专利名称：一种瘦肉精含量的检测方法
技术领域：
本发明涉及添加剂的分析检测技术领域，尤其涉及一种瘦肉精含量的检测方法。
背景技术：
盐酸克伦特罗，俗称瘦肉精，是一种选择性β 2肾上腺素受体激动剂，在临床上主要用于治疗支气管哮喘和痉挛。研究者在使用过程中偶然发现，较高剂量的盐酸克伦特罗能够明显促进动物的生长，使其瘦肉含量增加，脂肪含量大幅减少，因此被称为“瘦肉精”。 将瘦肉精添加于饲料中，可以增加动物的瘦肉含量、减少饲料的使用，从而使肉品提早上市、降低成本。因此，近年来瘦肉精被广泛地用作饲料添加剂，用于牲畜的喂养。瘦肉精作为动物饲料添加剂使用时，它的用量大大超过了其作为药物使用时的用量，并且作为动物饲料添加剂时的时间较长，一般持续在三周以上，导致瘦肉精在动物体内的代谢周期变长，所以极易在动物体内造成瘦肉精的蓄积(张清安，等.食品与发酵工业， 2004,30(9) :108 119.)。国内外的相关研究表明，食用含有瘦肉精的肉会出现恶心、头晕、四肢无力、手颤等中毒症状，特别是对心脏病、高血压患者的�：Ω螅怀て谑秤迷蛴锌赡艿贾氯旧寤洌辗⒍裥灾琢�。因此，在2002年，我国农业部、卫生部、国家食品药品监督管理局发布的《禁止在饲料和动物饮用水中使用的要物品中目录》明令禁止在饲料和动物饮用水中添加瘦肉精。在对食品安全越来越重视的今天，发展简便、快速和准确的瘦肉精含量的检测方法具有非常重要的意义。目前，检测瘦肉精的方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱联用法 (GC-MS)、高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)等(黄传峰，等.中国卫生检验杂志，2002， 12 (5) :634 634.)，这些方法能够实现对瘦肉精含量的检测，但是对实验条件的要求较高、实验过程繁琐、检测时间长，而且需要贵重的仪器，这些仪器的操作繁琐，价格昂贵，不适用于对瘦肉精的快速检测和上述检测方法的推广应用。为了提高对瘦肉精含量的检测的速度，简化检测的步骤，现有技术中公开了可用于瘦肉精含量检测的试纸或试剂盒，这种试纸或试剂盒以动物或人体的尿液或动物组织为检测对象，这种方法能够快速对瘦肉精进行筛选检测，然而这种方法对瘦肉精的检测灵敏度低，得到的结果准确度不高，容易出现假阴性的检测结果，尤其是对喂食过瘦肉精但出栏前停药的牲畜的检测不准确。
发明内容
本发明的目的在于提供一种瘦肉精含量的检测方法，本发明提供的检测方法对瘦肉精含量检测的结果准确，灵敏度高。本发明提供一种瘦肉精含量的检测方法，包括以下步骤a)将待测样品进行毛细管电泳分离，得到分离产物；b)将所述步骤a)得到的分离产物与三联吡啶钌反应，得到反应产物；c)检测所述步骤b)得到的反应产物，得到所述反应产物的电化学发光信号强度；d)根据预定的标准曲线与所述步骤c)得到的电化学发光信号强度，得到瘦肉精含量。优选的，所述待测样品中瘦肉精与所述步骤b)中三联吡啶钌的摩尔比为(O. 02
2.5) (5 8)。优选的，所述步骤a)中毛细管电泳分离的电压为IOkV 20kV。优选的，所述步骤c)具体为采用三电极系统检测所述步骤b)得到的反应产物；所述三电极系统为钼盘电极为工作电极、钼电极为对电极和银/氯化银为参比电极。优选的，所述步骤c)中检测的电位为I. IV I. 5V。优选的，所述步骤b)具体为在缓冲溶液中，将所述步骤a)得到的分离产物与三联吡啶钌反应，得到反应产物。优选的，所述缓冲溶液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液或磷酸盐缓冲溶液。优选的，所述缓冲溶液的pH值为6. 5 8. 5 ;所述缓冲溶液的摩尔浓度为15mmol/ L SOmmoI /I,η优选的，所述步骤d)的标准曲线按照以下方法得到配制瘦肉精标准溶液；将所述标准溶液进行毛细管电泳分离，得到分离产物；将所述分离产物与三联吡啶钌反应，得到反应产物；检测所述反应产物，得到所述反应产物的电化学发光信号强度；根据所述电化学发光信号强度及其对应的所述标准溶液的浓度，得到标准曲线。优选的，所述瘦肉精标准溶液按照以下方法制备按照乙醇与水的体积比为5 (I 10)，配制乙醇混合溶液；将瘦肉精溶于所述乙醇混合溶液中，得到瘦肉精标准溶液。本发明提供一种瘦肉精的检测方法，包括以下步骤a)将待测样品进行毛细管电泳分离，得到分离产物山)将所述步骤a)得到的分离产物与三联吡啶钌反应，得到反应产物；c)检测所述步骤b)得到的反应产物，得到所述反应产物的电化学发光信号强度；d)根据预定的标准曲线与所述步骤c)中得到的电化学发光信号强度，得到瘦肉精的含量。本发明提供的方法首先将待测样品进行毛细管电泳分离，提高了对瘦肉精检测的选择性；将得到的分离产物与三联吡啶钌反应，利用三联吡啶钌能与含有胺基的瘦肉精发生电化学发光反应、产生更强的电化学发光信号的性质，采用电化学发光法对得到的反应产物进行检测，提高了对瘦肉精检测的灵敏度，实验结果表明，本发明提供的检测方法的最低检测限为 lX10_6mOl/L。因此，本发明提供的方法对瘦肉精含量的检测具有较高的选择性和灵敏度， 得到更加准确的检测结果。另外，本发明提供的检测方法操作简单、快速，能够显著节约检测成本；本发明提供的检测方法将待测样品首先进行毛细管电泳分离，无需对样品进行复杂的前处理，更加节省了检测时间，提高了检测速度。
