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专利名称：肾脏病诊断用标志物及其利用的制作方法
肾脏病诊断用标志物及其利用
技术领域：
本发明涉及肾脏病诊断用标志物及使用该标志物的肾脏病的诊断用的计算机程序。
背景技术：
肾脏病是指起因于肾脏的各组织中的病变而发生的疾病。肾脏病主要有1)担负血液过滤的肾小球的病变所致的肾小球肾炎、2)担负从原尿的水分一电解质等的再吸收的肾曲小管的病变所致的肾曲小管一间质性肾炎、3)肾血管病变所致的细动脉硬化症等。如果肾脏病发展而导致肾功能衰竭，则即便开始治疗，肾功能的恢复及维持也困难，所以透析治疗变得必要。近年、需要进行透析治疗的患者数增加，伴随其的医疗费的增 加成为问题。从而，通过正确的诊断早期发现肾脏病的患者是重要的。现在,在肾脏病的诊断中，通过测定肾小球过滤值(glomerularfiltration rate GFR)来进行肾功能的评价。另外，作为肾脏病的诊断标志物，也使用尿中微量白蛋白、IV型胶原、转铁蛋白、IgG、层粘连蛋白、纤连蛋白、α -I微球蛋白、β -2微球蛋白、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、N_乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、L型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)、胍基乙内酰胺及其衍生物等(参照专利文献I及2)。但是，为了以更高精度诊断肾脏�。鯣FR的测定或上述的诊断标志物还不充分。因此，期望再开发对于肾脏病的诊断有用的新颖标志物。现有技术文献专利文献专利文献I:特开平2-288867号公报专利文献2:特开2001-174459号公报

发明内容发明要解决的技术课题本发明旨在提供新颖的肾脏病诊断用标志物。另外，本发明旨在提供使用该肾脏病诊断用标志物的肾脏病的诊断用的计算机程序。解决课题的技术方案本发明人对于从健康者及肾脏病患者得到的待测样品进行由毛细管电泳-质谱分析法(CE-MS法)的解析的结果，发现新的肾脏病诊断用标志物，从而完成本发明。即，根据本发明，提供肾脏病的诊断用标志物，其为选自下列的至少一种二醇酸；N5-[( 二甲基氨基)亚胺基甲基]-鸟氨酸；5-氧代-2-四氢呋喃羧酸；
含选自下列之任一种的组合三甲基甘氨酸、二醇酸、N5_[( 二甲基氨基)亚胺基甲基]-鸟氨酸、胍基醋酸、4-胍基酪酸、N6-乙酰赖氨酸、N1-乙酰组氨酸及组氨酸；含选自下列之任一种的组合二醇酸、N5-[( 二甲基氨基)亚胺基甲基]-鸟氨酸、胞苷、缬氨酸、犬尿酸、2-氧代戊二酸、胍基乙内酰胺及胆碱；含选自下列之任一种的组合胱氨酸、N1-乙酰组氨酸、组氨酸、甘氨酸、色氨酸及甲硫氨酸；及含色氨酸和鸟氨酸的组合。另外，根据本发明，提供计算机程序，其用于在计算机中实行取得从疑似患肾脏病的受试者采集的尿及/或血浆中含的、上述的诊断用标志物的浓度的取得步骤；
基于取得的浓度，判断受试者是否患肾脏病的判断步骤；及输出判断结果的输出步骤。发明效果根据本发明，可提供对于精度更高的诊断有用的肾脏病的诊断用标志物。如果使用本发明的肾脏病的诊断用标志物，不仅可诊断受试者是否患肾脏�。部山懈檬苁哉呓邮苌鲈嗖〉闹瘟剖保渲⒆吹母纳频某潭然蛑瘟频挠行缘鹊钠兰�。再者，根据本发明，可提供使用上述的肾脏病诊断用标志物的肾脏病的诊断用的计算机程序。

