专利名称：微免疫检测仪的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种微免疫检测仪。
背景技术：
通过调查得知目前国内外免疫检测的主要方法有
(I)酶联免疫吸附试验(ELISA)，该方法相对廉价，可避免接触同位素，酶标抗体相对稳定，保存时间长，但酶标板ELISA操作步骤多，试剂用量大，花费时间长，增加了检测结果的误差。(2)放射性过敏原吸附试验(RAST)，该方法使用的放射性同位素价格昂贵，半衰期
短，易污染环境，操作和处理均需要专门设备，且检测花费时间较长。(3)CAP检测法，该方法具有较高的敏感性和特异性，但该方法试剂价格昂贵，使其应用受到了很大限制。中国专利申请号032009143公开了一种检测目标微生物和靶分子的检测设备。它可以对检测样品直接进行检测，无需培养富集，具有检测快速。但是其管路结构复杂，操作繁琐。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种结构简单、操作方便的微免疫检测仪。为了解决上述技术问题，本发明包括注射泵、缓冲液容器、进样盘、芯片和三个三向阀，芯片包括基体和固相载体，基体上设有进样孔和出样孔，基体内设有连通进样孔和出样孔的微流道，微流道中设有微坝，基体上设有检测口，检测口与微坝下游的微流道相连通，固相载体为可从进样孔注入微坝上游的微流道内的高分子微球，微坝顶面与微流道顶面之间有高度小于微球直径的间隙，三向阀I的三个口分别连接缓冲液容器、注射泵和三向阀II的一个口，三向阀II另外两个口分别连接进样针和三向阀III的一个口，三向阀III的另两个口其一连接芯片出样口，其二为废液出口。为了便于操作，所述三组三向阀均为两位三通换向阀，三向阀I连接注射泵的口为进口，三向阀II连接三向阀I的口为进口，三向阀III连接芯片的口为进口。为了能够检测不同的样品，所述芯片的基体上设有另外一个进样孔，该进样孔与微坝上游的微流道相通，该进样孔连接有微球出口阀。不同的样品采用不同的微球，每次检测后都要更换微球。为了便于加工，所述的芯片的基体包括两块相键合的玻璃，微流道是蚀刻在两块玻璃相贴合的表面上的槽，所有的进样口、出样孔和检测口设置在同一块玻璃上，这是基于玻璃具有良好的机械加工和优越的光透过性能，且处理后具有很好的生物相容性。为了便于排放废液，所述的三向阀III的废液出口连接有排放管。为了提高检测速度和检测的准确性，所述芯片上的检测口连接有信号检测装置。为了实现高效的数据处理和分析，本发明还包括有控制系统，控制系统用于处理信号检测装置的检测信号和控制所有三向阀和注射泵。本发明的有益效果是本发明主要采用三组三向阀、芯片、注射泵、进样盘等，通过三向阀将芯片、注射泵、进样盘连接成一个系统，即可实现各种试剂向芯片中进样、试剂在芯片中反应并通过检测口检测、以及检测前后的冲洗，本发明结构简单，操作方便，并有芯片的特别结构，使得芯片在实现试剂反应及检测功能的前提下能做得比较�。阌谛�。采用微球作载体，增大固相载体的比表面积，并且反应区域与检测区域通过微坝分离，更有利于提高检测的准确性。
图I是本发明的流程 图2是图I中件9的立体结构示意 图3是件9中微流道的结构示意 图中1、注射泵，2、缓冲液容器，3、三向阀I，4、三向阀11，5、三向阀111，6、进样针，7、进样盘，8、排放管，9、芯片，10、微球出口阀，9-1、出样口，9-2、进样口 I，9_3、信号检测装置，9-4、进样口 II，9-5、基体，9-6、微坝，9_7、微球，9_8、微流道，9_9、检测口。