图I为本发明实施例I得到的三联吡啶钌(a)和三联吡啶钌与瘦肉精反应产物 (b)的电化学发光谱图；图2为本发明实施例4得到的毛细管电泳-电化学发光谱图；图3为本发明实施例5得到的毛细管电泳-电化学发光谱图；图4为本发明实施例6得到的毛细管电泳-电化学发光谱图。
具体实施例方式本发明提供一种瘦肉精的检测方法，包括以下步骤a)将待测样品进行毛细管电泳分离，得到分离产物；b)将所述步骤a)得到的分离产物与三联吡啶钌反应，得到反应产物；c)检测所述步骤b)得到的反应产物，得到所述反应产物的电化学发光信号强度；d)根据预定的标准曲线与所述步骤c)中得到的电化学发光信号强度，得到瘦肉精的含量。瘦肉精，学名为盐酸克伦特罗，结构式如式(I)所示，它是一种平喘药，研究者在实验中发现，盐酸克伦特罗具有促进动物生长、增加动物的瘦肉量、减少脂肪含量的性质， 因此其被称为“瘦肉精”。瘦肉精虽然能够促进动物的生长，但是容易在动物体内蓄积，长期食用这种含有瘦肉精残留的肉会使人体出现如恶心、头晕、四肢无力、手颤的症状，�：θ颂宓慕】担绕涫嵌孕脑嗖�、高血压患者等的危害更大。本发明采用毛细管电泳将待测样品分离，采用电化学发光的方法实现对分离产物进行测定，得到瘦肉精含量。
权利要求
1.一种瘦肉精含量的检测方法，包括以下步骤a)将待测样品进行毛细管电泳分离，得到分离产物；b)将所述步骤a)得到的分离产物与三联吡啶钌反应，得到反应产物；c)检测所述步骤b)得到的反应产物，得到所述反应产物的电化学发光信号强度；d)根据预定的标准曲线与所述步骤c)得到的电化学发光信号强度，得到瘦肉精含量。
2.根据权利要求I所述的检测方法，其特征在于，所述待测样品中瘦肉精与所述步骤b)中三联吡啶钌的摩尔比为(O. 02 2. 5) (5 8)。
3.根据权利要求I所述的检测方法，其特征在于，所述步骤a)中毛细管电泳分离的电压为IOkV 20kVo
4.根据权利要求I所述的检测方法，其特征在于，所述步骤c)具体为采用三电极系统检测所述步骤b)得到的反应产物；所述三电极系统为钼盘电极为工作电极、钼电极为对电极和银/氯化银为参比电极。
5.根据权利要求I所述的检测方法，其特征在于，所述步骤c)中检测的电位为I.IV I.5V。
6.根据权利要求I所述的检测方法，其特征在于，所述步骤b)具体为在缓冲溶液中，将所述步骤a)得到的分离产物与三联吡啶钌反应，得到反应产物。
7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述缓冲溶液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液或磷酸盐缓冲溶液。
8.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述缓冲溶液的pH值为6.5 8.5 ; 所述缓冲溶液的摩尔浓度为15mmol/L 50mmol/L。
9.根据权利要求I所述的检测方法，其特征在于，所述步骤d)的标准曲线按照以下方法得到配制瘦肉精标准溶液；将所述标准溶液进行毛细管电泳分离，得到分离产物；将所述分离产物与三联吡啶钌反应，得到反应产物；检测所述反应产物，得到所述反应产物的电化学发光信号强度；根据所述电化学发光信号强度及其对应的所述标准溶液的浓度，得到标准曲线。
10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述瘦肉精标准溶液按照以下方法制备按照乙醇与水的体积比为5 : (I 10)，配制乙醇混合溶液；将瘦肉精溶于所述乙醇混合溶液中，得到瘦肉精标准溶液。
全文摘要
本发明提供一种瘦肉精的检测方法，包括以下步骤将待测样品进行毛细管电泳分离，得到分离产物；将所述分离产物与三联吡啶钌反应，得到反应产物；检测所述反应产物，得到所述反应产物的电化学发光信号强度；根据预定的标准曲线与所述电化学发光信号强度，得到瘦肉精的含量。本发明提供的检测方法首先将待测样品进行毛细管电泳分离，将得到的分离产物与三联吡啶钌反应，利用三联吡啶钌能与含有胺基的瘦肉精发生电化学发光反应、产生更强的电化学发光信号的性质，采用电化学发光法对得到的反应产物进行检测，得到的电化学发光的信号强度与瘦肉精的浓度成正比，从而得到瘦肉精的含量。本发明提供的检测方法选择性好，灵敏度高，结果准确。
文档编号G01N21/76GK102590191SQ20121002887
公开日2012年7月18日 申请日期2012年2月9日 优先权日2012年2月9日
发明者包懿, 杨帆, 杨秀荣, 路丽霞 申请人:中国科学院长春应用化学研究所
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