亚星游戏官网-www.yaxin868.com

专利名称：壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器的制备及应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器的制备及应用。具体是基于纳米多孔金膜和[email protected]@Pt壳核纳米材料，构建的检测多种肿瘤标志物的夹心型电化学免疫传感器的制备方法及应用，用于检测血清中的肿瘤标志物。属于新型纳米功能材料与生物传感技术领域。
背景技术：
肿瘤标志物在癌症的早期诊断中具有重要的实用价值。肿瘤标志物是ー种在肿瘤细胞的发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身所产生、或者由机体对肿瘤细胞的反应而产生的，反应肿瘤存在和生长的ー类物质。包括蛋白质、激素、酶、多胺及癌基因产物等。肿瘤标志物在临床中应用广泛，在正常人群中的癌症筛查、有症状者的癌症辅助 诊断、癌症的临床阶段的分期、癌症疾病进程的预后评估治疗方案、判断癌症是否复发中起着极其重要的作用。目前已有的肿瘤标志物的临床检测方法很多，有放射免疫測定法，酶联免疫测定法，化学发光免疫測定法等。但这些检测方法存在如下不足。(I)放射免疫測定法放射免疫分析自问世以来，在生物医学各个领域已经得到广泛的应用。其具有操作简便、成本低等优点。但该法放射性污染严重，且灵敏度低，检测限高，因此限制了它的应用。(2)酶免疫分析測定法酶免疫分析法因标记物制备简单，有效期长，对环境无污染等特点，得到了迅速的普及和发展。但酶免疫分析測定法中的酶容易失活，导致其信号时间短，降低了方法的灵敏度和重现性。(3)化学发光免疫分析測定法这ー方法具有灵敏、快速、稳定、选择性强、重现性好、易于操作，方法灵活多样的优点。但是影响化学发光分析的检测结果的因素较多，因此其稳定性较差，而且在发生化学反应之后，样品的发光无法再现。由以上分析可以看出，发明ー种检测限低、灵敏度高、特异性强、重现性好的肿瘤标志物传感器迫在眉睫。纳米材料修饰的电化学免疫传感器由于其简单易行、成本低廉、特异性强、灵敏快速的优点，近几年备受人们关注，研究了一系列基于纳米材料构建的电化学免疫传感器參见(a) Lai G. S. ; Yan F. ; Wu J. ; Leng C. ; Ju H. X. Anal. Chem. , 2011，83，2726-2732. (b) Du D. ; Wang L. M. ; Shao Y. Y. ; Wang J. ; Engelhard M. H. ; Lin Y. H.Anal. Chem. , 2011, 83, 746-752.。本发明将壳核纳米材料用于电化学免疫传感器的构建中，赋予电化学免疫传感器更为突出的特色。首先采用纳米多孔金膜固定一杭，由于纳米多孔金膜具有三维连续开孔结构和大的比表面积，有利于固定更多的一杭，而且纳米多孔金膜良好的生物相容性，可以与ー抗直接结合，避免了交联剂的使用；然后采用[email protected]@Pt壳核纳米材料标记ニ抗，AuiPdiPt既保留了 Au、Pd、Pt三种贵金属纳米材料的优势，又体现出优异的协同增敏效果，从而提高了其电极表面的电子传递效率，降低了检测限、増加了传感器的检测灵敏度。在无酶情况下，直接采用[email protected]@Pt壳核纳米材料作为ニ抗标记物，简化了操作步骤，增强了传感器的稳定性，制备了ー种适用于检测多种肿瘤标志物的夹心型电化学免疫传感器。经对现有肿瘤标志物检测专利技术的检索发现，目前CN200910212772. 0公开了ー种用于检测甲胎蛋白的电化学发光免疫传感器，该传感器的检测限达到0. 035 ng.mr1,线性范围为0.01 20 ng.mじ1。CN201110199112.0公开了ー种检测磷化蛋白的电化学免疫传感器，其检测限为0. 01 ng mじ1,线性范围为0. 02 20 ng mLベ。CN03113053. 4公开了ー种检测CA-125无试剂安培免疫传感器。

