专利名称：面粉中过氧化钙的检测试剂盒及过氧化钙检测方法
技术领域：
本发明涉及检测用试剂盒及其应用，尤其是涉及一种快速测定面粉中过氧化钙的试剂盒及对面粉中人为掺加过氧化钙定性和半定量的测定方法。
背景技术：
过氧化钙是淡黄色结晶粉末，分子量72. 08，广泛用于食品、化工、纺织等行业。常用于改善小麦粉的后熟、面粉增白、麦粉增筋剂、面粉脱色剂、面包改良剂食用油漂白等领域。为了增加小麦粉的筋道和口感，面粉行业普遍加入过氧化苯甲酰、过氧化钙作为小麦粉增筋剂、增白剂。我国自2011年5月I日起，禁止在面粉生产中添加过氧化苯甲酰、过氧化钙[卫生部等七部(局)发布《关于撤销食品添加剂过氧化苯甲酰、过氧化钙的公告》(2011年第4号)]。
将过氧化钙添加到面粉中，长期食用可能会致癌，对人体健康会产生很大的�：�。而有些面粉生产厂家为了面粉脱色、加快面粉的熟化，可能违规滥加过氧化苯甲酰或过氧化钙。现有的国家标准、行业标准和公开文献中，还没有检测面粉中过氧化钙的方法以及快速测定试剂盒。因此，建立一个快速、准确的面粉中过氧化钙定性及半定量测定方法有重要意义。
发明内容
本发明目的是提供一种对面粉中过氧化钙快速检测的试剂盒，以及应用该试剂盒对面粉中过氧化钙进行定性和半定量的测定方法。为此，本发明采用如下的技术方案面粉中过氧化钙快速测定试剂盒，其特征在于(I)塑料样品勺，装满一平勺面粉质量约2g ；(2)带有刻度的一次性塑料滴管3mL ；(3) 50mL具塞玻璃比色管；(4) 5OmL玻璃或塑料量筒；(5)试管架，孔的直径适合50mL具塞玻璃比色管；(6)标准比色卡，标准比色卡为淡红色至深红色呈梯度变化的系列色卡，每条下面均对应其代表的过氧化钙的含量；(7)过氧化物酶显色试剂；(8)广泛 pH 试纸(1-14)和精密 pH 试纸(6. 4-8. O)；(9)反应试剂三个塑料瓶装的试剂，每瓶体积500_1000mL，分别为I %稀硫酸、20%稀氢氧化钠、O. I %氢氧化钠；(10)500mL 塑料洗瓶。面粉中过氧化钙快速检测试剂盒的应用，其具体步骤是(I)取一勺试样，加入1%稀硫酸20mL，涡旋混合均匀，充分反应IOmin ；(2)加入20%氢氧化钠溶液用广泛pH试纸调节pH到5-6之间,然后用O. 1%氢氧化钠溶液调节溶液PH值到7. O。(3)加入过氧化物酶显色试剂溶液2mL,定容到50mL,室温下显色5-10min后,观察颜色。(4)将所得颜色与标准比色卡对照。步骤(3)过氧化物酶试剂混合溶液由组合试剂构成，现用现配。A号瓶含辣根过氧化物酶2000U (活力单位)；B号瓶含4-氨基安替比林O. 00154mol/L的O. 2mol/L的磷酸盐缓冲液(pH = 7.6)200mL;C号瓶含0.022mol/L苯酚溶液200mL。使用时，先将B和C溶液充分混合，然后将A中的酶溶解在混合液中，轻轻摇动，使酶完全溶解，即为过氧化物酶试剂溶液，酶活力IOU(活力单位)/mL。结果判定，样品溶液若不变色，则没有掺加过氧化钙，属于合格的面粉；溶液若有 颜色变化，则为掺有过氧化钙。过氧化苯甲酰虽然也是面粉加工常用的增白剂，属于强氧化齐U，但在该方法的条件下，在含过氧化苯甲酰1000mg/kg及以下含量条件下不影响检测结
果O面粉中过氧过钙检测标准比色卡的制作方法(I)精确称取IOg不含过氧化钙的面粉作为空白基质，加入准确称量的过氧化钙标准品，配制成过氧化钙的系列加标含量，分别加入50mL质量浓度为I %稀硫酸，涡旋混匀，充分反应lOmin。(2)用20%和O. I %的氢氧化钠溶液调整pH值到7. O。(3)加入过氧化物酶组合试剂溶液，在37°C水浴锅中恒温显色20min，冷却至室温，定容至50mL。(4)将显色的标准溶液采集照片，将梯度变化的一组彩色照片而制成标准比色卡。根据颜色的深浅来定性和半定量。制作方法(I)中所配制的空白基质加标含量梯度范围优选在20mg/kg-1000mg/kg之间，如 20mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg、500mg/kg、1000mg/kg。有益效果I)试剂盒法快速定性和半定量检测面粉中过氧化钙的方法，方法简单、快速、灵敏度高、结果鲜明。2)利用本发明的面粉中过氧化钙的检测试剂盒，便于目测定性和现场快速筛选测定。3)本发明面粉中过氧化钙的检测试剂盒及其检测方法，不需要其他附件仪器，易于操作，实用性强。
