专利名称：临床生化质控品及其制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及人或动物新鲜血清或血浆多项临床生化指标的保护液和稳定剂的配 制及其生化质控品或质控物制备工艺技术。
背景技术：
随着生化分析仪及其生化试剂广泛地应用于临床医学检验，配套的多项临床生化 质控品对其质量控制显得尤为重要。在临床生化分析质量控制过程中，生化分析仪的定期 校准及其质量控制是必不可少的，新仪器安装、更换不同批次的试剂、室间或室内质控出现 异常、每次维修后都应进行仪器的校准。生化分析仪配套使用的质控品是用于体外诊断的 质量控制物质(定值和非定值)，是一种旨在用于医学用途的检测系统中使用的物质、材 料、物品或设备，其目的是评价或验证测量精密度、测量准确度、由于试剂或分析仪器的变 化检测系统可能产生的分析偏差等性能特征。质量控制物质，可用于能力验证、实验室内质 量控制。生化分析仪与生化试剂组合的检测结果的可靠性依赖于质控品的监测，才能保证 报告结果的准确性和不同实验室检测结果的可比性。质控品作为生化分析仪测量结果的计 量学溯源性，评价与确保临床实验结果准确性唯一依据。目前，生化分析仪质控方法通常采 用①适用的校准品校准生化分析仪及配套试剂，②使用适用的质控品进行质量监测，③分 析判断生化检测结果的可靠性。
发明内容
本发明目的是提供一种临床生化质控品及其制备工艺。本发明临床生化质控品的 冻干质控品粘稠度低，容易复溶与混勻，基质效应较小。本发明利用海藻糖以及多种复合酶稳定剂和复合蛋白保护剂、复合酶保护剂的组 合效应；包括保护剂(代号为SH001)、稳定剂(代号为SH060)；两者按适当比例与人或动物 血清(或血浆)组合冻干成为多项临床生化质控品。本发明生化质控品配方组成包括SH001保护剂、SH060稳定剂；两者按适当比例与 人或动物血清(或血浆)组合而成
(1)、SH001保护剂按以下组分和浓度范围配制化学试剂为分析纯，氯化钠4. 0 6. Og/L、枸橼酸0. 1 0. 5g/L、枸橼酸钠1. 0 2. 5g/L、磷酸二氢钠0. 5 1. 5g/L、腺嘌呤 0. 1 0. 8g/L、复合蛋白保护剂 HPD (Protein protectant HPD) 0· 5 2. Og/L、二硫苏糖 醇(DTT) 1. 0 5. Og/L,生物抑菌剂适量。(2)、SH060稳定剂按以下组分和浓度范围配制化学试剂为分析纯，其浓度范 围分别为甘露醇6.0 16. 0g/L、海藻糖5.0 10g/L、丙三醇2.0 5. 0g/L、复合酶保 护剂HP 1. 0 5. 0g/L、复合酶稳定剂AES 2. 5 6. 0g/L、牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA) 1· 0 2. 5g/L、迭氮钠 0· 2 0. 6g/g。(3)、SHOOl保护剂和SH060稳定剂配制后放置2 8 °C冰箱保存待用。本发明多项临床生化质控品制备工艺步骤如下⑴、基质来源血液中心健康人义务献血或动物源性全血或血清或血浆。(2)、质量要求生物源性病原体如乙型肝炎病毒(HBsAg)、抗一 HCV、抗一 HIV等传 染性指标均为阴性。⑶、血细胞分离取人类(或动物源性)新鲜全血200 400mL，置水平离心机3000 转离心30min使血细胞成分与血清或血浆分离，缓慢吸取上清液，计其体积X mL(X为100 250mL)待用。(4)、生化成分保护在200mL血清或血浆基质中缓慢加入SH001保护剂50 60
