专利名称：一种用液相色谱法分离测定度洛西汀中间体及其光学异构体的方法
技术领域：
本发明属于分析化学领域，具体涉及一种用液相色谱法分离测定度洛西汀中间体及其光学异构体的方法。
背景技术：
度洛西汀是一种5-羟色胺和去甲肾上腺素再提取双重抑制剂，用于治疗各种抑郁症和焦虑症，以及缓解中枢性疼痛如糖尿病外周神经病性疼痛和妇女纤维肌痛等的药物。(S)-(+)_N, N- 二甲基-3-(1-萘氧基)-3-(2-噻吩基)-丙胺,分子式为C19H21NOS,为度洛西汀合成路线中的重要中间体，其结构见下图。因其与终产品度洛西汀含有同样的手性中心，因此，作为合成必需的手性中间体，在定向合成路线中，其光学纯度对终产品的质量有重要影响。 对于度洛西汀中间体的光学异构体杂质，在定向合成目标终产品度洛西汀的过程中，需要对其光学异构体的含量进行质量控制，以确保终产品的质量。含有手性碳原子的对映体的分离一直是手性药物合成中质量控制的难点，实现对度洛西汀中间体及其光学异构体的分离，在度洛西汀的质量控制方面具有现实意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种分离测定度洛西汀中间体[(S)-⑴-N，N-二甲基-3-(I-萘氧基)-3_ (2-噻吩基)_丙胺]及其光学异构体的高效液相方法，从而实现度洛西汀中间体与其光学异构体的分离和测定，合格的中间体进入定向合成，以保证终产品度洛西汀原料药的质量控制。本发明所述的用液相色谱法分析度洛西汀中间体及其光学异构体的方法，是采用以纤维素三(对甲苯基甲酸酯)为填料的手性色谱柱，以正己烷-低级醇溶液为流动相，其中低级醇溶液中包含有机碱。上述所说的手性色谱柱以纤维素三(对甲苯基甲酸酯)为填料，选自牌号为CHIRALCEL OJ 和 CHIRALCEL OJ-H 的色谱柱。上述所说的低级醇选自以下溶液中的一种甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇，优选为乙醇或异丙醇。上述所说的方法，其流动相正己烷-低级醇溶液体积比为99. 5 :0. 5 95 :5，优选体积比为99 :1，更优选的是正已烷一乙醇或异丙醇的体积比为99 :1。上述所说的方法中，低级醇溶液中包含的有机碱选自乙二胺、二乙胺和三乙胺中的一种有机碱，优选为二乙胺。其中低级醇溶液中包含有机碱，其含有机碱的浓度(V/V)为0. 05 0. 5%，优选浓度为0. 1%，最优为含0. 1%的二乙胺。本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现(I)取度洛西汀中间体样品适量，用甲醇、乙醇或流动相溶解样品，配制成含度洛西汀中间体0. I I. 5mg的样品溶液。(2)设置流动相流速为0. 4 I. OmL/min，流动相流速优选为0. 5mL/min,检测波长为210 250nm，最佳检测波长为225nm，色谱柱柱箱温度为20 40°C，柱箱柱温最佳为20。。。(3)取(I)的样品溶液10 50UL，注入液相色谱仪，完成度洛西汀中间体与光学异构体的分离测定。其中
高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为岛津岛津LC-10ATvp，SPD-MlOAvp
色谱柱0J-H (CHIRALCEL 250X4. 6mm)
流动相正己烷-异丙醇(含0. 1% 二乙胺)=99:1流速0. 5 mL/min 检测波长225nm 柱温20°C 进样体积20 ii L
本发明采用OJ-H(CHIRALCEL 250X4. 6mm)，能够有效的分离度洛西汀中间体。本发明解决了度洛西汀中间体及其光学异构体的分离测定问题，以此可对度洛西汀中间体进行含量检测，从而确保了终产品度洛西汀原料药的质量可控。
图I空白溶剂的高效液相色谱图 图2度洛西汀中间体消旋体的高效液相色谱图 图3度洛西汀中间体的高效液相色谱图
具体实施例方式 以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围。实施例I 仪器与条件
高效液相色谱仪岛津LC_10ATvp, SPD-MIOAvp ；
色谱柱0J-H (CHIRALCEL 250X4. 6mm)；
流动相正己烷-异丙醇(含0. 1% 二乙胺)=99:1 ；
流速0. 5 mL/min ；
检测波长225nm ；
