专利名称：一种提取净化土壤中八氯二丙醚的方法
技术领域：
本发明属于农药残留分析技术领域，具体涉及一种提取净化土壤中八氯二丙醚的 方法。
背景技术：
八氯二丙醚(简称S421)，化学名称为双_(2，3，3，3-四氯丙基)醚，分子式 C6H60C18。常温下为淡黄色液态，不溶于水，可溶于乙醇、丙酮、甲苯等有机溶剂。八氯二丙醚 是一种农药增效剂，对多种拟除虫菊酯类农药有活化增效作用，多用于农药喷雾剂等。八氯 二丙醚是一种环境行为与滴滴涕类似的有机氯化合物，其性能稳定，在环境中滞留时间长， 而且在生物链中会发生生物富集作用，导致在人和其他生物体中的残留，属于持久性有机 污染物。根据八氯二丙醚在动物学上的毒理学研究结果，八氯二丙醚可能具有致畸、致癌、 致突变作用。2005年底，中国对德国出口的多种脱水蔬菜(蘑菇、青椒、洋葱、生姜、绿菜花等)出 现了八氯二丙醚残留问题，最高值超出欧盟标准5倍。此外，我国出口的茶叶亦被欧盟、日 本检测出含有八氯二丙醚而遭退货。欧盟和日本均将茶叶中八氯二丙醚的最高限量标准定 为0. 01mg/kg。据我国海关总署报道，近几年欧盟、日本相继提高农残检测标准，我国出口茶 叶将面临更加严峻的挑战。由于八氯二丙醚在我国长时间的大量应用，其在环境中具有一 定的的累积性，因此八氯二丙醚残留问题将直接影响到我国农副产品安全及其出口。农产 品中八氯二丙醚含量超标的主要原因还是因为土壤受到八氯二丙醚的污染，具体表现在使 用含有八氯二丙醚的农药和肥料上。一旦八氯二丙醚在土壤中形成一定的积累，就不容易 消除，农作物的根系从土壤中吸收水分和养料的同时就将八氯二丙醚吸收，就会导致农产 品中含有八氯二丙醚。为此，土壤中八氯二丙醚的提取、测定方法显得十分迫切。目前国内外提取土壤中 八氯二丙醚的文献很少，且现有的方法都没有经过柱析层分离，会导致样品杂质过多，影响 仪器分析及结果的准确性。有的方法中采用浸提或振动提�。势停械奶崛∫鹤槌筛� 杂、有的磺化步骤不合理，都会影响到最终结果的准确性。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的上述不足，提供一种操作简单、且能有效去除 干扰物质的土壤中八氯二丙醚的提取净化方法。本发明通过以下技术方案实现上述目的
一种提取净化土壤中八氯二丙醚的方法，是在土壤样品加入正己烷_丙酮混合液，提 取、离心，上清液浓缩，过层析柱，用正己烷洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到八氯二丙醚的提取 液；所述层析柱由上至下依次填充3 4cm的无水硫酸钠，iTllcm的硅胶-浓硫酸混合物、 3^4cm的无水硫酸钠、脱脂棉。现有的提取方法中，采用振荡提取土壤、茶叶和蔬菜样品中八氯二丙醚，但提取效率相对较低。本发明采用超声提取土壤样品中八氯二丙醚，消耗时间短，提取效率高，操作 简单。现有的净化方法中，有用玻璃层析柱进行过柱分离的，所用玻璃层析柱中依次加 入2cm无水硫酸钠、lg酸性娃藻土，2cm无水硫酸钠。娃藻土结构较松散,过滤效果好，所以 硅藻土常用作层析柱吸附剂。但酸性硅藻土很难填充至玻璃层析柱，操作不方便。硅胶具 备多孔性、低密度、比表面积大、化学稳定性高、良好的澄清度及脱色度、吸附力强等特点， 被广泛用作层析柱吸附剂。且硅胶对茶叶中八氯二丙醚的净化效果与硅藻土相当。本发明 使用硅胶与浓硫酸的混合物作为吸附剂，克服了上述缺陷，能够最大限度地吸附土壤样品 中的八氯二丙醚，使后期的检测结果更为准确。上述方法中，优选硅胶-浓硫酸混合物的配制为每5g硅胶加2mL浓硫酸。上述提取土壤中八氯二丙醚的方法，所述土壤样品优选为已经去除砂砾和植物残 体，经过自然风干、磨碎、过18目以上筛的土壤。上述提取土壤中八氯二丙醚的方法，所述正己烷-丙酮混合液中正己烷与丙酮的 体积比最佳为22:3。