具体实施例方式如图I所示的一种具体实施例，它包括注射泵I、缓冲液容器2、进样盘7、芯片9、三向阀I 3、三向阀II 4和三向阀III 5。如图2和图3所示，芯片9包括基体，基体最好采用玻璃材质的基体9-5，基体9-5上设有出样口 9-1、进样口 I 9-2、检测口 9-9和进样口 II 9-4，基体9-5内设有连通出样口9-1、进样口 I 9-2、检测口 9-9和进样口 II 9-4的微流道9-8，微流道9-8中设置有微坝9-6，微坝9-6用于拦截从进样口 I 9-2进入的微球9-7，进样口 I 9-2和进样口 II 9-4位于位于微坝9-6的同一侧，检测口位于微坝9-6的另一侧，微坝9-6顶面与微流道9-8顶面之间有高度小于微球9-7的直径的间隙，因此，微球不能从微坝9-6的一侧流向另一侧，而液体可以从微坝9-6通过。三向阀均具有三个口，三个口相互连通，阀体内设置有控制三个口连通状态的阀芯，可以是两位三通换向阀，也可是在阀芯的作用下可以控制任意两个管口连通而不与另外一个管口连通的阀门。为了描述方便，我们把三向阀的三个口分别命名为U、L、R。三向阀包括现有技术中任何具备前述功能的阀。当三向阀是两位三通换向阀时，U 口表示进口，L、R 口表示出口。三向阀I 3的R 口连接缓冲液容器2，三向阀I 3的U 口连接注射泵I、三向阀I 3的L 口连接三向阀II 4的U 口，三向阀II 4的R 口连接有进样针6，三向阀II 4的L 口连接三向阀III5的L 口，三向阀III 5的U 口连接芯片9的出样口 9-1。三向阀III 5的R 口连接有排放管8。芯片9的进样口 II 9-4连接有微球出口阀10。芯片9的进样口 I 9_2用于进样针6添加各种试剂。本微免疫检测仪还可以配备信号检测装置9-3和控制系统，信号检测装置9-3与芯片9的检测口 9-9连接，信号检测装置9-3采用现有的信号检测装置，用于检测反应后的底物溶液。信号检测装置9-3如何检测底物溶液是本领域公知技术。控制系统用于处理信号检测装置的检测信号和控制所有三向阀和注射泵。为了提高检测的准确性，最好采用高灵敏的信号检测装置。以双抗体夹心法检测为例，微免疫检测仪的工作原理
进样盘7中放置有各种待用试剂。以下(I) - (10)为比例标准样品的检测操作
(1)控制三向阀I3的L 口关闭、U 口和R 口连通，注射泵I从缓冲液容器2吸入缓冲
液；
(2)控制三向阀I3的R 口关闭、U 口和L 口连通，三向阀II 4和三向阀III 5均为R 口
关闭、U 口和L 口连通，微球出口阀10关闭，进样针6离开进样口 I 9-2，使进样口 I 9-2打开，注射泵I注射载体溶液，载体溶液依次通过三向阀I 3、三向阀II 4、三向阀III 5、芯片9并从进样口 I 9-2排出，冲洗芯片9和流路；
(3)控制三向阀I3的R 口关闭、L 口和U 口连通；三向阀II 4的L 口关闭、R 口和U 口连通；将进样针6与进样盘7上高分子微球悬浊液连接，高分子微球悬浊液是指包被了保持免疫学活性的抗体的微球，注射泵I吸入高分子微球悬浊液；
(4)控制三向阀I3的R 口关闭、L 口和U 口连通；三向阀II 4的L 口关闭、R 口和U 口连通；将进样针6连接到芯片9上的进样口 I 9-2，进样针6可通过特氟龙连接器连接到进样口 I 9-2，通过注射泵I向芯片9里注入定量的高分子微球悬浊液；微球9-7推送到微坝的上游。(5)依照步聚(3)和(4)向微球9-7所在位置推送比例标准样品(已知抗原)。(6)依照步聚(3)和(4)向微球9-7所在位置推送标记抗体。(7)依照步聚(3)和(4)向微球9-7所在位置推送底物溶液，并停流显色。(8)控制三向阀I 3的L 口关闭、U 口和R 口连通，注射泵I从缓冲液容器2吸入缓冲液；