本发明分别采用纳米多孔金膜和[email protected]@Pt壳核纳米材料作为电极修饰和ニ抗标记材料，降低了传感器的检出限，对多种肿瘤标记物的检出限在0.91 I. 5 pg*mじ1之间。由此可以看出，其方法的灵敏度得到显著提高，灵敏度均优于以上三种方法，可以准确定量检测多种肿瘤标志物。本发明利用免疫反应的高特异性，结合纳米多孔金膜和[email protected]@Pt壳核纳米材料制备了ー种夹心型电化学免疫传感器并用来检测多种肿瘤标志物。本发明具有灵敏度高、特异性好、检测成本低、能快速检测多种肿瘤标志物等优势，且本发明制备过程简单，操作过程简便，有效克服了目前肿瘤标志物检测方法的不足。

发明内容
本发明的目的之ー在于避免传统检测方法的仪器设备复杂、操作过程繁琐、检测人员要求高等缺点，提供了一种灵敏度高、特异性强、重现性好、操作简便的快速检测多种肿瘤标记物的电化学免疫传感器的制备方法。本发明的目的之ニ是将该肿瘤标志物电化学免疫传感器应用于多种肿瘤标志物的检测。 为了实现上述目的，本发明是通过以下措施来实现的。I.壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器的制备及应用，其特征在干，包括以下步骤
(1)纳米多孔金膜的制备；
(2)[email protected]@Pt壳核纳米材料一肿瘤标记物ニ抗复合物的制备；
(3)电化学免疫传感器的构建。(I)中所述的纳米多孔金膜的制备，具体包括以下步骤
1)将银金合金薄膜漂浮在14 16mol じ1硝酸液面上0.5 5 min，将银腐蚀掉，制成纳米多孔金膜；
2)将纳米多孔金膜用超纯水洗涤至其pH=7.O。(2)中所述的[email protected]@Pt壳核纳米材料一肿瘤标记物ニ抗复合物的制备，具体包括以下步骤
I)将[email protected]@Pt壳核纳米材料和肿瘤标记物ニ抗混合加入到pH = 7. 4的磷酸盐缓冲溶液中，使[email protected]@Pt壳核纳米材料与肿瘤标记物ニ抗的质量浓度比例为500 1000:1，配制成混合液A ；
2)将上述混合液A室温下震荡孵化12 24 h, 10000^12000 rpm下离心，用pH = 7.4磷酸盐缓冲溶液清洗，然后重新分散于pH = 7. 4的磷酸盐缓冲溶液中，配制成混合液B并储存在4 °(下备用。(3)中所述的电化学免疫传感器的构建，具体包括以下步骤
1)将直径4mm的玻碳电极依次用I. 0,0. 3和O. 05 mm的三氧化二铝抛光粉抛光处理，乙醇超声清洗，再用超纯水冲洗干净，然后将电极置于5 mmol · Γ1铁氰化钾溶液中，在一O. 2 O. 6 V电位下扫描，使峰电位差小于110 mV ；
2)将纳米多孔金膜修饰于玻碳电极表面，室温干燥；
3)将肿瘤标志物一抗滴涂到步骤2)纳米多孔金膜修饰的电极表面，置于4°C湿润条件下晾干；
4)将浓度为100μ g · ι Γ1牛血清白蛋白滴涂到步骤3)肿瘤标志物一抗修饰的电极表面，4°C下湿润条件下晾干；
5)将肿瘤标志物抗原滴涂在步骤4)牛血清白蛋白修饰的电极表面，4°C下湿润条件下晾干；
6)将溶液B滴涂在步骤5)肿瘤标志物抗原修饰的电极表面，4°C下湿润条件下晾干，电化学免疫传感器制备完成。2.本发明所述的制备的壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器，其特征在于，用于肿瘤标志物的检测，步骤如下
(1)工作曲线的绘制；
(2)肿瘤标志物的检测。(I)中所述的工作曲线的绘制，步骤如下
1)将参比电极一饱和甘汞电极、对电极一钼丝电极和工作电极正确连接在电化学工作站上；
2)在pH=7 8磷酸缓冲液中，通过计时电流法检测修饰好的工作电极对过氧化氢的响
应；