mL，轻轻摇勻置2°C 8°C 4 8h保存待用。(5)、生化成分稳定上述步骤⑷经保护处理的血清或血浆，再缓慢加入SH060稳 定剂30 40mL，充分混勻后密封置2°C 8°C 4 8h保存。(6)、取样检测取1 2mL两支同时在TC6060全自动生化分析仪检测，观察ALT、 AST、TBIL、DBIL、TBA、ALP、γ -GT、CHO、TP、ALB、BUN、CR、UA、GLU、TG、HDL-C、LDL-C、Apo-A 1、 Apo-B, LDH、CK、CK-MB、AMY、ADA、Ca、IP、K、Na、CL、Mg等临床生化指标是否符合多项临床生 化质控品标示值要求。如不符合则添加相应的生化成分分别配制成三水平的高、中、低值质 控品。(7)、分装和冻干保存采用棕色玻璃瓶将多项临床生化质控品按一定规格，如 lml、2ml、4ml、5ml等定量分装、快速冷冻，置医用冷冻干燥机内24 30h冻干、封口保存。血细胞分离时避免溶血，所使用的实验器具必需洁净并高压消毒灭菌；质控品制 备全过程必需无菌操作或在10万级净化环境中进行。本发明临床生化质控品质量监测
(1)、复溶取质控品2. OmLX 20支，精确加2. Oml重蒸馏水使其复溶； ⑵、均一性测定参照“体外诊断试剂校准品、质控品研究技术指导原则”进行。⑶、定值质控品赋值选择具有实溯源性的校准品(如Roche或Randox)校准生化 分析仪(如TC6060)及配套的生化试剂，然后按仪器使用说明书进行测定20支复溶的质控 品，统计分析计算质控品参考值范围。本发明临床生化质控品采用海藻糖以及多种复合酶稳定剂和复合蛋白保护剂、复 合酶保护剂的组合效应；具有对血液中蛋白质、酶和脂类等物质保护和稳定作用，一方面， 保持了酶与蛋白质结构生理活性所需要的环境；另一方面，稳定剂能够为酶和蛋白提高效 能；再次是采用冻干技术更利于各种生化成分的长期保存。因此，制备好的质控品，经过生 物溯源性链接程序及其参考方法赋值；在有效期内可作为生化分析仪和相配套生化试剂的 质控品，满足临床生化检验需求。本发明研制的冻干质控品粘稠度低，容易复溶与混勻，基质效应较�。幻鼙蘸� 置-20°C以下保存有效期为12各月，2°C 8°C保存有限期至少为6个月，开瓶使用2°C 8 °C保存可稳定一周。
具体实施例本发明临床生化质控品包括SH001保护剂和SH060稳定剂。本发明临床生化质控品配方组成如下
(1)、SH001保护剂氯化钠5. Og/L、枸橼酸0. 25g/L、枸橼酸钠2. Og/L、磷酸二氢钠
41. Og/L、腺 嘌呤0. 5g/L、复合蛋白保护剂HPD 1. Og/L、二硫苏糖醇(DTT) 2. 5g/L、生物抑菌 剂适量(0. 5%)。(2)、SH060稳定剂甘露醇8. Og/L、海藻糖7. 5g/L、丙三醇4. Og/L、复合酶保护剂 HP 2. 5g/L、复合酶稳定剂 AES 4. Og/L、BSA 2. 0g/L 迭氮钠 0. 5g/g。本发明多项临床生化质控品制备工艺步骤如下
⑴、基质来源血液中心健康人义务献血或动物源性全血或血清或血浆。(2)、质量要求生物源性病原体如乙型肝炎病毒(HBsAg)、抗一 HCV、抗一 HIV等传 染性指标均为阴性。(3)、血细胞分离取人类(或动物源性)新鲜全血200mL，置水平离心机3000转离 心30min使血细胞成分与血清(血浆)分离，缓慢吸取上清液，计其体积为IOOmL待用。(4)、生化成分保护在IOOmL血清(血浆)基质中缓慢加入SH001保护剂25mL，轻 轻摇勻置2 8°C 4 8h保存待用。(5)、生化成分稳定经保护处理的血清(血浆)，再缓慢加入SH060稳定剂25mL，充 分混勻后密封置2°C 8°C 4 8h保存。(6)、取样检测取ImL —支在TC6060全自动生化分析仪检测，观察临床生化30项 指标是否符合生化中值质控品水平要求。(7)、分装和冻干保存采用棕色玻璃瓶将多项临床生化质控品按2. Oml定量分 装、快速冷冻，置医用冷冻干燥机内24h冻干、封口保存。(8)、定值质控品赋值选择具有实溯源性的校准品(如Roche)校准TC6060生化分 析仪及配套的生化试剂，然后按仪器使用说明书进行测定20支复溶的质控品，统计分析计 算质控品参考值范围。(9)、保存与临床使用多项临床生化质控品密封后置2°C 8°C或_20°C保存，供 临床生化分析使用。
