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专利名称：一种检测他克莫司血药浓度的方法
技术领域：
本发明属于检测他克莫司领域，特别涉及一种检测他克莫司血药浓度的方法。
背景技术：
貞司(Tacrolimus) FK506, ^/ΛΙ Ιβ (Streptomyces tsukubaensis) 中分离的发酵产物，其化学结构属23元大环内酯类抗生素。为一种强效的新型免疫抑制 剂，主要通过抑制白介素-2(L-2)的释放，全面抑制T淋巴细胞的作用，较环孢素A强100 倍。近年来，作为肝、肾移植的一线用药，已在日本、美国等14个国家上市。临床实验表明， 其在心、肺、肠、骨髓等移植中应用有很好的疗效。同时Π(506在治疗特应性皮炎(AD)、系统 性红斑狼疮(SLE)、自身免疫性眼病等自身免疫性疾病中也发挥着积极的作用。但是，服用他克莫司由胃肠道吸收的变异性大，在每个病人体内的吸收率和清除 率差别较大。如果剂量不足，机体可能会排异移植器官，但如果剂量过大，血药浓度高会产 生一定的毒性，损害神经系统及肾脏等其他器官，并增加感染的机会，因此，定期测定血药 浓度以调整用药剂量非常必要，通过测定他克莫司的血药浓度并比较肝功能的变化可以了 解所服用药物剂量是否正确。肝移植术后理想的他克莫司血药浓度为术后一个月内8-15 纳克/毫升，1-3个月为8-12纳克/毫升，4-6个月为5-10纳克/毫升，7个月以后为4_8 纳克/毫升，其后维持他克莫司4-8纳克/毫升的血药浓度水平也各不相同。总之，血药浓 度只是作为一个参考指标，最终还是要由主治医生结合临床疗效和不良反应来调整药物剂 量。目前测定他克莫司血药浓度的常用方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、酶联免 疫吸附法(ELISA)和微粒子酶免疫测定法等。ELISA最为常用，其方法简便，准确性和敏感 性较高，检测底限可达0. 3纳克/毫升，但是分析速度较慢。Luminex χΜΑΡ技术，又称流式荧光技术，又称悬浮阵列、液态芯片，该技术的核心 是把直径为5. 6um的聚苯乙烯小球用荧光染色的方法进行编码，通过调节两种荧光染料的 不同配比获得最多可达100种具有不同特征荧光谱的微球，然后将每种编码微球共价交联 上针对特定检测物的抗原、抗体或核酸探针等捕获分子。应用时，先把针对不同检测物的编 码微球混合，再加入微量待检样本，在悬液中靶分子与微球表面交联的捕获分子发生特异 性结合，在一个反应孔内可以同时完成多达100种不同的检测反应。最后用LuminexTM100 进行分析，仪器通过两束激光分别识别微球的编码和检测微球上报告分子的荧光强度。

发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种检测他克莫司血药浓度的方法，该方法操 作简单，测定速度快，样品用量少，成本低，灵敏度以及线性范围比ELISA法更高更宽，具有 良好的应用前景。本发明的一种检测他克莫司血药浓度的方法，包括在磁珠表面耦联上他克莫司单克隆抗体，在样品孔中加入经抗凝稀释的血浆样品以及他克莫司生物素，经过洗脱加入荧光素标记亲合素，在激发光激发下测定荧光强度，即 得他克莫司血药浓度。所述抗凝所用抗凝剂为乙二胺四乙酸，稀释倍数为4 6倍。他克莫司生物素结构式为
权利要求
1.一种检测他克莫司血药浓度的方法，包括在磁珠表面耦联上他克莫司单克隆抗体，在样品孔中加入经抗凝稀释的血浆样品以及 他克莫司生物素，经过洗脱加入荧光素标记亲合素，在激发光激发下测定荧光强度，即得他 克莫司血药浓度。
2.根据权利要求1所述的一种检测他克莫司血药浓度的方法，其特征在于所述抗凝 所用抗凝剂为乙二胺四乙酸，稀释倍数为4 6倍。
3.根据权利要求1所述的一种检测他克莫司血药浓度的方法，其特征在于所述荧光 素为PE。
4.根据权利要求1所述的一种检测他克莫司血药浓度的方法，其特征在于所述激发 光波长为530nm。
全文摘要
本发明涉及一种检测他克莫司血药浓度的方法，包括在磁珠表面耦联上他克莫司单克隆抗体，在样品孔中加入经抗凝稀释的血浆样品以及他克莫司生物素，经过洗脱加入荧光素标记亲合素，在激发光激发下测定荧光强度，即得他克莫司血药浓度。本发明操作简单，测定速度快，样品用量少，成本低，灵敏度以及线性范围比ELISA法更高更宽，具有良好的应用前景。
文档编号G01N33/543GK102095864SQ20111004746
公开日2011年6月15日 申请日期2011年2月28日 优先权日2011年2月28日
发明者孙庆莉 申请人:上海健耕医药科技有限公司