上述提取土壤中八氯二丙醚的方法，提取可以选用浸泡过夜提取或超声提取等方 法，经过多次试验摸索，发现以下步骤最为简便快速超声提取lOmin，离心为4000r/min离 心5min，提取和离心的步骤重复两次。上述提取土壤中八氯二丙醚的方法，过层析柱前最好先用正己烷预淋洗层析柱， 浓缩液过层析柱后，先用正己烷润洗盛装浓缩液的容器，然后再用润洗液洗脱层析柱。增加 润洗步骤以使最终测定结果的误差最小。洗脱液浓缩后用正己烷润洗容器2 3次，连同润 洗液一起转移到棕色瓶中，在氮吹仪下用氮气吹干，正己烷定容。与现有技术相比，本发明具有以下有益效果
本发明采用超声提取、酸性硅胶层析柱分离，具有提取时间短、效率高、层析柱易填充、 净化效果好、提取效率高等特点。
具体实施例方式以下通过具体实施方式
进一步解释本发明，实施例中如无特殊说明均为本领域常 规实验手段。实施例1蔬菜基地土壤中八氯二丙醚的提取测定 1. 土壤样品制备
在华南农业大学蔬菜基地中采集种植小白菜、生菜、上海青的土壤样品，去除土样中的 砂砾和植物残体，自然风干，然后磨碎，过18目筛，备用。2.超声、离心提取
称取约10. OOg 土样于三角瓶中，加入20mL正己烷-丙酮提取液(体积比约22:3)，超声 提取lOmin，转移提取液于100mL离心管中，于4000r/min离心5min，转移上清液于圆底烧 瓶中，上清液重复超声提取、离心两遍，将上清液在真空旋转蒸发仪浓缩至5mL。3.柱层析净化
玻璃层析柱直径1cm，长30cm，层析柱最下端填充脱脂棉、两端为3_4cm的无水硫酸钠， 中间为10cm左右的硅胶-硫酸混合物(5g硅胶2 mL浓硫酸)装柱。先用正己烷预淋洗层析柱，再将步骤2中的浓缩液转移至层析柱，然后用正己烷润洗烧瓶，每次五滴管(约6mL)， 润洗液过层析柱，重复洗五次。收集洗脱液。4.浓缩定容
将步骤3中的洗脱液在旋转蒸发仪中浓缩至近干，用正己烷润洗浓缩液2-3次，转移到 棕色样品瓶(2. OmL)，在氮吹仪下用高纯氮气吹干，用正己烷定容至lmL，待测定。5.气相色谱_质谱仪器进行定量分析 具体的气相色谱_质谱仪器分析条件如下
安捷伦 7890GC-5975C MSD
色谱柱HP-5 30mX0. 25mmi. dXO. 25 u m 流速1. OmL/min 不分流进样 进样量luL
柱温150°C (3min), 5°C /min 至 210。。(2min)
检测器280°C 进样口 250°C
选择离子监测m/z 79、130、181、211 离子源温度150°C 6.标准曲线
采用八氯二丙醚储备液稀释配制了标准曲线，浓度为0. 1,0. 5,1. 0,2. 0,5. Oug/mL, 经气相色谱_质谱仪器联机检测，以其色谱图上的响应值与浓度作标准曲线，回归方程为 Y=237891X - 40724，相关系数(#)为 0. 9983。7.检测结果
种植小白菜、生菜、上海青的土壤样品中八氯二丙醚平均含量分别为0.053 mg/kg、 0. 039 mg/kg、0. 041mg/kg。另外，采用该方法分析检测了在某蔬菜生产基地采集的小白菜、菜心、茄子中八氯 二丙醚，其中小白菜中未检出八氯二丙醚，菜心和茄子中八氯二丙醚平均含量分别为0. 113 mg/kg和 0. 077mg/kg。实施例2不同方法中八氯二丙醚回收率的比较 设置以下实验组
第一组溶剂空白，溶剂为正己烷-丙酮混合液(体积比22:3);
第二组土壤空白，取不含八氯二丙醚的土壤作为空白对照；
第三组溶剂加标，在正己烷_丙酮混合液中加入八氯二丙醚，浓度为5. 0 u g/mL ； 第四组土壤加标，在不含八氯二丙醚的土壤中加入八氯二丙醚，浓度为10ii g/g ； 以上各组按照实施例1中步骤2飞进行实验，检测结果为第一、二组均未检测到八氯 二丙醚，第三组八氯二丙醚的加标回收率为92. 4%，第四组的回收率为90. 4%。.
