防腐剂种类很多，根据美国FDA和CTFA的出版物报道，化妆品允许使用的化学防腐剂约有Iio 120种，其中化合物40种，衍生物20 30种，复方防腐剂约50种。虽然防腐剂可以抑制微生物在该化妆品中生长，由于大多数防腐剂对人体均有一定毒性，防腐剂使用不当，化妆品中使用禁用物质或超量使用限用物质，对人体的�：σ彩窍嗟贝蟮模愿鞴曰逼分蟹栏恋挠τ枚嘤幸欢ㄏ拗�。我国《化妆品卫生规范》(2007)规定了可以在化妆品中使用的56种防腐剂，并限定了使用量、使用范围及使用条件。因此，对化妆品中防腐剂进行检测和监控是十分必要的。目前，化妆品中防腐剂的检测，主要有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、薄层色谱法、气相色谱-质谱法(GC-MS)和液相色谱-串联质谱法等方法。目前化妆品中防腐剂的测定方法还远不能满足国家卫生监督的要求。
发明内容
本发明的目的是克服现有不足问题，提供一种同时检测化妆品中多种防腐剂残留量的气相色谱-质谱法检测方法，实现了对21种防腐剂的同时检测，具有简便、快速、灵敏等特点，方法的检测低限、回收率和精密度均满足国内外对化妆品中防腐剂检测的相关要求，适用于对化妆品中防腐剂的检测和监`控。本发明为实现上述目的所采用的技术方案是一种化妆品中多种防腐剂残留量的检测方法，包括以下步骤
(I)样品提取和净化
膏状化妆品称取O. 2 g样品(精确到O. 001 g)于50 mL锥形瓶中，加入10 mL四氢呋喃，超声10 min,经O. 45 μπι膜过滤后,进样。乳状化妆品称取O. 2 g (精确到O. 001 g)于50 mL锥形瓶中，加入10 mL丙酮，超声提取5 min,经O. 45 μπι膜过滤,进样。水状化妆品称取O. 2 g (精确到O. 001 g)与50 mL锥形瓶中，加入10 mL四氢呋喃，经O. 45 μ m膜过滤后，进样。( 2)气相色谱-质谱仪测定
①定性测定按照气相色谱/质谱条件分别测定样品溶液和标准溶液，如果样品的GC-MS数据符合下列限定，则可定性判定为某种防腐剂残留A、样品中待测物质与标准品具有相同的保留时间，偏差在±2.5%以内；
B、监测离子的信噪比应彡3；
C、扣除本底后该峰的质谱图存在所有选定的监测离子；
D、样品中待测物的全部监测离子的相对强度应与标准溶液中相应化合物的的离子相对强度比值一致，偏差在土 20%以内。②定量测定以各防腐剂的监测离子中信号响应最高且无干扰的单离子对为定量离子，进行外标法定量分析。以峰面积和工作标准溶液浓度绘制标准工作曲线。为减少基质对定量测定的影响，需用空白样提取液来配制标准工作溶液，并保证所测样品中各防腐剂的响应值均在线性范围内。作为优�。诓街�(2)中所述气相色谱/质谱分析条件为
a)色谱柱毛细管柱 DB-5MS, O. 25mmX 30mX O. 25 μ m ;
b)载气以高纯He为载气(99.999%以上)，流量LOmL/min;压力11.6psi;
c)进样模式不分流进样IyL;
d)进样口温度270°C ;接口温度280°C ；
e)升温程序60°C (Imin) 20°C /min 120°C (8min) 10°C /min 250°C (Imin)；
f)溶剂延迟溶剂延迟2. 6 min ；
g)电离方式EI ;电离能量`70 eV ；
h)选择离子监测(SIM)程序。作为优�。诓街�(2)中所述标准溶液的配置方法为
标准储备液分别准确称取适量防腐剂标准品，用甲醇溶解并定容至一定体积。混合标准储备液分别移取适量标准储备液，用甲醇稀释至一定体积。混合标准工作溶液根据需要分别移取适量混合标准溶液，用标样溶解液稀释至一定体积，当日使用。作为优�。诓街�(2)所述的化妆品中多种防腐剂残留量的检测方法，其特征在于步所述标样溶解液为空白样品提取液。进一步地，所述化妆品选自膏状口红、乳状香波、水状化妆水。进一步地，所述防腐剂包括下述21种防腐剂的至少一种苯酚、苯甲醇、苯甲酸甲酯、苯甲酸乙酯、2-氯-4-甲氧基苯酚、4-氯-3-甲苯酚、2，4，6-三氯苯酚、4-溴-邻甲苯酚、4-氯-3，5-甲苯酚、2，4- 二氯-3，5 二甲基苯酚、对羟基苯甲酸甲酯、邻苯基苯酚、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸苯酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸丁酯、五氯苯酚、苄氯酚、三氯生、对羟基苯甲酸苄酯。
