亚星游戏官网-www.yaxin868.com

专利名称：髓过氧化物酶测定试剂盒的制作方法
技术领域：
本发明涉及ー种测定试剂盒，特别是涉及ー种髓过氧化物酶测定试剂盒。
背景技术：
髓过氧化物酶(myeloperoxidase，MP0)又称过氧化物酶，是过氧化物酶家族中的 重要成员，是ー种由活化的中性粒細胞、单核細胞、巨噬细胞分泌的白細胞酶，是ー种重要 的含铁溶酶体，存在于髓系特异性标志，MPO水平与中性粒細胞激活程度之间存在极显著的 相关性，是中性粒細胞的活化标志物。现在，国内外生产的髓过氧化物酶试剂盒大量采用了 ELISA方法和选择抑制法。其中ELISA法是利用基本的抗原-抗体特异性反应的原理进行检 查，但操作过程复杂而且会直接影响检测結果，比如洗板的干净程度将直接影响测定結果， 并且该方法无法实现精确定量的目的，測定一个标本需要30分钟 数小吋。选择抑制法， 因这种试剂盒采用三试剂三步测定的基本原理和计算模式，只能在支持(具有)添加三种或 以上试剂同时检测15分钟反应的全自动生化分析仪測定，使用极为复杂和不便，而且试剂 中的抑制剂无法保证其对酶活性抑制的特异性和专ー性，測定的唯一性有待考究，在实践 的过程中发现其精密度较差。

发明内容
本发明的目的在于克服上述缺点，提供一种基于抗原-抗体特异性反应原理，测 定时间短，特异性好，精密度高，准确度好，且节约试剂位，可普遍用于各类全自动化分析仪 的髓过氧化物酶测定试剂盒。本发明髓过氧化物酶测定试剂盒包括两种试剂，其配合比例按重量百分数计是， 试剂1:试剂2= 50 90:10 50，其中，
试剂1组分按重量百分数计是 氯化钠1 .00 10. 00，
三羟甲基氨基甲烷缓冲液0. 40^10. 00，
表面活性剂0. 05 2. 00，
叠氮钠0. 02 0. 20，
超纯水77. 80 98. 53 ；
试剂2组分按重量百分数计是 抗体-纳米微球复合物0. 0广5. 00，
三羟甲基氨基甲烷缓冲液0. 40^10. 00，
表面活性剂0. 05 2. 00，
叠氮钠0. 02 0. 20，
超纯水82. 8 99. 52。其中，抗体-纳米微球复合物是兔抗人MPO-纳米复合物，鸡抗人MPO-纳米复合 物，鸭抗人MPO-纳米复合物，鹅抗人MPO-纳米复合物，羊抗人MPO-纳米复合物，鼠抗人MPO-纳米复合物，马抗人MPO-纳米复合物中的一种。其中，纳米材料的直径中50 5000nm 的微球；表面活性剂是吐温-20，曲拉通，EMULGEW20中的一种。使用时，按试剂1:试剂2= 50 90:10 50的比例范围，分别取出试剂1和试剂2，混合后用于测定一份血清标本。
本发明髓过氧化物酶测定试剂盒的优点在于测定时间短，只需要8-10分钟，特异性好，精密度高，准确度好，且节约试剂位，可普遍用于各类全自动化分析仪，测定髓过氧化物酶。使用时将含有髓过氧化物酶或者怀疑含有髓过氧化物酶的血清样品与抗体-纳米微球复合物结合，产生不溶性的抗原-抗体复合物，产生一定浊度。浊度高低反映样品中髓过氧化物酶的含量，通过与同样处理的髓过氧化物酶配套校准品比较，即可计算出样品中髓过氧化物酶的含量。
具体实施例方式实施例1
试剂盒按重量百分数计是试剂1:试剂2=50:50t其中，试剂1组分按重量百分数计是 氯化钠1.00 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 0. 40 吐温-20 0. 05 叠氮钠 0.02 超纯水 98. 53 将上述成分混合后即得试剂1。试剂2组分按重量百分数计是 兔抗人MPO-纳米复合物0.01 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 0. 40 吐温-20 0. 05 叠氮钠 0.02 超纯水 99. 52 将上述成分混合后即得试剂2。实施例2
试剂盒按重量百分数计是试剂1:试剂2=55:45t其中，
试剂1组分按重量百分数计是 氯化钠2. 00
三羟甲基氨基甲烷缓冲液1. 00
曲拉通0. 10
叠氮钠0.06
超纯水96.84
将上述成分混合后即得试剂1。试剂2组分按重量百分数计是
鸡抗人MPO-纳米复合物
1. 00三羟甲基氨基甲烷缓冲液1. 00
曲拉通0. 10
叠氮钠0.06
超纯水97.84 将上述成分混合后即得试剂2。实施例3
试剂盒按重量百分数计是试剂1:试剂2=60:40t其中，
试剂1组分按重量百分数计是
氯化钠3.00
三羟甲基氨基甲烷缓冲液2. 00 EMULGEN120 0. 50
叠氮钠0. 10
