专利名称：一种全血免疫层析装置的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及免疫检测技术领域，具体涉及一种全血免疫层析装置。
背景技术：
免疫层析是20世纪80年代初发展起来的一种快速分析技术，它往往以条状纤维层析材料为固相，通过毛细作用使样本溶液在层析条上流动，并同时使样本中的待测物与层析材料上的抗原或抗体发生高特异的免疫反应形成免疫复合物，层析过程中免疫复合物被富集或截留在含特异性捕获成份的检测带区域，通过酶反应或直接运用可目测的标记物(如胶体金)而得到直观的实验现象，如显色。而游离标记物则越过检测带，达到与结合标记物自动分离之目的。或者，样本中的待测物也可先与标记示踪物结合，再经过层析过程，到达检测带部位与捕获成份发生特异性结合而获得检测结果。这种分析技术操作简单快速，分析结果清楚，易于判断，且无须仪器(或只需简单仪器)，适合在现场进行快速检测，因而广泛应用于快速临床诊断领域。快速临床诊断检测通常采用全血作为检测样本，血清或血浆样本因制备需要静置一段时间或者需离心而使获得检测结果的时间延长，故往往不适于作为快速检测的标本。然而，由于全血样本用于免疫层析检测时容易出现红细胞过滤不完全或者溶血现象，导致红细胞以及红细胞释放的血红蛋白与分析物一起层析至检测区，使检测窗口的背景颜色增加，故而会对检测线的定性、半定量及定量检测产生干扰。基于以上问题，目前的免疫层析试剂盒常在样品垫上附着一定孔径的聚酯材料过滤血细胞，如专利CN201935921U和CN2629040Y，该法在检测时需要较大量的血液，且分离速度慢，该法也不能消除溶血产生的影响；另一种方法是在加样垫上预先滴加或吸附血液促凝剂，使红细胞凝集成团，不能通过过滤材料和小孔径膜，如专利CN1243251A和CN101614736A，但此种方法因促凝剂数量众多，不同种类的非生物活性促凝剂和生物活性促凝剂效价也不同，其稀释度的确定较为麻烦，且此法在阻止血细胞通过过滤材料时很容易发生溶血现象。
发明内容本实用新型针对现有技术的不足，提供一种可充分过滤红细胞并解决溶血干扰问题的全血免疫层析装置，其具有准确、抗干扰能力强、简便和快速等特点。本实用新型可通过以下技术方案来实现一种全血免疫层析装置，由上下扣合的壳体和置于其间的试纸条组成，所述上壳体设有加样孔和观察窗；所述下壳体设有固定试纸条的卡槽；所述试纸条包括在支撑物上相互搭接的进样区、血红蛋白吸附区、结合区、检测区和吸水区，所述血红蛋白吸附区被进样区完全覆盖，所述血红蛋白吸附区包括血红蛋白吸附垫和血红蛋白抗体包被的微球。所述进样区右端与血红蛋白吸附区右端上下对齐，保证样本沿垂直方向顺利快速通过血红蛋白吸附区。所述进样区由选自聚酯膜、玻璃纤维素膜、纤维素滤纸和无纺布中的一种或多种材料制成。在一些实施例中，所述进样区还可吸附有血液抗凝剂。[0008]所述血红蛋白抗体包被的微球填充于血红蛋白吸附垫内，所述血红蛋白抗体包被的微球选自胶体金、胶体碳、胶体硒、磁微�：途郾揭蚁┪⑶蛑械囊恢郑叛【郾揭蚁┪⑶�。所述血红蛋白抗体与微球之间的连接可通过物理吸附或化学偶联方式进行，优选化学偶联方式。所述血红蛋白吸附区还包括I 3层位于血红蛋白吸附垫底部的保护膜，所述保护膜的孔径小于所述微球的直径，保护膜的作用主要是固定微球，防止微球进入血红蛋白吸附区以外的区域。所述保护膜由选自聚酯膜、玻璃纤维素膜、纤维素滤纸和无纺布中的一种或多种材料制成。所述结合区可由玻璃纤维素膜或聚酯膜组成，其上涂覆有标记物标记的分析物抗体或抗原，所述标记物为金属胶体颗粒、荧光颗粒、磁性颗粒或有色乳胶颗粒。所述检测区可由硝酸纤维素膜、聚偏氟乙烯膜或醋酸纤维素膜构成，其近结合区一侧和近吸水区一侧分别设置有检测线和质控线，检测线和质控线彼此间隔一定距离，所述检测线包被有可与样本中的分析物反应的抗体或抗原。所述吸水区可以用纤维素、玻璃纤维、多孔聚乙烯或多孔聚丙烯等材料制成。所述上壳体上还可包含一个信息槽，所述信息槽可用于存放信息卡，信息卡上可记载患者编号、检测结果和日期等信息，检测后可将其单独取出作为患者资料保存。所述上下壳体材料由不吸水的塑料制成，包括人工合成或自然界有机材料，如聚苯乙烯、聚乙烯、聚氯乙烯、聚酯或纤维素及其衍生物等，或使用一种塑料材料或使用几种塑料材料在物理上的叠加或相加后的复合。