图I面粉中过氧化钙标准比色卡
具体实施例方式下面对本发明做进一步详细说明。实施例I :标准比色卡的制备
分析步骤精确称量不含过氧化钙增白剂的小麦面粉试样10g(精确至O. Olg于IOOmL比色管中，然后再分别称取高纯试剂过氧化I丐0mg、0. 20mg、0. 50mg、l. 00mg、2. OOmg>
5.OOmgUO. OOmg加入到比色管中，并依次加入I %稀硫酸50mL，涡旋混匀，在室温下反应IOmin0用20%和O. I %的氢氧化钠溶液调整pH值到7. 0，加入3mL酶试剂溶液，用二次水定容到IOOmL,在带水平摇床的37°C水浴锅中恒温lOmin，冷却至室温，即得系列空白基质标准溶液，分别对应每公斤面粉含过氧化I丐0mg、20mg、50mg、100mg、200mg、500mg、lOOOmg。给显色的溶液照相，采集颜色制作成标准比色卡(见图I)。实施例2 过氧化钙快速测定试剂盒试剂盒装有塑料样品勺，2个，装满一平勺面粉质量约2g ；3mL带有刻度的一次 性塑料滴管，100个；50mL具塞玻璃比色管，30个；50mL塑料量筒，I个；试管架，I个，20个孔，孔的直径适合50mL具塞玻璃比色管；标准比色卡，I个，为含有空白和淡红色至深红色6个呈梯度变化的系列色条，每条下面标注其代表的过氧化钙的含量；广泛PH试纸(1-14)，2盒；精密pH试纸(6. 4-8. 0)，2盒；反应试剂三种塑料瓶装的试剂，分别标为I %稀硫酸、20%稀氢氧化钠、0. I %氢氧化钠，每瓶装500mL。500mL塑料洗瓶，内装蒸馏水，I个。实施例3:分析步骤取某品牌饺子粉一勺于50mL比色管中，加入I %稀硫酸20mL，在室温下反应lOmin，冷却至室温后，用20%和0. I %氢氧化钠溶液调整pH值到7.0，加入21^酶试剂溶液，用二次水定容至刻度，摇匀。室温下显色5min后，观察颜色。试样为粉红色的浑浊溶液，说明该试样中含有过氧化钙。经与标准比色卡对照，试液颜色与100mg/kg的标准色条颜色接近，说明该样品中过氧化钙有检出，含量约为100mg/kg。上述实施例仅供说明本发明之用，而并非是对本发明专利的限制；应当指出的是，对于本领域的普通技术人员，在不脱离本发明构思范围的情况下，还可以作出各种变化和变型，这些都属于本发明的保护范围；因此，凡跟本发明权利要求范围所做的均等变化与修饰，均应属于本发明权利要求的覆盖范围。
权利要求
1.面粉中过氧化钙快速测定试剂盒，其特征在于，装有由塑料样品勺、塑料滴管、试管、量筒、试管架、标准比色卡、过氧化物酶显色试剂、PH试纸、反应试剂组成的盒；其中反应试剂为I %稀硫酸、20%稀氢氧化钠、O. I %氢氧化钠,标准比色卡为淡红色至深红色呈梯度变化的系列色卡。
2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，标准比色卡的粉红色为由浅至深分为6-8个档次，并对不同颜色对应标注所代表的过氧化I丐浓度为20mg/kg至1000mg/kg,如20mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg、500mg/kg、1000mg/kg。
3.面粉中过氧化钙快速测定试剂盒的应用，其特征在于，取一平勺试样，加入1%稀硫酸20mL，涡旋混合均匀，充分反应IOmin ;用氢氧化钠溶液调节pH值到7. O ;加入过氧化物酶显色试剂2mL，定容，室温下显色5-10min，将所得颜色与标准比色卡对照，确定面粉中过氧化钙的含量范围。
全文摘要
本发明的面粉中过氧化钙检测试剂盒是由塑料样品勺、塑料滴管、试管、量筒、试管架、标准比色卡、显色试剂、pH试纸、反应试剂、洗瓶组成。对试样开展测试，观察显示的颜色深浅和标准比色卡对照进行定性和半定量检测。面粉中过氧化钙检测方法将面粉中加入稀酸反应，然后用碱性溶液调节混合液pH值到中性，加入含过氧化物酶试剂的混合溶液，显色，与标准比色卡对照，得到定性和半定量结果。本发明的试剂盒和检测方法具有使用方便、显色速度快、测定条件相对宽松、灵敏度高、成本低等优点，适于现场快速筛选测定。
文档编号G01N21/78GK102944550SQ20121038883
公开日2013年2月27日 申请日期2012年10月15日 优先权日2012年10月15日
发明者宋薇 申请人:上海谱尼测试技术有限公司
专业数控铣床产品供应商
20年生产经验，实力工厂，精工品质，质量有保障