由于采用上述技术方案，本发明的有益效果在于1、建立了化妆品(膏状、乳状、水状)中苯酚、苯甲醇、苯甲酸甲酯、苯甲酸乙酯、2-氯-4-甲氧基苯酚、4-氯-3-甲苯酚、2，4，6-三氯苯酚、4-溴-邻甲苯酚、4-氯-3，5-甲苯酚、2，4- 二氯-3，5 二甲基苯酚、对羟基苯甲酸甲酯、邻苯基苯酚、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸苯酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸丁酯、五氯苯酚、苄氯酚、三氯生、对羟基苯甲酸苄酯等防腐剂残留量的气相色谱/质谱检测方法，实现了对21种防腐剂的同时检测。
2.研究确定了样品的前处理方法。通过对比实验选用四氢呋喃作为膏状和水状基质样品的提取剂，选用丙酮作为乳状基质样品的提取剂。经过超声时间对比实验，对四氢呋喃作为提取溶剂的膏状样品超声10 min，水状样品不用超声提�。魑崛〖恋娜樽囱烦崛�5分钟。3、建立了可同时检测化妆品中21种防腐剂的气相色谱-质谱分离条件。采用美国DB-5MS(30 mXO. 25 mm. XO. 25 μ m)色谱柱，程序升温；在23分钟内将21种防腐剂进行了分离。4.本发明所建立的气相色谱-质谱检测方法，21种防腐剂在lmg/L 100 mg/L浓度范围内含量(X)与峰面积(Y)有良好的线性关系。不同的化妆品基质中检测低限为50 250mg /kg。方法的平均回收率为89. 64 99. 56，变异数(％)为1. 19 6. 89。5、所建立的化妆品中防腐剂的测定方法，具有简便、快速、灵敏等特点，方法的检测低限、回收率和精密度均满足国内外对化妆品中防腐剂检测的相关要求，适用于对化妆品中防腐剂的检测和监控。
图121种防腐剂混合标准溶液的总离子流 图2膏状化妆品样品添加防腐剂混合标准溶液(250mg/kg)选择离子流 图3乳状化妆品样品添加方法混合标准溶液(250 mg/kg)选择离子流 图4水状化妆品样品添加防腐剂混合标准溶液(250 mg/kg)选择离子流图。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明并不局限于具体实施例。实施例1膏状化妆品中 多种防腐剂残留量的检测方法1、样品提取和净化
称取O. 2 g样品(精确到O. OOl g)于50 mL锥形瓶中，加入10 mL四氢呋喃，超声10min,经O. 45 μπι膜过滤后,进样。2、气相色谱-质谱仪测定
①定性测定按照气相色谱/质谱条件分别测定样品溶液和标准溶液，如果样品的GC-MS数据符合下列限定，则可定性判定为某种防腐剂残留
Α、样品中待测物质与标准品具有相同的保留时间，偏差在±2. 5%以内；
B、监测离子的信噪比应彡3；
C、扣除本底后该峰的质谱图存在所有选定的监测离子；
D、样品中待测物的全部监测离子的相对强度应与标准溶液中相应化合物的的离子相对强度比值一致，偏差在土 20%以内。②定量测定以各防腐剂的监测离子中信号响应最高且无干扰的单离子对为定量离子，进行外标法定量分析。以峰面积和工作标准溶液浓度绘制标准工作曲线。为减少基质对定量测定的影响，需用空白样提取液来配制标准工作溶液，并保证所测样品中各防腐剂的响应值均在线性范围内。
气相色谱/质谱分析条件为
a)色谱柱毛细管柱DB-5MS, O. 25mmX 30mX O. 25 μ m ;
b)载气以高纯He为载气(99.999%以上)，流量1. OmL/min;压力11. 6psi ；
c)进样模式不分流进样IyL;
d)进样口温度270°C;接口温度280°C ；
e)升温程序60°C(Imin) 20°C /min 120°C (8min) 10°C /min 250°C (Imin)；
质谱参数
a)溶剂延迟溶剂延迟2.6 min ；
b)电离方式EI;电离能量70 eV ；
c)选择离子监测(SIM)程序。d)离子源温度(EI) 2300C ；
e)四极杆温度150°C ;
电子倍增器、离子聚焦和入口透镜值 均通过自动调谐计算；
各种激素的选择离子见表1.