3)根据所得电流响应与肿瘤标志物抗原标准溶液浓度的关系，绘制工作曲线。3.本发明所述的壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器，其特征在于，所述的肿瘤标记物，选自下列目前发病率高的肿瘤标志物之一癌胚抗原(CEA)，甲胎蛋白(AFP)，α-L-岩藻糖苷酶(AFU)，前列腺特异性抗原(PSA)，CA-125，CA-199，CA-724，CA-242，人绒毛膜促性腺激素(HCG)。本发明的有益成果
(I)肿瘤标志物电化学免疫传感器的制备方法，将纳米多孔金膜引入到肿瘤标志物电化学免疫传感器的制备当中，利用纳米多孔金膜良好的电子传递能力以及其优异的生物相容性，显著改善了电极的性能。(2)将[email protected]@Pt壳核纳米材料与肿瘤标志物二抗直接孵化，利用贵金属优异的生物相容性和高的催化性能，在二抗的标记物中不必使用酶，避免了因酶的失活和泄漏造成的检测误差，简化了二抗标记物的制作步骤，显著提高了电化学免疫传感器的重现性和稳定性。、
(3)使用完全相同的纳米材料和修饰方法，利用抗原与抗体的特异性结合，只需改变肿瘤标志物种类即可实现多种肿瘤标志物的高灵敏、特异性检测，此方法简单、经济，有利于肿瘤标志物传感器的商品化。(4)本发明所制备的电化学免疫传感器，操作简单，检测速度快，30 s即可完成样品测定，可在短时间内实现批量样品的测定。(5)本发明检测肿瘤标志物的方法，检测结果均有仪器自动完成和记录，避免了主观因素的影响，并有很好的重现性，便于现场检测。


下面结合

和具体实施例对本发明作进一步详细描述。图I为[email protected]@Pt壳核纳米材料的透射电镜图。
图2为一种壳核纳米材料构建的肿瘤标志物电化学免疫传感器的构建过程。
具体实施例方式实施例I
一种壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器的制备，包括以下步骤。(I)将银金合金薄膜漂浮在15 mo I · L—1硝酸液面上O. 5 min,利用浓硝酸将银腐蚀掉，制成纳米多孔金膜。将纳米多孔金膜用超纯水洗涤至其PH=7. O。(2)在烧瓶内加入20 mmol · L4氯金酸2. 5 mL ；20 mmol · L4四氯钮!酸钠4.0mL ；20 mmol · L—1四氯钼酸钾4. O mL ;嵌段式聚醚F-127 O. I g，混合均匀后立即加入O. 4mo I · L—1抗坏血酸I. O mL。室温下搅拌I h。离心水洗3次,干燥后即制成AuOPdOPt壳核纳米材料，其纳米材料的形貌见图1，由图I透射电镜图可以看出，[email protected]@Pt为壳核结构，其粒径为20 nm，材料分散性好、颗粒均匀，适合作为电化学免疫传感器的制作材料。(3)将[email protected]@Pt壳核纳米材料和肿瘤标记物二抗混合加入到pH = 7. 4磷酸盐缓冲溶液中制成混合液，使[email protected]@Pt壳核纳米材料与肿瘤标记物二抗的质量浓度比例为5001，将上述混合液室温下震荡孵化12 h。10000 rpm下离心，用pH = 7. 4磷酸盐缓冲溶液清洗，然后重新分散于pH = 7. 4磷酸盐缓冲溶液中，获得[email protected]@Pt壳核纳米材料一肿瘤标记物二抗复合物溶液。(4)将直径4 mm的玻碳电极依次用I. 0,0. 3和0. 05 mm的三氧化二铝抛光粉抛光处理，乙醇超声清洗，再用超纯水冲洗干净，然后将电极置于5 mmol · Γ1铁氰化钾溶液中，在一0.2 0.6 V电位下扫描，使峰电位差小于110 mV。(5)根据图2 —种壳核纳米材料构建的肿瘤标志物电化学免疫传感器的构建过程进行制备。将纳米多孔金膜修饰于玻碳电极表面，室温干燥。将10 μ g -mL-1肿瘤标志物一抗6 μ L滴涂到纳米多孔金膜修饰的电极表面，置于4 °C湿润条件下晾干。