专利名称：一种细菌明胶液化反应显色鉴定法的制作方法
技术领域：
本发明涉及到细菌鉴定相关生化反应试验方法的领域。
背景技术：
在细菌鉴定中，生化反应是鉴定细菌很重要的方法。明胶液化试验是细菌鉴定生化反应中常用的一种试验，在细菌鉴定中价值很高，特别是在鉴定非发酵菌类时其鉴别意义更高。传统的细菌鉴定明胶液化试验方法是将细菌接种在明胶培养基中，经37°C孵育 24小时左右，观察细菌是否分解明胶。采用这种观察方法需先将明胶培养基放在4°C冰箱中1小时左右，然后取出培养基，并上下摇动观察，如果培养基仍成液体流动状，则明胶液化试验阳性，如成凝固状态则为阴性反应。这种观察方法较为繁琐，给用细菌鉴定组合板和仪器读取结果带来不便。
发明内容
本发明将提供一种新的供细菌鉴定用的明胶生化试验培养基配方，其原理是利用蛋白染色剂对明胶大分子蛋白和细菌分解明胶小分子产物染色所产生的颜色不同而建立的一种方法；配方中主要是添加了氨基黑IOB试剂，氨基黑IOB是一种蛋白染色剂，当细菌分解明胶蛋白后，明胶则由大分子蛋白变成了许多小分子产物；由于蛋白染色剂对明胶蛋白大分子及其分解的小分子产物染色所产生的颜色不同；因此，可通过培养基颜色变化来判断明胶是否被细菌分解液化。该方法可方便地将明胶液化试验选入细菌生化反应编码鉴定组合板中，增加编码组合鉴定细菌能力；给半自动、自动读取细菌明胶液化反应结果提供方便。
具体实施例方式明胶液化试验显色法配方成份牛肉膏 0. 15g蛋白胨 0.25gH2O 50ml加热溶解后取5ml基础液加入0. 5g明胶(10% )调PH7. 6,5ml ^ 0. 2ml IMNaOH115°C灭菌15分钟，5ml加明胶管迅速加入0. 5ml 0. 2%氨基黑IOB (过滤除菌)， 剩余45ml基础液置冰箱保存。注(1)明胶不能反复加热溶解，故每次取少量基础液加10%明胶试验方法培养基可根据反应微孔板的孔径大小选择适当量，细菌接种可选菌液与培养基等量混合法，也可用直接将细菌接种于培养基中；细菌接种后置37°c孵育12至24小时观察结果，培养基变紫色为明胶液化试验阳性，不变色为阴性。
权利要求
1.一种细菌明胶液化反应显色鉴定方法，其特征是利用细菌分解(液化)明胶蛋白分子后，由于新方法在鉴定培养基中所添加的染色剂对大分子明胶蛋白及明胶降解后小分子成分染色不同，因此通过培养基颜色的变化即可指示明胶是否被细菌分解液化。
2.根据权利要求1所述的一种新的细菌明胶液化反应鉴定方法，其特征是该细菌明胶液化反应显色鉴定方法是基于一种新的明胶培养基配方。该配方添加了氨基黑IOB试剂。
3.根据权利要求1所述的一种新的细菌明胶液化反应鉴定方法，其特征是可以在细菌明胶液化反应鉴定培养基中加入类似的能对明胶大分子及明胶降解后形成的小分子具有不同显色功能的染料指示明胶是否被液化。
全文摘要
一种细菌明胶液化反应显色鉴定法提供一种供细菌鉴定用的明胶液化反应试验培养基配方，观察结果是通过细菌分解明胶而使培养基显色的一种方法，该方法可将明胶液化试验选入细菌生化反应编码鉴定组合板中，增加编码组合鉴定细菌的能力，从而给半自动、自动读取细菌明胶液化反应结果提供方便。
文档编号G01N21/78GK102243180SQ20101017145
公开日2011年11月16日 申请日期2010年5月13日 优先权日2010年5月13日
发明者曹宁, 王礼文, 詹小勇 申请人:南京神州英诺华医疗科技有限公司
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