柱温20°C ;
进样体积20u L。实验步骤
取度洛西汀中间体的消旋体约25mg，置50mL量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。分别取试剂空白溶液和供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见图I、图2。
图2中保留时间为23. 163min的色谱峰为度洛西汀中间体对映异构体的色谱峰，28. 007min的色谱峰为度洛西汀中间体的色谱峰，由图可以看出，度洛西汀中间体与其对映体能够达到基线分离，符合中国药典的要求。实施例2 仪器与条件
高效液相色谱仪岛津LC_10ATvp, SPD-MIOAvp ；
色谱柱0J-H (CHIRALCEL 250X4. 6mm)；
流动相正己烷-异丙醇(含0. 1% 二乙胺)=99:1 ；
流速0. 5 mL/min ；
检测波长230nm ；
柱温20°C ;
进样体积20u L。实验步骤
取度洛西汀中间体约25mg，置50mL量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见图3。图3中保留时间为22. 015min的色谱峰为度洛西汀中间体的色谱峰，由图可以证明，度洛西汀中间体的光学纯度符合要求，可用于后续度洛西汀的合成反应，本法可以用于度洛西汀中间体的质量监测。从图I 一图3表明本发明的方法，可以清楚地将度洛西汀中间体与其光学异构体分离，并可以准确进行检测定量，以计算出光学异构体的含量，从合成中间体的质量控制入手，从而有效控制终产品度洛西汀的产品质量。
权利要求
1.一种液相色谱法分离测定度洛西汀中间体或/和其光学异构体的方法，其特征在于采用以纤维素三(对甲苯基甲酸酯)为填料的手性色谱柱，以正己烷-低级醇溶液为流动相；其中所述低级醇溶液中包含选自乙二胺、二乙胺或三乙胺中的一种有机碱，有机碱在低级醇溶液中的浓度(V/V)为0. 05 0. 5%，正己烷-低级醇溶液体积比为99. 5 :0. 5 95 :5。
2.根据权利要求I所述的分离测定方法，手性色谱柱选自CHIRALCELOJ和CHIRALCELOJ-H的色谱柱。
3.根据权利要求I所述的分离测定方法，所说的低级醇选自以下溶液中的一种甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇。
4.根据权利要求3所述的分离测定方法，所说的低级醇为乙醇或异丙醇。
5.根据权利要求I所述的分离测定方法，所说的正己烷-低级醇溶液的体积比为99:Io
6.根据权利要求I所述的分离测定方法，所说的低级醇溶液中包含的有机碱为二乙胺。
7.根据权利要求6方法中，所说的低级醇溶液中所含有机碱二乙胺的浓度为0.1%。
8.根据权利要求I所述的分离测定方法，其特征在于，该分离测定方法包括以下几个步骤 1)取度洛西汀中间体样品适量，分别用乙醇、甲醇或流动相中的一种溶剂溶解样品，配制成每ImL含度洛西汀中间体0. I I. 5mg的样品溶液； 2)设置流动相流速为0.4 I. OmL/min，检测波长为210 250nm，色谱柱柱箱温度为20 40°C ； 3)取I)的样品溶液10 50ii L，注入液相色谱仪，完成度洛西汀中间体与其光学异构体的分离测定。
9.根据权利要求8所述的分析分离方法，步骤2)所说的流动相流速优选为0.5mL/min0
10.根据权利要求8所述的分析分离方法，步骤2)所说的检测波长为225nm。
全文摘要
本发明属分析化学领域，具体公开了一种用液相色谱法分离测定度洛西汀中间体[(S)-(+)-N，N-二甲基-3-(1-萘氧基)-3-(2-噻吩基)-丙胺]及其光学异构体的方法，该方法以纤维素三(对甲苯基甲酸酯)为填料的手性色谱柱，以一定比例的正已烷－低级醇溶液的混合溶剂为流动相，可以定量测定度洛西汀中间体的光学异构体的含量，从而通过定向合成，有效控制终产品度洛西汀原料药的质量。本发明方法专属性强，准确度高，操作简便。
文档编号G01N30/88GK102866222SQ201210338518
公开日2013年1月9日 申请日期2012年9月14日 优先权日2012年9月14日
发明者陈东, 李倩, 郭夏 申请人:北京万全德众医药生物技术有限公司
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