将浓度为100μ g ι Γ1牛血清白蛋白3 μ L滴涂到肿瘤标志物一抗修饰的电极表面，4 ° C下湿润条件下晾干。将肿瘤标志物抗原6 μ L滴涂在牛血清白蛋白修饰的电极表面，4 °C下湿润条件下晾干。将步骤(2)制备的[email protected]@Pt壳核纳米材料一肿瘤标记物二抗复合物溶液6 μ L滴涂于肿瘤标志物抗原修饰的电极表面，4 °C下湿润条件下晾干。实施例2一种壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器的制备，包括以下步骤。(I)将银金合金薄膜漂浮在15 mo I · Γ1硝酸液面上3 min，利用浓硝酸将银腐蚀掉，制成纳米多孔金膜。将纳米多孔金膜用超纯水洗涤至其PH=7. O。(2)在烧瓶内加入20 mmol · L4氯金酸2. 5 mL ；20 mmol · L4四氯钮!酸钠4.0mL ；20 mmol · L—1四氯钼酸钾4.0 mL ;嵌段式聚醚F-127 O. lg，混合均匀后立即加入O. 4mo I · L—1抗坏血酸I. O mL。室温下搅拌I h。离心水洗3次,干燥后即制成AuOPdOPt壳核纳米材料，其透射电镜形貌见图I。(3)将[email protected]@Pt壳核纳米材料和肿瘤标记物二抗混合加入到pH = 7. 4磷酸盐缓冲溶液中制成混合液，使[email protected]@Pt壳核纳米材料与肿瘤标记物二抗的质量浓度比例为7501，将上述混合液室温下震荡孵化12 h。10000 rpm下离心，用pH = 7. 4磷酸盐缓冲溶液清洗，然后重新分散于PH = 7. 4磷酸盐缓冲溶液中。
(4)将直径4 mm的玻碳电极依次用I. 0,0. 3和0. 05 mm的三氧化二铝抛光粉抛光处理，乙醇超声清洗，再用超纯水冲洗干净，然后将电极置于5 mmol · Γ1铁氰化钾溶液中，在一0.2 0.6 V电位下扫描，使峰电位差小于110 mV。(5)根据图2 —种壳核纳米材料构建的肿瘤标志物电化学免疫传感器的构建过程进行制备。将纳米多孔金膜修饰于玻碳电极表面，室温干燥。将10 Ug^mL-1肿瘤标志物一抗6 μ L滴涂到纳米多孔金膜修饰的电极表面，置于4 ° C湿润条件下晾干。将浓度为100μ g ι Γ1牛血清白蛋白3 μ L滴涂到肿瘤标志物一抗修饰的电极表面，4 ° C下湿润条件下晾干。将肿瘤标志物抗原6 μ L滴涂在牛血清白蛋白修饰的电极表面，4 °C下湿润条件下晾干。将步骤(2)制备的[email protected]@Pt壳核纳米材料一肿瘤标记物二抗复合物溶液6 μ L滴涂于肿瘤标志物抗原修饰的电极表面，4 °C下湿润条件下晾干。实施例3
一种壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器的制备，包括以下步骤。(I)将银金合金薄膜漂浮在15 mo I · Γ1硝酸液面上5 min，利用浓硝酸将银腐蚀掉，制成纳米多孔金膜。将纳米多孔金膜用超纯水洗涤至其PH=7. O。(2)在烧瓶内加入20 mmol · L4氯金酸2. 5 mL ；20 mmol · L4四氯钮!酸钠4.0mL ；20 mmol · L—1四氯钼酸钾4. O mL ;嵌段式聚醚F-127 0. I g，混合均匀后立即加入0. 4mo I · L—1抗坏血酸I. O mL。室温下搅拌I h。离心水洗3次,干燥后即制成AuOPdOPt壳核纳米材料，其透射电镜形貌见图I。(3)将[email protected]@Pt壳核纳米材料和肿瘤标记物二抗混合加入到pH = 7. 4磷酸盐缓冲溶液中制成混合液，使[email protected]@Pt壳核纳米材料与肿瘤标记物二抗的质量浓度比例为1000 : 1，将上述混合液室温下震荡孵化12 h，10000 rpm下离心，用pH = 7. 4磷酸盐缓冲溶液清洗，然后重新分散于PH = 7. 4磷酸盐缓冲溶液中。(4)将直径4 mm的玻碳电极依次用I. 