(9)控制三向阀I 3的R 口关闭、L 口和U 口连通；三向阀II 4和三向阀III 5均为L 口关闭、R 口和U 口连通；推动注射泵1，注射泵I内缓冲溶液通过进样针6、进样口 I 9-2进入微流道9-8，缓冲溶液推动微球反应区的有色液体通过微坝9-6流过检测口，信号检测装置9-3进行检测；检测后的废液通过出样口 9-1、三向阀III 5、排放管8排出。(10)控制三向阀I 3的L 口关闭、U 口和R 口连通，注射泵I从缓冲液容器2吸入缓冲液。(11)三向阀I 3的R 口关闭、L 口和U 口连通；三向阀II 4和三向阀III 5均为R口关闭、U 口和L 口连通，微球出口阀10打开，注射泵I开始用缓冲液冲出反应完毕的微球
9-7，完成下一次检测准备。比例标准样品的检测操作完成后，依照步聚(I) - ( 10)检测实际样品中的未知抗原。只将步骤(5)比例标准样品替换成实际样品即可。通过比例标准样品的检测，作出标准曲线，对实际样品中的未知抗原进行比对，并
进行定量。
权利要求
1.一种微免疫检测仪，其特征在于包括注射泵、缓冲液容器、进样盘、芯片和三组三向阀，芯片包括基体和固相载体，基体上设有进样孔和出样孔，基体内设有连通进样孔和出样孔的微流道，微流道中设有微坝，基体上设有检测口，检测口与微坝下游的微流道相连通，固相载体为可从进样孔注入微坝上游的微流道内的高分子微球，微坝顶面与微流道顶面之间有高度小于微球直径的间隙，三向阀I的三个口分别连接缓冲液容器、注射泵和三向阀II的一个口，三向阀II另外两个口分别连接进样针和三向阀III的一个口，三向阀III的另一个口连接芯片出样口。
2.根据权利要求I所述的微免疫检测仪，其特征在于所述三组三向阀均为两位三通换向阀，三向阀I连接注射泵的口为进口，三向阀II连接三向阀I的口为进口，三向阀III连接芯片的口为进口。
3.根据权利要求I所述的微免疫检测仪，其特征在于所述芯片的基本上设有另外一个进样孔，该进样孔与微坝上游的微流道相通，该进样孔连接有微球出口阀。
4.根据权利要求1、2或3所述的微免疫检测仪，其特征在于所述的芯片的基体包括两块相键合的玻璃，微流道是蚀刻在两块玻璃相贴合的表面上的槽，所有的进样口、出样孔和检测口设置在同一块玻璃上。
5.根据权利要求4所述的微免疫检测仪，其特征在于所述的三向阀III的废液出口连接有排放管。
6.根据权利标1、2或3所述的微免疫检测仪，其特征在于所述芯片上的检测口连接有信号检测装置。
7.根据权利标6所述的微免疫检测仪，其特征在于还包括有控制系统，控制系统用于处理信号检测装置的检测信号和控制所有三向阀和注射泵。
全文摘要
本发明公开了一种微免疫检测仪，本发明芯片包括基体和固相载体，基体上设有进样孔和出样孔，基体内设有连通进样孔和出样孔的微流道，微流道中设有微坝，基体上设有检测口，检测口与微坝下游的微流道相连通，固相载体为可从进样孔注入微坝上游的微流道内的高分子微球，微坝顶面与微流道顶面之间有高度小于微球直径的间隙，三向阀Ⅰ的三个口分别连接缓冲液容器、注射泵和三向阀Ⅱ的一个口，三向阀Ⅱ另外两个口分别连接进样针和三向阀Ⅲ的一个口，三向阀Ⅲ的另两个口其一连接芯片出样口。本发明可实现各种试剂向芯片中进样、试剂在芯片中反应并通过检测口检测、以及检测前后的冲洗，本发明结构简单，操作方便。
文档编号G01N33/53GK102841196SQ20121033383
公开日2012年12月26日 申请日期2012年9月11日 优先权日2012年9月11日
发明者董益阳 申请人:济南格致生物技术有限公司
专业数控铣床产品供应商
20年生产经验，实力工厂，精工品质，质量有保障