除免疫双抗夹心法外，所述全血免疫层析装置还适用于免疫竞争抑制法对样本的检测。本实用新型的检测原理具体为将全血样本滴加于加样孔中，进样区可起过滤血液中红细胞的作用，过滤后的血液流入血红蛋白吸附区，血红蛋白吸附区可进一步过滤血液并吸附血液中可能因红细胞破裂而产生的血红蛋白，血液继续层析至结合区与包被有标记物的抗体或抗原特异性结合，最后到达检测区与相应的捕获抗体或抗原结合。通过检测区处形成的标记物-抗体-抗原-抗体或标记物-抗原-抗体-抗原复合物与样本中分析物抗原或抗体浓度成正比实现对目标分析物的定性、半定量或定量检测。本实用新型的有益效果主要体现在1、可消除全血检测发生溶血现象时对结果造成的影响，血红蛋白吸附区可吸附因红细胞破裂产生的血红蛋白，避免其展层至检测区，增加背景颜色，影响检验人员对检测条带的颜色判断以及仪器对检测条带的信号扫描。2、具有分离效果稳定，操作简单，样本用量少和检测迅速等优点。
图1为本实用新型的上壳体结构示意图；图2为本实用新型的下壳体结构示意图；图3为本实用新型的试纸条结构示意图。
具体实施方式
[0021]
以下结合附图对本实用新型作进一步详细描述:实施例1 一种胶体金全血免疫层析装置一种胶体金全血免疫层析装置，由上壳体(1)、下壳体(2 )和试纸条(3 )组成，上壳体(I)和下壳体(2)可紧密扣合，其中上壳体(1)设置有加样孔(4)、观察窗(5)和信息槽
(6)，加样孔(4)为椭圆形漏斗状，对应于试纸条(3)的进样区(7)，有向下倾斜的斜面，可防止血液的溢出；观察窗(5)对应于试纸条(3)的检测区(8);信息槽(6)镶嵌有患者信息卡，上面有患者编号、结果及日期等信息，患者信息卡可单独取出作为患者资料保存。下壳体
(2)中设置有与试纸条(3)形状大小匹配的卡槽(9)，便于固定试纸条(3)。上述上壳体(I)和下壳体(2)由防水PVC材料制成。试纸条(3)包括自左向右依次搭接粘贴在支撑物(10)上的进样区(7)、血红蛋白吸附区(11)、结合区(12)、检测区(8)和吸水区(13)。其中，支撑物(10)由PVC板构成；进样区(7)由玻璃纤维膜组成，玻璃纤维膜上吸附有血液抗凝剂；血红蛋白吸附区(11)位于进样区(7)下面，被进样区(7)完全覆盖，且其右端与进样区(7)右端对齐，所述血红蛋白吸附区(11)包括血红蛋白吸附垫、填充于吸附垫内的血红蛋白抗体包被的微球和一层位于吸附区最下层的保护膜；结合区(12)由聚酯膜组成，上面涂覆有胶体金标记的目标抗原单克隆抗体，所述结合区(12)的左侧与血红蛋白吸附区(11)的右侧搭接粘贴，两区域重叠长度为Imm;检测区(8)由硝酸纤维膜构成，检测区近结合区(12) —侧和近吸水区(13)—侧分别设有一条检测线和一条质控线，所述检测线包被有目标抗原多克隆抗体，所述质控线包被有羊抗鼠IgG多克隆抗体；吸水区(13)由纤维素滤纸组成，其左侧与检测区(8)的右侧相互搭接粘结。将待检全血样本120μ I直接加入加样孔处，血液经虹吸作用沿进样区、血红蛋白吸附区，结合区、检测区向吸水区方向移动，15分钟内读取检测结果。定性检测:阳性:Τ线和C线处各出现一条紫红色条带；阴性:仅在C线处出现一条紫红色条带；无效:无论样本中含或不含目标抗原，胶体金垫处的胶体金标记的单克隆抗体都会上行至检测区与C线处的羊抗鼠IgG多克隆抗体结合，在C线处出现一条紫红色条带，如不出现，则结果无效，需重新检测。定量检测:将免疫层析装置置于胶体金定量检测仪中，仪器通过对检测区进行扫描，收集T线、C线信号强度，最终转换、计算出样本中目标抗原的浓度，实现定量检测。实施例2 —种荧光全血免疫层析装置荧光全血免疫层析装置的结构可参考实施例1中的胶体金全血免疫层析装置，两种全血装置的主要不同之处在于胶体金全血装置的结合区涂覆有胶体金标记的单克隆抗体，而荧光全血装置的结合区所采用的标记物为荧光颗粒。将待检全血样本120 μ I直接加入加样孔处，血液经虹吸作用沿进样区、血红蛋白吸附区，结合区、检测区向吸水区方向移动，将检测卡置于荧光分析仪中，仪器通过对检测区进行扫描，收集T线、C线荧光信号强度，最终转换、计算出样本中目标抗原的浓度，实现定量检测。[0035]实施例3 —种磁珠全血免疫层析装置磁珠全血免疫层析装置的结构可参考实施例1中的胶体金全血免疫层析装置，两种全血装置的主要不同之处在于胶体金全血装置的结合区涂覆有胶体金标记的单克隆抗体，而磁珠全血装置的结合区所采用的标记物为磁性纳米颗粒。