图I是示在肾脏病的各病态中本发明的肾脏病的诊断用标志物的浓度或浓度的比的变动图的图。(a)及(C)示，从健康到显性肾症期，浓度等的增加或减少继续的情况，(b)及(d)示，从健康到早期肾症期，浓度等的增加或减少继续，但从早期肾症期到显性肾症期，无变化的情况。图2是示将物质组用毛细管电泳(CE)分离之时的图之一例的图。图3是示对用CE分离的物质进行质谱分析(MS)测定之时的图之一例的图。图4是示对鉴定对象的物质和标准物质进行MS/MS测定之时的图之一例的图。图5是示在健康者及各患者组中的尿中的二醇酸的定量值的图。图6是示在健康者及各患者组中的尿中的5-氧代-2-四氢呋喃羧酸的定量值的图。图7是示在健康者及各患者组中的N5-[(二甲基氨基)亚胺基甲基]-鸟氨酸(以下，也称之为“ADMA”)的定量值的图，Ca)示尿中的定量值、(b)示血浆中的定量值、(c)示尿中的定量值和血浆中的定量值的比率。图8是示在健康者及各患者组中的尿中的三甲基甘氨酸(以下，也称之为“TMG”)和尿中的胍基醋酸的比率的图。图9是示在健康者及各患者组中的尿中的TMG和尿中的二醇酸的比率的图。图10是示在健康者及各患者组中的尿中的TMG和尿中的ADMA的比率的图。图11是示在健康者及各患者组中的尿中的TMG和尿中的4-胍基酪酸的比率的图。
图12是示在健康者及各患者组中的尿中的TMG和尿中的N6-乙酰赖氨酸的比率的图。图13是示在健康者及各患者组中的尿中的TMG和尿中的N1-乙酰组氨酸的比率的图。图14是示在健康者及各患者组中的尿中的TMG和尿中的组氨酸的比率的图。图15是示在健康者及各患者组中的血浆中的胆碱和尿中的二醇酸的比率的图。图16是示在健康者及各患者组中的尿中的缬氨酸和尿中的二醇酸的比率的图。
图17是示在健康者及各患者组中的血浆中的犬尿酸和尿中的二醇酸的比率的图。图18是示在健康者及各患者组中的尿中的胍基乙内酰胺和尿中的二醇酸的比率的图。图19是示在健康者及各患者组中的血浆中的ADMA和尿中的二醇酸的比率的图。图20是示在健康者及各患者组中的血浆中的2-氧代戊二酸和尿中的二醇酸的比率的图。图21是示在健康者及各患者组中的尿中的胞苷和尿中的二醇酸的比率的图。图22是示在健康者及各患者组中的尿中的胱氨酸和尿中的组氨酸的比率的图。图23是示在健康者及各患者组中的尿中的胱氨酸和尿中的甘氨酸的比率的图。图24是示在健康者及各患者组中的尿中的胱氨酸和尿中的N1-乙酰组氨酸的比率的图。图25是示在健康者及各患者组中的尿中的胱氨酸和尿中的色氨酸的比率的图。图26是示在健康者及各患者组中的尿中的胱氨酸和尿中的甲硫氨酸的比率的图。图27是示在健康者及各患者组中的血浆中的鸟氨酸和血浆中的色氨酸的比率的图。图28是用于实行肾脏病的诊断的计算机系统的框图。图29是在计算机中实施实施方式I的肾脏病的诊断方法时，由CPU实行的流程图。图30是在计算机中实施实施方式2的肾脏病的诊断方法时，由CPU实行的流程图。图31是在计算机中实施实施方式3的肾脏病的诊断方法时，由CPU实行的流程图。实施方式以下的化I 5示作为本发明的肾脏病的诊断用标志物使用的物质的名称及它们的结构式。本发明的肾脏病的诊断用标志物包括化I 5所示的I种物质或2种物质的组