实施例3配制污染土壤中八氯二丙醚的提取测定
分别称取5kg的菜园土、赤红壤和水稻土，再加入不同量的八氯二丙醚，配成含八氯二 丙醚浓度为10mg/kg的污染土壤，种植菜心。在蔬菜收获期分别采集土壤样品，按实施例1 中的步骤进行提取与检测，结果发现菜园土、赤红壤、水稻土中八氯二丙醚的平均含量分别为3. 76 mg/kg>3. 46 mg/kg、1. 86mg/kg。各不同土壤上收获的菜心经过提取与检测后，结果 发现菜心中均含有八氯二丙醚，表明土壤中的污染物已经部分转移到农作物中。
权利要求
1.一种提取净化土壤中八氯二丙醚的方法，其特征在于土壤样品加入正己烷-丙酮混合液，超声提取、离心，取上清浓缩，浓缩液过层析柱，用正己烷洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到八氯二丙醚的提取液； 所述层析柱由上至下依次填充3 4cm的无水硫酸钠，iTllcm的硅胶-浓硫酸混合物、3^4cm的无水硫酸钠、脱脂棉。
2.根据权利要求I所述提取净化土壤中八氯二丙醚的方法，其特征在于硅胶-浓硫酸混合物的配制为每5g娃胶加2mL浓硫酸。
3.根据权利要求I所述提取净化土壤中八氯二丙醚的方法，其特征在于所述土壤样品为已经去除砂砾和植物残体，经过自然风干、磨碎、过18目以上筛的土壤。
4.根据权利要求I所述提取净化土壤中八氯二丙醚的方法，其特征在于正己烷-丙酮混合液中正己烷与丙酮的体积比为22:3。
5.根据权利要求I所述提取净化土壤中八氯二丙醚的方法，其特征在于提取是用超声提取IOmin,离心为4000r/min离心5min,提取和离心的步骤重复两次。
6.根据权利要求I所述提取净化土壤中八氯二丙醚的方法，其特征在于过层析柱前先用正己烷预淋洗层析柱，浓缩液过层析柱后，先用正己烷润洗盛装浓缩液的容器，然后再用润洗液洗脱层析柱。
7.根据权利要求I所述提取净化土壤中八氯二丙醚的方法，其特征在于洗脱液浓缩后用正己烷润洗容器2 3次，连同润洗液一起转移到棕色瓶中，在氮吹仪下用氮气吹干，正己烷定容。
8.权利要求I所述提取净化土壤中八氯二丙醚的方法在提取净化蔬菜、茶叶中八氯二丙醚的应用。
全文摘要
本发明公开了一种提取净化土壤中八氯二丙醚的方法，属于农药残留分析技术领域。本发明的提取净化方法是在土壤样品中加入正己烷-丙酮混合液，提取、离心，取上清浓缩，浓缩液过层析柱，用正己烷洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到八氯二丙醚的提取液；所述层析柱由上至下依次填充3~4cm的无水硫酸钠，9~11cm的硅胶-浓硫酸混合物、3~4cm的无水硫酸钠、脱脂棉。本发明的提取方法步骤简单易操作，且提取液中的八氯二丙醚量最接近土样中的原始含量，为后续检测的准确性奠定了基础。
文档编号G01N30/12GK102662021SQ201210136110
公开日2012年9月12日 申请日期2012年5月4日 优先权日2012年5月4日
发明者冼雪晖, 吕辉雄, 曾巧云, 王慧, 田军建, 蔡全英, 谭建华 申请人:华南农业大学
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