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一种蜂蜜中淀粉酶值的快速检测方法
【专利摘要】本发明公开了一种蜂蜜中淀粉酶值的快速检测方法，包括如下步骤：(1)样品制备：准确称取5.0g蜂蜜样品于烧杯中，加入7.5mL酶解缓冲液和10mL的蒸馏水，搅拌样品完全溶解，然后移入25mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀；(2)酶解：准确吸取2.5mL制备好的样品溶液于盛有12.5mL淀粉溶液的试管中混匀，在常温下酶解10min或20min；(3)显色：吸取酶解液于盛有显色液和蒸馏水的比色管中，常温下显色5min；(4)检测：把显色液颜色与多色比色卡对比，确定蜂蜜中淀粉酶值。本发明的特点是使淀粉酶在常温下与淀粉作用，并配合比色卡法进行检测。具有操作简便、条件简单、快速等优点。
【专利说明】一种蜂蜜中淀粉酶值的快速检测方法

【技术领域】
[0001]本发明具体涉及一种蜂蜜中淀粉酶值的快速检测方法，属于食品质量安全检测【技术领域】。

【背景技术】
[0002]淀粉酶值的高低是衡量蜂蜜生物活性、成熟度和新鲜度的重要质量指标之一。目前测定蜂蜜中的淀粉酶值的方法主要有分光光度计法、试管目测法、标准参考比色板法和试剂盒法等。第一种方法是国际通用的方法，此法准确、快速，但需分光光度计等设备，对检测人员的技术要求较高，不适于现场快速检测；第二种方法检测步骤复杂，且耗时；第三种方法是在第一种方法的基础上研究出来的比色卡，较为方便，但只有一种颜色，对于酶值低的样品，需检测一个小时以上，第四种方法实质上也是分光光度计法。此外，以上所有方法还都不能在常温下进行检测(需要在40°C水浴下酶解)。本发明在前人对蜂蜜中淀粉酶值研究的基础上，通过常温下酶解与酶值的关系，制作出多种颜色和对应酶值的比色卡，建立了一种能在常温下对蜂蜜中的淀粉酶值进行快速测定的检测方法。