八
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2-氧代戌二酸N6-乙酰赖氨睡化3
权利要求
1.肾脏病的诊断用标志物，其为选自下列的至少一种 二醇酸； N5-[( 二甲基氨基)亚胺基甲基]-鸟氨酸； 5-氧代-2-四氢呋喃羧酸； 含选自下列之任一种的组合三甲基甘氨酸、二醇酸、N5-[( 二甲基氨基)亚胺基甲基]-鸟氨酸、胍基醋酸、4-胍基酪酸、N6-乙酰赖氨酸、N1-乙酰组氨酸及组氨酸； 含选自下列之任一种的组合二醇酸、N5-[(二甲基氨基)亚胺基甲基]-鸟氨酸、胞苷、缬氨酸、犬尿酸、2-氧代戊二酸、胍基乙内酰胺及胆碱； 含选自下列之任一种的组合胱氨酸、N1-乙酰组氨酸、组氨酸、甘氨酸、色氨酸及甲硫氨酸；及 含色氨酸和鸟氨酸的组合。
2.权利要求I所述的诊断用标志物，其中肾脏病是糖尿病性肾症。
3.计算机程序，其用于在计算机中实行 取得从疑似患肾脏病的受试者采集的尿及/或血浆中含的、权利要求I所述的肾脏病的诊断用标志物的浓度的步骤； 基于取得的浓度，判断上述受试者是否患肾脏病的步骤；及 输出判断结果的步骤。
4.权利要求3所述的计算机程序，其在计算机中再实行比较由取得步骤取得的标志物的浓度的值和阈值的步骤， 取得步骤是取得从疑似患肾脏病的受试者采集的尿或血浆中含的、选自下列的至少I种标志物的浓度的值的步骤二醇酸、N5-[( 二甲基氨基)亚胺基甲基]-鸟氨酸及5-氧代-2-四氢呋喃羧酸， 判断步骤是基于由比较步骤得到的比较结果，判断受试者是否患肾脏病的步骤。
5.权利要求3所述的计算机程序，其在计算机中再实行 从由取得步骤取得的尿中及血浆中的标志物的浓度的值，算出关于上述标志物的尿中的浓度和血浆中的浓度的比的值的步骤；及 将算出的关于上述标志物的尿中的浓度和血浆中的浓度的比的值和阈值进行比较的步骤； 其中， 取得步骤是取得从疑似患肾脏病的受试者采集的尿及血浆中含的、选自下列的至少I种物质的浓度的值的步骤二醇酸、N5-[( 二甲基氨基)亚胺基甲基]-鸟氨酸及5-氧代-2-四氢呋喃羧酸， 判断步骤是基于由比较步骤得到的比较结果，判断受试者是否患肾脏病的步骤。
6.权利要求3所述的计算机程序，其在计算机中再实行 从包含由取得步骤取得的尿中及/或血浆中的2种物质的组合的肾脏病的诊断用标志物之一方的物质的浓度和另一方的物质的浓度，算出关于2种物质的浓度的比的值的算出步骤；及 将算出的关于2种物质的浓度的比的值和阈值进行比较的比较步骤； 其中，取得步骤是取得从疑似患肾脏病的受试者采集的尿及血浆中含的、选自包含2种物质的组合的肾脏病的诊断用标志物的至少I种标志物的物质的浓度的值的步骤， 判断步骤是基于由比较步骤得到的比较结果，判断受试者是否患肾脏病的步骤。
7.权利要求6所述的计算机程序，其中肾脏病的诊断用标志物是三甲基甘氨酸，和N5_[ ( 二甲基氨基)亚胺基甲基]-鸟氨酸或胍基醋酸的组合。
全文摘要
本发明涉及新颖的肾脏病诊断用标志物及其利用。
文档编号G01N33/48GK102859357SQ20118002075
公开日2013年1月2日 申请日期2011年4月26日 优先权日2010年4月27日
发明者佐藤基, 大桥由明, 佐佐木一谨, 须藤浩三, 大友泰裕 申请人:希森美康株式会社, 福满代谢组技术有限公司