0,0. 3和0. 05 mm的三氧化二铝抛光粉抛光处理，乙醇超声清洗，再用超纯水冲洗干净，然后将电极置于5 mmol · Γ1铁氰化钾溶液中，在一0.2 0.6 V电位下扫描，使峰电位差小于110 mV。(5)根据图2 —种壳核纳米材料构建的肿瘤标志物电化学免疫传感器的构建过程进行制备。将纳米多孔金膜修饰于玻碳电极表面，室温干燥。将10 μ g. mL—1肿瘤标志物一抗6μ L滴涂到纳米多孔金膜修饰的电极表面，置于4 °C湿润条件下晾干。将浓度为100μ g Π Γ1牛血清白蛋白3 μ L滴涂到肿瘤标志物一抗修饰的电极表面，4 ° C下湿润条件下晾干。将肿瘤标志物抗原6 μ L滴涂在牛血清白蛋白修饰的电极表面，4 °C下湿润条件下晾干。将步骤(2)制备的[email protected]@Pt壳核纳米材料一肿瘤标记物二抗复合物溶液6 μ L滴涂于肿瘤标志物抗原修饰的电极表面，4 °C下湿润条件下晾干。实施例4
实施例I 3制备的肿瘤标志物电化学免疫传感器，分别用于肿瘤标志物检测，包括以下步骤。(I)工作曲线的绘制，步骤如下
1)将参比电极一饱和甘汞电极、对电极一钼丝电极和工作电极正确连接在CHI760D电 化学工作站上；
2)在pH=7.4磷酸缓冲液中，通过计时电流法检测修饰好的工作电极对过氧化氢的响
应；
3)根据所得电流响应与肿瘤标志物抗原标准溶液的浓度关系，绘制工作曲线。(2)肿瘤标志物的检测。实施例5乳腺癌肿瘤标志物CA_125、CEA或HCG
一种乳腺癌肿瘤标志物免疫传感器的制备及应用，包括以下步骤
(1)选择乳腺癌肿瘤标志物，按照实施例I所述的步骤构建电化学免疫传感器；
(2)按照实施例4所述的步骤进行检测，乳腺癌肿瘤标志物的检测技术指标见表I。表I 乳腺癌肿瘤标志物的检测技术指标_
肿瘤标志物线性范围，ng· ml·/1_检测限，Pg · ml·/1
CA-125 ~0.004 ^20I. 3
CEA~0.004 ^301.2
HCG|θ· 005~20| · 5—
由表I检测技术指标结果表明，该电化学免疫传感器用于乳腺癌肿瘤标志物的检测，
其线性范围宽，检测限低，方法灵敏度高。实施例6肝癌肿瘤标志物AFP或AFU
一种肝癌肿瘤标志物免疫传感器的制备及应用，包括以下步骤
(1)选择肝癌肿瘤标志物，按照实施例2所述的步骤构建电化学免疫传感器；
(2)按照实施例4所述的步骤进行检测，肝癌肿瘤标志物的检测技术指标见表2。表2 肝癌肿瘤标志物的检测技术指标 _
肿瘤标志物线性范围，ng· ml·/1_检测限，Pg · ml·/1
AFP~0.003^ 201.3
AFU|θ· 003~20|θ· 91—
由表2检测技术指标结果表明，该电化学免疫传感器用于肝癌肿瘤标志物的检测，其
线性范围宽，检测限低，方法灵敏度高。实施例7胃癌肿瘤标志物CA-724、CA_199或CA-242 一种胃癌肿瘤标志物免疫传感器的制备及应用，包括以下步骤
(1)选择胃癌肿瘤标志物，按照实施例3所述的步骤构建电化学免疫传感器；
(2)按照实施例4所述的步骤进行检测，胃癌肿瘤标志物的检测技术指标见表3。表3胃癌肿瘤标志物的检测技术指标
权利要求
1.壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器的制备，其特征在于，包括以下步骤 (1)纳米多孔金膜的制备； (2)AuiPdiPt壳核纳米材料一肿瘤标记物ニ抗复合物的制备； (3)电化学免疫传感器的构建。
2.如权利要求I中所述的壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器的制备，其特征在于，所述的纳米多孔金膜的制备，步骤如下 (1)将银金合金薄膜漂浮在14 16mol じ1硝酸液面上0. 5 5 min，将银腐蚀掉，制成纳米多孔金膜； (2)将纳米多孔金膜用超纯水洗涤至其pH=7.O。