【发明内容】

[0003]本发明的目的是在于提供一种蜂蜜中淀粉酶值的快速检测方法，能够现场完成对蜂蜜中淀粉酶值的快速测定，具有操作简便、条件简单、快速等优点。
[0004]为实现上述目的，本发明的技术方案为：
(1)样品的制备：准确称取5.O g蜂蜜样液于烧杯中，加入7. 5 mL酶解缓冲液和10 mL的蒸馏水，搅拌使样品完全溶解，然后移入25 mL容量瓶中，加入蒸馏水定容至刻度，摇匀；
(2)酶解：准确吸取2.5 mL制备好的样品溶液于盛有12. 5 mL淀粉溶液的试管中混匀；在常温下酶解10 min或20 min ；
(3)显色：吸取上述酶解液5.O mL于盛有2.5 mL显色液和6.6 mL蒸馏水的比色管中，常温下显色5 min ；
(4)检测：通过显色后溶液的颜色与比色卡的颜色对比，确定蜂蜜中的淀粉酶值。
[0005]上述步骤（I)中所述的酶解缓冲液，其组成为乙酸钠（0.43 moL/L)、氯化钠（O. ImoL/L)和冰醋酸（O. 7wt. %);上述步骤（2)中所述的淀粉溶液浓度为O. 04wt. % ;上述步骤
(3)中所述的显色液，其组成为碘化钾（4.04wt.%)和碘（O. OlSwt. % );上述步骤（3)所述比色管为25mL具塞比色管（管径2cm，管长15cm);上述（4)中所述的比色卡的制作及范围如下：在常温下，将一系列已知酶值的蜂蜜按I中所述步骤制备、酶解和显色，根据所获颜色，制成多色比色卡，对应的淀粉酶值分别为：
(1)0-24: O, 6，12，18，24 (显色时间 10 分钟）；
(2)0-14.5 : O, 2，4，7.5，14. 5 (显色时间 20 分钟）。
[0006]本发明的有益效果：本发明建立的采用多色比色卡法快速检测蜂蜜中淀粉酶值的方法。其显著特点是可以在常温下进行测定，不需要分光光度计、便携式仪器和水浴加热等仪器设备，具有操作简便、条件简单、快速等优点。因此该方法适合应用到工商、质检、超市和家庭等现场快速检测蜂蜜中的淀粉酶值，对蜂蜜产品的质量水平作出快速判断，以维护人们的经济利益和保证人们的食用安全。
[0007]【具体实施方式】：
实施例I:
比色卡的制作方法
(I)样品的制备：取已知酶值大于24的蜂蜜用蒸馏水稀释成酶值分别为6，12，18和24的蜂蜜样品；准确称取5. Og上述蜂蜜样液于烧杯中，加入7. 5 mL酶解缓冲液和约10 mL的蒸馏水，搅拌使样品完全溶解，然后移入25mL容量瓶中，加入蒸馏水定容至刻度并摇匀；以蒸馏水代替蜂蜜，作为酶值为O的样品。
[0008](2)酶解：准确吸取2. 5mL上述溶液于盛有12. 5mL淀粉溶液的试管中混匀，在常温下酶解IOmin。
[0009](3)显色：吸取上述酶解液5. OmL于盛有2. 5mL显色液和6. 6mL蒸馏水的比色管中显色，根据所获颜色，制成比色卡，比色卡对应的酶值范围为0-24。
[0010]实际样品测定
(1)样品的制备：准确称取5.Og蜂蜜样液于烧杯中，加入7. 5 mL酶解缓冲液和约10mL的蒸馏水，搅拌使样品完全溶解。然后移入25mL容量瓶中，加入蒸馏水定容至刻度并摇匀；
(2)酶解：准确吸取2.5mL制备好的样品溶液于盛有12. 5mL淀粉溶液的试管中混匀，在常温下酶解10 min。
[0011](3)显色：吸取上述酶解液5. OmL于盛有2. 5mL显色液和6. 6mL蒸馏水的比色管中，常温下显色5 min。
[0012](4)检测：通过显色液与比色卡的颜色对比，其颜色与酶值为24的色泽最为接近，故确定蜂蜜样品中的淀粉酶值为24。
[0013]实施例2:
比色卡的制作方法
(O样品的制备：取已知酶值大于15的蜂蜜用蒸馏水稀释成酶值分别为2，4，7. 5和14. 5的蜂蜜样品，准确称取5. Og上述蜂蜜样液于烧杯中，加入7. 5 mL酶解缓冲液和约10mL的蒸馏水，搅拌使样品完全溶解，然后移入25mL容量瓶中，加入蒸馏水定容至刻度并摇匀；以蒸馏水代替蜂蜜，作为酶值为O的样品。
[0014](2)酶解：准确吸取2. 5mL上述溶液于盛有12. 5mL淀粉溶液的试管中混匀，在常温下酶解20 min。
[0015](3)显色：吸取上述酶解液5. OmL于盛有2. 5mL显色液和6. 6mL蒸懼水的比色管中显色，根据所获颜色，制成比色卡，比色卡对应的酶值范围为0-14. 5。
[0016]实际样品测定
(1)样品的制备：准确称取5.Og蜂蜜样液于烧杯中，加入7. 5 mL酶解缓冲液和约10mL的蒸馏水，搅拌使样品完全溶解。然后移入25mL容量瓶中，加入蒸馏水定容至刻度并摇匀；
(2)酶解：准确吸取2.5mL制备好的样品溶液于盛有12. 5mL淀粉溶液的试管中混匀，在常温下酶解20 min。
[0017](3)显色：吸取上述酶解液5. OmL于盛有2. 5mL显色液和6. 6mL蒸馏水的比色管中，常温下显色5 min。
[0018](4)检测：通过显色液与比色卡的颜色对比，其颜色介于酶值为2和4的色泽之间，故估算蜂蜜样品中的淀粉酶值为3。
[0019]备注：上文中淀粉酶值的单位均为mL/(g · h)。
[0020]以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
【权利要求】
1.一种蜂蜜中淀粉酶值的快速检测方法，其特征在于包括以下步骤： (1)样品的制备：准确称取5.O g蜂蜜样液于烧杯中，加入7. 5 mL酶解缓冲液和10 mL的蒸馏水，搅拌使样品完全溶解，然后移入25 mL容量瓶中，加入蒸馏水定容至刻度，摇匀； (2)酶解：准确吸取2.5 mL制备好的样品溶液于盛有12. 5 mL淀粉溶液的试管中混匀；酶解 10 min 或 20 min ； (3)显色：吸取上述酶解液5.O mL于盛有2.5 mL显色液和6.6 mL蒸馏水的比色管中，常温下显色5 min ； (4)检测：通过显色后溶液的颜色与比色卡的颜色对比，确定蜂蜜中的淀粉酶值。
2.根据权利要求I所述的一种蜂蜜中淀粉酶值的快速检测方法，其特征在于：所述的酶解缓冲液的组成为O. 43 moL/L乙酸钠、O. I moL/L氯化钠和O. 7wt. %冰醋酸。
3.根据权利要求I所述的一种蜂蜜中淀粉酶值的快速检测方法，其特征在于：步骤（2)淀粉溶液的浓度为O. 04wt. %。
4.根据权利要求I所述的一种蜂蜜中淀粉酶值的快速检测方法，其特征在于：步骤（2)在常温下酶解。
5.根据权利要求I所述的一种蜂蜜中淀粉酶值的快速检测方法，其特征在于：步骤（3)中显色液的组成为4. 04wt. %碘化钾和O. 018wt. %碘。
6.根据权利要求I所述的一种蜂蜜中淀粉酶值的快速检测方法，其特征在于：比色管为25mL具塞比色管，管径2 cm，管高15 cm。
7.根据权利要求I所述的一种蜂蜜中淀粉酶值的快速检测方法，其特征在于：在常温下，将一系列已知酶值的蜂蜜按所述步骤制备、酶解和显色，根据所获颜色，制成多色比色卡，比色卡对应的酶值范围分别为0-24和0-14. 5。
【文档编号】G01N21/78GK104132939SQ201410330025
【公开日】2014年11月5日 申请日期:2014年7月12日 优先权日:2014年7月12日
【发明者】张金彪, 张素平, 周碧青 申请人:福建农林大学