超纯水94.40 将上述成分混合后即得试剂1。试剂2组分按重量百分数计是 鸭抗人MPO-纳米复合物1. 80 三羟甲基氨基甲烷缓冲液2. 00 EMULGEN120 0. 50 叠氮钠0. 10 超纯水95.60 将上述成分混合后即得试剂2。实施例4
试剂盒按重量百分数计是试剂1:试剂2=65:35t其中，
试剂1组分按重量百分数计是
氯化钠5.00
三羟甲基氨基甲烷缓冲液3. 00
吐温-200. 80
叠氮钠0. 14 超纯水 91.06 将上述成分混合后即得试剂1。试剂2组分按重量百分数计是 鹅抗人MPO-纳米复合物3. 00 三羟甲基氨基甲烷缓冲液3. 00 吐温-200. 80 叠氮钠0. 14 超纯水93.06 将上述成分混合后即得试剂2。
实施例5
试剂盒按重量百分数计是试剂1:试剂2=70:30。其中，
试剂1组分按重量百分数计是
氯化钠7.00
三羟甲基氨基甲烷缓冲液4. 00
曲拉通1. 20
叠氮钠0. 16
超纯水87.64 将上述成分混合后即得试剂1。
试剂2组分按重量百分数数计是
羊抗人MPO-纳米复合物4. 00
三羟甲基氨基甲烷缓冲液4. 00
曲拉通1. 20
叠氮钠0. 16
超纯水90.64
将上述成分混合后即得试剂2。
实施例6
试剂盒按重量百分数计是试剂1:试剂2=80:20。其中，
试剂1组分按重量百分数计是 氯化钠8.00
三羟甲基氨基甲烷缓冲液8. 00
EMULGEN1201.60
叠氮钠0. 18
超纯水82. 22
将上述成分混合后即得试剂1。试剂2组分按重量百分数计是 鼠抗人MPO-纳米复合物4. 50 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 8. 00 EMULGEN120 1.60 叠氮钠 0. 18 超纯水 85. 72 将上述成分混合后即得试剂2。实施例7
试剂盒按重量百分数计是试剂1:试剂2=90:10。
其中，
试剂1组分按重量百分数计是 氯化钠10.00
6三羟甲基氨基甲烷缓冲液10. 00
EMULGEN1202.00
叠氮钠0. 20
超纯水77.80 将上述成分混合后即得试剂1。
试剂2组分按重量百分数计是
马抗人MPO-纳米复合物5. 00
三羟甲基氨基甲烷缓冲液10. 00
EMULGEN1202.00
叠氮钠0. 20
超纯水82.8 将上述成分混合后即得试剂2。
权利要求
1. 一种髓过氧化物酶测定试剂盒，其特征在于包括两种试剂，其配合比例按重量百分数计是试剂1:试剂2= 50 90:10 50，其中，试剂1组分按重量百分数计是 氯化钠三羟甲基氨基甲烷缓冲液表面活性剂叠氮钠超纯水试剂2组分按重量百分数计是 抗体-纳米微球复合物1.00 10.00，0. 40 10· 00， 0. 05 2. 00， 0. 02^0.20， 77. 80^98. 53 ；0. 01-5. 00，三羟甲基氨基甲烷缓冲液表面活性剂叠氮钠超纯水0. 40 10.00， 0. 05 2. 00， 0. 02^0. 20， 82. 80^99. 52。
2.如权利要求1所述的髓过氧化物酶测定试剂盒，其特征在于抗体-纳米微球复合物是兔抗人MPO-纳米复合物，鸡抗人MPO-纳米复合物，鸭抗人MPO-纳米复合物，鹅抗人 MPO-纳米复合物，羊抗人MPO-纳米复合物，鼠抗人MPO-纳米复合物、马抗人MPO-纳米复合物中的一种，其中纳米材料的直径是50 5000nm的微球。
3.如权利要求1所述的髓过氧化物酶测定试剂盒，其特征在于表面活性剂是吐温-20， 曲拉通，EMULGEN120中的一种。
全文摘要
本发明提供一种髓过氧化物酶测定试剂盒。其特征在于包括两种试剂，其配合比例按重量百分数计是试剂1∶试剂2=50～90∶10～50，其中，按重量百分数计是，试剂1组分为氯化钠1~10、三羟甲基氨基甲烷缓冲液0.4~10、表面活性剂0.05~2、叠氮钠0.02~0.2、超纯水77.8~98.53；试剂2组分为抗体-纳米微球复合物0.01-5、三羟甲基氨基甲烷缓冲液0.4~10、表面活性剂 0.05~2、叠氮钠0.02~0.2、超纯水82.8~99.52。该测定试剂盒测定时间短，特异性好，精密度高，准确度好，且节约试剂位，可普遍用于各类全自动化分析仪。用于测定髓过氧化物酶。
文档编号G01N33/536GK102426235SQ201010607498
公开日2012年4月25日 申请日期2010年12月28日 优先权日2010年12月28日
发明者周帅, 周方银, 谭韬, 陈卫 申请人:四川省新成生物科技有限责任公司