3.如权利要求I中所述的壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器的制备，其特征在于，所述的[email protected]@Pt壳核纳米材料一肿瘤标记物ニ抗复合物的制备，步骤如下 (1)将[email protected]@Pt壳核纳米材料和肿瘤标记物ニ抗混合加入到pH= 7. 4磷酸盐缓冲溶液中，使[email protected]@Pt壳核纳米材料与肿瘤标记物ニ抗的质量浓度比例为500 1000:1，配制成混合液A ； (2)将上述混合液A室温下震荡孵化12 24h, 10000^12000 rpm下离心，用pH = 7.4磷酸盐缓冲溶液清洗，然后重新分散于pH = 7. 4磷酸盐缓冲溶液中配制成混合液B并储存在4°C下备用。
4.如权利要求I中所述的壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器的制备，其特征在于，所述的电化学免疫传感器的构建，步骤如下 (1)将直径4mm的玻碳电极依次用1.0、0. 3和0.05 mm的三氧化ニ铝抛光粉抛光处理，こ醇超声清洗，再用超纯水冲洗干净，然后将电极置于5 mmol じ1铁氰化钾溶液中，在一0. 2 0. 6 V电位下扫描，使峰电位差小于110 mV ； (2)将纳米多孔金膜修饰于玻碳电极表面，室温干燥； (3)将肿瘤标志物一抗滴涂到步骤(2)纳米多孔金膜修饰的电极表面，置于4°C湿润条件下晾干； (4)将浓度为100u g 牛血清白蛋白滴涂到步骤(3)肿瘤标志物一抗修饰的电极表面，4° C下湿润条件下晾干； (5)将肿瘤标志物抗原滴涂在步骤(4)牛血清白蛋白修饰的电极表面，4°C下湿润条件下晾干； (6 )将溶液B滴涂在步骤(5 )肿瘤标志物抗原修饰的电极表面，4° C下湿润条件下晾干，电化学免疫传感器制备完成。
5.如权利要求广4所述的制备的壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器，其特征在于，用于肿瘤标志物的检测，方法如下 (1)工作曲线的绘制； (2)肿瘤标志物的检测。
6.如权利要求5中所述的制备的壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器，用于肿瘤标志物的检测，其特征在于，所述的工作曲线的绘制，步骤如下 (I)将參比电极ー饱和甘汞电极、对电极ー钼丝电极和工作电极正确连接在电化学エ作站上；(2)在pH=7 8的磷酸缓冲液中，通过计时电流法检测修饰好的工作电极对过氧化氢的响应； (3)根据所得电流响应与肿瘤标志物抗原标准溶液浓度的关系，绘制工作曲线。
7.如权利要求I 6所述的壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器，其特征在于，所述的肿瘤标记物，选自下列目前发病率高的肿瘤标志物之一癌胚抗原(CEA)，甲胎蛋白(AFP)，a -L-岩藻糖苷酶(AFU)，前列腺特异性抗原(PSA)，CA-125，CA-199, CA-724，CA-242，人绒毛膜促性腺激素(HCG)。
全文摘要
本发明涉及一种壳核纳米材料构建的肿瘤标志物免疫传感器的制备及应用，属于新型纳米功能材料与生物传感器技术领域。其特征在于(1)纳米多孔金膜的制备；(2)[email protected]@Pt壳核纳米材料—肿瘤标记物二抗复合物的制备；(3)电化学免疫传感器的构建。本发明的优点在于灵敏度高、特异性好、易于操作、检测限低，能实现多种肿瘤标记物的高灵敏、特异性、快速准确检测。
文档编号G01N27/327GK102778561SQ20121026110
公开日2012年11月14日 申请日期2012年7月26日 优先权日2012年7月26日
发明者于海琴, 吴丹, 孙蒙, 张勇, 张潇月, 曹伟, 朱宝存, 李燕, 李玉阳, 李贺, 杜斌, 罗川南, 闫良国, 马洪敏, 魏琴 申请人:济南大学