表I
权利要求
1.一种化妆品中多种防腐剂残留量的检测方法，其特征在于该方法包括以下的步骤 (1)样品提取和净化 膏状化妆品按照每0.2g化妆品IOml提取剂的比例，称取O. 2 g化妆品样品(精确到O.001 g)于50 mL锥形瓶中，加入10 mL四氢呋喃,超声10 min,经O. 45 μ m膜过滤后，进样； 乳状化妆品按照每O. 2g化妆品IOml提取剂的比例,称取O. 2 g化妆品(精确到O. 001g)于50 mL锥形瓶中，加入10 mL丙酮,超声提取5 min,经O. 45 μ m膜过滤,进样； 水状化妆品按照每O. 2g化妆品IOml提取剂的比例，称取O. 2 g (精确到O. 001 g)与50 mL锥形瓶中，加入10 mL四氢呋喃，经O. 45 μ m膜过滤后,进样； (2)气相色谱-质谱仪测定 ①定性测定按照气相色谱/质谱条件分别测定样品溶液和标准溶液，如果样品的GC-MS数据符合下列限定，则可定性判定为某种防腐剂残留 A、样品中待测物质与标准品具有相同的保留时间，偏差在±2.5%以内； B、监测离子的信噪比应彡3； C、扣除本底后该峰的质谱图存在所有选定的监测离子； D、样品中待测物的全部监测离子的相对强度应与标准溶液中相应化合物的的离子相对强度比值一致，偏差在±20%以内； ②定量测定以各防腐剂的监测离子中信号响应最高且无干扰的单离子对为定量离子，进行外标法定量分析；以峰面积和工作标准溶液浓度绘制标准工作曲线；为减少基质对定量测定的影响，需用空白样提取液来配制标准工作溶液，并保证所测样品中各防腐剂的响应值均在线性范围内。
2.根据权利要求1所述的化妆品中多种防腐剂残留量的检测方法，其特征在于步骤(2)中所述气相色谱/质谱分析条件为 色谱柱毛细管柱 DB-5MS, O. 25mmX30mX0. 25 μ m ； 载气以高纯He为载气(99. 999%以上)，流量1. OmL/min;压力11. 6psi ； 进样模式不分流进样IuL; 进样口温度270°C ;接口温度280°C ；升温程序6(TC (Imin) 20°C /min 120°C (8min) 10°C /min 250°C (Imin)； 溶剂延迟溶剂延迟2. 6 min ； 电离方式EI ;电离能量70 eV ； 选择离子监测(SIM)程序。
3.根据权利要求1所述的化妆品中多种防腐剂残留量的检测方法，其特征在于步骤(2)中所述标准溶液的配置方法为 标准储备液分别准确称取适量防腐剂标准品，用甲醇溶解并定容至一定体积； 混合标准储备液分别移取适量标准储备液，用甲醇稀释至一定体积； 混合标准工作溶液根据需要分别移取适量混合标准溶液，用标样溶解液稀释至一定体积，当日使用。
4.根据权利要求3所述的化妆品中多种防腐剂残留量的检测方法，其特征在于所述标样溶解液为空白样品提取液。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的化妆品中多种防腐剂残留量的检测方法，其特征在于所述化妆品选自膏状口红、乳状香波、水状化妆水。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的化妆品中多种防腐剂残留量的检测方法，其特征在于所述防腐剂包括下述防腐剂中的至少一种苯酚、苯甲醇、苯甲酸甲酯、苯甲酸乙酯、2-氯-4-甲氧基苯酚、4-氯-3-甲苯酚、2，4，6-三氯苯酚、4-溴-邻甲苯酚、4-氯-3，5-甲苯酚、2，4- 二氯-3，5 二甲基苯酚、对羟基苯甲酸甲酯、邻苯基苯酚、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸苯酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸丁酯、五氯苯酚、苄氯酚、三氯生、对羟基苯甲酸苄酯。
全文摘要
本发明涉及分析化学、食品安全领域，具体地说，是一种化妆品中防腐剂残留量的检测方法。一种同时检测化妆品中多种防腐剂残留量的气相色谱-质谱法检测方法，样品提取和净化按照样品性状不同分别进行处理，然后采用气相色谱-质谱仪进行定性测定和定量测定。本发明实现了对21种防腐剂的同时检测，具有简便、快速、灵敏等特点，方法的检测低限、回收率和精密度均满足国内外对化妆品中防腐剂检测的相关要求，适用于对化妆品中防腐剂的检测和监控。
文档编号G01N30/06GK103063764SQ20121056072
公开日2013年4月24日 申请日期2012年12月21日 优先权日2012年12月21日
发明者林维宣, 徐伟, 张宁, 赵雪蓉, 金红利 申请人:林维宣
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