将待检全血样本120μ I直接加入加样孔处，血液经虹吸作用沿进样区、血红蛋白吸附区，结合区、检测区向吸水区方向移动，15分钟内读取检测结果。定性检测:阳性:Τ线和C线处各出现一条显色条带；阴性:仅在C线处出现一条显色条带；无效:无论样本中含或不含目标抗原，结合区处的磁珠标记的单克隆抗体都会上行至检测区与C线处的羊抗鼠IgG多克隆抗体结合，在C线处出现一条显色条带，如不出现，则结果无效，需重新检测。定量检测:将检测卡置于磁性分析仪中，仪器通过对检测区进行扫描，收集T线、C线磁信号强度，最终转换、计算出样本中目标抗原的浓度，实现定量检测。实施例4 一种乳胶全血免疫层析装置乳胶全血免疫层析装置的结构可参考实施例1中的胶体金全血免疫层析装置，两种全血装置的主要不同之处在于胶体金全血装置的结合区涂覆有胶体金标记的单克隆抗体，而磁珠全血装置的结合区所采 用的标记物为有色乳胶颗粒。将待检全血样本120 μ I直接加入加样孔处，血液经虹吸作用沿进样区、血红蛋白吸附区，结合区、检测区向吸水区方向移动，15分钟内读取检测结果。定性检测:阳性:Τ线和C线处各出现一条显色条带；阴性:仅在C线处出现一条显色条带；无效:无论样本中含或不含目标抗原，结合区处的乳胶标记的单克隆抗体都会上行至检测区与C线处的羊抗鼠IgG多克隆抗体结合，在C线处出现一条显色条带，如不出现，则结果无效，需重新检测。定量检测:将检测卡置于定量检测仪中，仪器通过对检测区进行扫描，收集T线、C线信号强度，最终转换、计算出样本中目标抗原的浓度，实现定量检测。最后应说明的是:以上所述仅为本实用新型的优选实施例而已，并不用于限制本实用新型，尽管参照前述实施例对本实用新型进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。
权利要求1.一种 全血免疫层析装置，由上下扣合的壳体和置于其间的试纸条组成，其特征在于:所述上壳体设有加样孔和观察窗；所述下壳体设有固定试纸条的卡槽；所述试纸条包括在支撑物上相互搭接的进样区、血红蛋白吸附区、结合区、检测区和吸水区，所述血红蛋白吸附区被进样区完全覆盖，所述血红蛋白吸附区包括血红蛋白吸附垫和血红蛋白抗体包被的微球。
2.根据权利要求1所述的全血免疫层析装置，其特征在于，所述进样区右端与血红蛋白吸附区右端上下对齐。
3.根据权利要求1所述的全血免疫层析装置，其特征在于，所述血红蛋白抗体包被的微球填充于血红蛋白吸附垫内。
4.根据权利要求1或3所述的全血免疫层析装置，其特征在于，所述血红蛋白抗体包被的微球选自胶体金、胶体碳、胶体硒、磁微�：途郾揭蚁┪⑶蛑械囊恢�。
5.根据权利要求1所述的全血免疫层析装置，其特征在于，所述血红蛋白吸附区还包括I 3层位于血红蛋白吸附垫底部的保护膜。
6.根据权利要求5所述的全血免疫层析装置，其特征在于，所述保护膜的孔径小于所述微球的直径。
7.根据权利要求1所述的全血免疫层析装置，其特征在于，所述结合区涂覆有标记物标记的分析物抗体或抗原，所述检测区的近结合区一侧和近吸水区一侧分别设置有检测线和质控线，所述检测线包被有可与样本中的分析物反应的抗体或抗原。
8.根据权利要求7所述的全血免疫层析装置，其特征在于，所述标记物为金属胶体颗粒、荧光颗粒、磁性颗粒或有色乳胶颗粒。
专利摘要本实用新型涉及一种全血免疫层析装置，由上下扣合的壳体和置于其间的试纸条组成，所述上壳体设有加样孔和观察窗；所述下壳体设有固定试纸条的卡槽；所述试纸条包括在支撑物上相互搭接的进样区、血红蛋白吸附区、结合区、检测区和吸水区，所述血红蛋白吸附区被进样区完全覆盖，所述血红蛋白吸附区包括血红蛋白吸附垫和填充于所述吸附垫内的血红蛋白抗体包被的微球。本实用新型可消除全血检测发生溶血现象时对结果造成的干扰，具有分离效果稳定，操作简单，样本用量少和检测速度快等优点。
文档编号G01N33/72GK202916285SQ20122059402
公开日2013年5月1日 申请日期2012年11月12日 优先权日2012年11月12日
发明者何仕钊 申请人:南京诺尔曼生物技术有限公司
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