权利要求
1.一种临床生化质控品，其特征在于包括保护剂(SH001)和稳定剂(SH060);两者按 适当比例与人或动物血清或血浆组合而成；(1)、保护剂(SH001)组成和浓度范围氯化钠4.0 6. Og/L、枸橼酸0. 1 0. 5g/L、枸 橼酸钠1. 0 2. 5g/L、磷酸二氢钠0. 5 1. 5g/L、腺嘌呤0. 1 0. 8g/L、复合蛋白保护剂 HPD 0. 5 2. Og/L、二硫苏糖醇(DTT) 1. 0 5. Og/L、生物抑菌剂适量；(2)、稳定剂(SH060)组成和浓度范围甘露醇6. 0 16. Og/L、海藻糖5. 0 10g/L、丙三醇2. 0 5. 0g/L、复合酶保护剂HP1. 0 5. 0g/L、复合酶稳定剂 AES 2. 5 6. 0g/L、BSA 1. 0 2. 5g/L 迭氮钠 0. 2 0. 6g/g°
2.一种临床生化质控品的制备工艺，其特征在于按以下步骤配制，(1)、血细胞分离取人类或动物源性新鲜全血200 400mL，置水平离心机3000转离 心30min使血细胞成分与血清或血浆分离，缓慢吸取上清液，计其体积为100 250mL，待 用；(2)、生化成分保护在200mL血清或血浆基质中缓慢加入SH001保护剂50 60mL, 轻轻摇勻置2 8°C，保存4 他待用；(3)、生化成分稳定经上述保护处理的血清或血浆，再缓慢加入SH060稳定剂30 40mL,充分混勻后密封置2 8°C，4 8h保存；(4)、取样检测取1 2mL两支同时在TC6060全自动生化分析仪检测，观察ALT、AST、 TBIL、DBIL、TBA、ALP、y _GT、CHO, TP、ALB、BUN、CR、UA、GLU, TG、HDL-C, LDL-C, Apo-AU Apo-B, LDH、CK、CK-MB, AMY、ADA、Ca、IP、K、Na、CL、Mg 共 30 项临床生化指标添加相应的生 化成分可配制成质控品；(5)、分装和冻干保存采用棕色玻璃瓶将多项临床生化质控品按一定规格定量分装、 快速冷冻，置医用冷冻干燥机内M 30h冻干、封口保存。
全文摘要
本发明临床生化质控品及其制备工艺，利用海藻糖以及多种复合酶稳定剂和复合蛋白保护剂、复合酶保护剂的组合效应，制备成多项临床生化质控品，粘稠度低，容易复溶与混匀，基质效应较小。本发明分别对ALT、AST、TBIL、DBIL、TBA、ALP、γ-GT、CHO、TP、ALB、BUN、CR、UA、GLU、TG、HDL-C、LDL-C、Apo-A1、Apo-B、LDH、CK、CK-MB、AMY、ADA等酶或蛋白质、脂类及其代谢产物进行保护，有良好的稳定性，密封后置-20℃以下保存有效期为12各月，2～8℃保存有限期至少为6个月，效期稳定性较长，足以满足临床生化检验质控控制要求。
文档编号G01N33/50GK102128917SQ20101057677
公开日2011年7月20日 申请日期2010年12月7日 优先权日2010年12月7日
发明者揭克敏, 颜箫 申请人:江西特康科技有限公司
专业数控铣床产品供应商
20年生产经验，实力工厂，精工品质，质量有保障
