专利名称：甘蔗锈病抗病性鉴定的人工接种方法
技术领域：
本发明涉及农业技术领域，具体是一种甘蔗锈病抗病性鉴定的人工接种方法。
背景技术：
甘蔗锈病是甘蔗上的重要病害之一，近年来在我国的为害有逐年扩大和加重趋 势，目前此病已遍及云南、广西、广东和福建等省区的湿热蔗区，发病严重田块一般减产 15 30%，严重的达40%以上，甘蔗糖分降低10 36%。国内外大量的研究表明对甘蔗 锈病最经济有效的控制方法，就是选用抗病优良品种，避免栽种感病品种。因此筛选抗源材 料，供育种工作者合理选配亲本组合，进而选育出具有较稳定抗病性的新品种，供生产上推 广应用就显得迫切需要。优良抗源的筛选工作必须以数量多、范围广的甘蔗种质资源抗病 性评价为基�。蚨毙柩芯拷⒁惶卓焖偌虮�、致病性稳定、规范、实用的抗病鉴定技术。目前甘蔗种质资源对甘蔗锈病的抗病鉴定方法主要有大田病圃鉴定、田间自然感 病鉴定和人工接种鉴定。大田病圃鉴定和田间自然鉴定周期长、占用土地面积大、鉴定材料 数量有限，而且由于病圃和田间中的自然病原分布不均勻、气候和传播媒介等环境条件变 化常常会影响鉴定结果的真实性、稳定性和准确性；人工接种鉴定快速、鉴定材料数量不受 限制，且环境条件可人为控制，可以满足大规模筛选抗源材料的需要，但由于锈菌是活体寄 生，难于离体培养，而且由于锈病的发生除了病原外必须有合适的气候条件，所以接种体的 制备和环境控制成了人工接种鉴定的瓶颈。
发明内容
本发明的目的是提供一种鉴定结果稳定、可操作性强、接种工效高，适合对大批量 材料进行的甘蔗锈病抗病性鉴定的人工接种方法。本发明的目的通过以下技术方案实现，一种甘蔗锈病抗病性鉴定的人工接种方 法，包括以下步骤1、材料准备种植时间为每年6 8月。桶栽，常规管理。每份材料种植2桶，每 桶需均等高度的3 5株。2、病源采集通常于每年8-10月甘蔗锈病发生期，到发病蔗区采集带锈病孢子的 病叶，用手搓揉病叶将孢子释放至清水里，用24目分样筛过滤后即为接种体。3、接种方法将锈病孢子配成40-50个孢子/10 X 10倍视野的孢子悬浮液，于傍晚 在蔗叶上喷雾接种。接种前应对桶栽材料充分灌水以增加湿度。4、调查方法接种后桶栽材料置于遮光网棚内，第三天开始，每天早、中、晚从网棚 顶上往下喷水3次保湿；待5-6周充分发病后开始调查各参试材料的发病程度。5、抗病性评价参照J. C. Comstock(1992)标准进行评价。本发明的优点和有益效果本发明的甘蔗锈病人工接种法，其优点和有益效果在于(1)接种后甘蔗锈病发病显著、灵敏度高，可以有效的区分不同甘蔗种质材料(寄主)之间对病害的抗感性；(2)接种后蔗株置于遮光网棚内，从网棚顶上喷水保湿，模拟了湿润蔗区高温多雨 的自然发病条件，因此鉴定结果更接近于田间自然感病结果；(3)本发明的接种体不用离体培养，直接从田间采集制备。接种方法快速简便，可 操作性强、接种工效高。因此可以对大批量材料进行鉴定和筛�。趾蜕棵翘峁└� 多更广泛的抗源材料。
具体实施例方式1、供试材料准备每年6 8月从脱毒健康苗圃选择无病健壮蔗株，分别切成双芽苗，在流动冷水 中浸泡48小时之后，用50士0. 5°C热水处理2 3小时，再用80%敌敌畏和50%多菌灵 1 800液浸种5-lOmin，然后分别种植在塑料桶内，常规栽培管理。每份材料种植2桶，每 桶需均等高度的3 5株。2、病源采集通常于每年8-10月甘蔗锈病发生期，到发病蔗区采集带锈病孢子的病叶保湿带 回室内，用手搓揉病叶将孢子释放至清水里，用24目分样筛过滤后即为接种体。3、接种方法将锈病孢子配成40-50个孢子/IOX 10倍视野的孢子悬浮液，于傍晚在蔗叶上喷 雾接种。接种前应对桶栽材料充分灌水以增加湿度。4、调查方法接种后桶栽材料置于遮光网棚内，第三天开始，每天早、中、晚从网棚顶上往下喷 水3次保湿；待5-6周充分发病后开始调查各参试材料的发病程度。5、抗病性评价整株锈病严重度参照J. C. Comstock (1992)标准进行评价，如下表甘蔗抗锈病鉴定评价标准
权利要求
一种甘蔗锈病抗病性鉴定的人工接种方法，包括以下步骤(1)每年6～8月从苗圃选择无病健壮蔗株作为材料，种植在桶内，常规栽培管理，每份材料种植2桶，每桶需均等高度的3～5株；(2)每年8 10月甘蔗锈病发生期，到发病蔗区采集带锈病孢子的病叶，搓揉病叶将孢子释放至清水里，用24目分样筛过滤后即为接种体；(3)将步骤(2)获得的锈病孢子配成接种体浓度为40 50个孢子/10×10倍视野的孢子悬浮液，于傍晚在步骤(1)获得的桶栽材料蔗叶上喷雾接种；(4)接种后桶栽材料置于遮光网棚内，第三天开始，每天早、中、晚从网棚顶上往下喷水3次保湿，待5 6周充分发病后开始调查各参试材料的发病程度；(5)参照J.C.Comstock(1992)标准对桶栽材料进行抗病性评价。
2.根据权利要求1所述的接种方法，其特征在于步骤(1)的蔗株先在流动冷水中浸 泡48小时之后，用50士0.5°C热水处理2 3小时，再用80%敌敌畏和50%多菌灵1 800 液浸种5-lOmin，然后种植在桶内。
3.根据权利要求1所述的接种方法，其特征在于将步骤(3)中接种前应对桶栽材料 充分灌水以增加湿度。
全文摘要
一种甘蔗锈病抗病性鉴定的人工接种方法，(1)每年6～8月桶栽抗病源材料，每份材料种植2桶，每桶需均等高度的3～5株；(2)每年8-10月甘蔗锈病发生期，到发病蔗区采集带锈病孢子的病叶，用手搓揉病叶将孢子释放至清水里，用24目分样筛过滤后即为接种体；将锈病孢子配成40-50个孢子/10×10倍视野的孢子悬浮液，于傍晚在蔗叶上喷雾接种；(4)接种后桶栽材料置于遮光网棚内，第三天开始，每天早、中、晚从网棚顶上往下喷水3次保湿；待5-6周充分发病后开始调查各参试材料的发病程度；(5)抗病性评价参照J.C.Comstock(1992)标准对桶栽材料进行抗病性评价；本发明的鉴定结果更能真实反映材料的抗病性。
文档编号G01N33/00GK101911895SQ20101023050
公开日2010年12月15日 申请日期2010年7月20日 优先权日2010年7月20日
发明者李文凤, 王明强, 王晓燕, 罗志明, 黄应昆 申请人:云南省农业科学院甘蔗研究所
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