专利名称：基于a组链球菌标记的风湿性心脏病的诊断和治疗方法
技术领域：
本发明涉及鉴定化脓链球菌(Streptococcus pyogenes) (A组链球菌GAS)感染相关的风湿性心脏病(RHD)病人和鉴定有发生GAS感染相关RHD风险的病人的领域。本发明也提供预防和治疗GAS感染相关RHD的方法和组合物。技术背景
人类病原A组链球菌(化脓链球菌，GAS)被广泛认为是常见咽炎的一个主要病因。该种细菌的感染还能造成严重的侵入性疾病和非化脓性自体免疫后遗症。急性风湿热 (ARF)是一种多焦点的自体免疫疾�。诿挥兄瘟频腉AS感染个体中，发生率是O. I - 3%。
ARF由1944年首次出版的更新的琼斯标准所诊断。根据更新的琼斯标准，当有两种主要标准(游走性多关节炎；心脏炎；皮下节结；边缘性红斑；薛登汉氏舞蹈病)或者一个主要标准加上两个次要标准(发热；关节痛；红细胞沉降率或者C反应蛋白增加；白细胞增多；ECG显示心传导阻滞特征)时，以及出现GAS感染迹象，可作出ARF诊断。
ARF的主要临床后遗症是风湿性心脏病(RHD)。RHD能导致严重的心脏�。橛行募⊙谆蛘咝陌暄祝斐伤劳龌蛘甙昴せ惶媸�。在发展中国家中，在小于50岁的个体中，RHD 是获得性心脏病的主要病因。在发达国家，ARF和RHD由于可以利用抗生素来治疗GAS感染而较为少见。但是，在1980年代中期美国的一些地域，报道了 ARF和RHD的复发，并且在犹太州盐湖城附近的山区中持续发生。
目前，采用诸如ECG和超声波心动图的检测证明一个诊断出ARF的病人已经发生了 RHD。至今为止，还没有对于GAS感染产生的患有RHD或有发展RHD风险的个体的诊断方法。发明内容
本发明涉及到鉴定GAS感染引起的患有或者有发生RHD风险的个体的方法。本发明也涉及到在这些方法中应用的蛋白质阵列。本发明同时也提供预防和治疗GAS感染相关 RHD的方法和组合物。
诊断方法
技术领域：
本发明提供了在病人中诊断GAS感染相关的风湿性心脏病(RHD)，或者鉴定一个病人有发生GAS相关RHD风险的方法，所述方法包括如下步骤
a)将一个病人的生物样品接触至少一个GAS抗原，接触条件适合该生物样品中存在的任何抗体结合至少一个GAS抗原，并且
b)将病人生物样品的抗体对至少一个GAS抗原的反应性与健康个体的对照生物样品的抗体对至少一个GAS抗原的反应性作比较，
其中，病人生物样品的反应性低于健康个体的对照生物样品指示了该病人患有 GAS感染相关风湿性心脏病(RHD)，或者该病人有发展GAS感染相关RHD的风险。
在一方面，本发明提供了在病人中诊断GAS感染相关风湿性心脏病(RHD)，或者鉴定一个病人有发生GAS感染相关RHD风险的方法，所述方法包括以下步骤
a)将病人的生物样品接触选自含以下氨基酸序列的组的至少一个GAS抗原
SEQIDNOI(GAS5)
SEQIDNO2(GAS5F)
SEQIDNO3(GAS25)
SEQIDNO4(GAS40)
SEQIDNO5(GAS57)
SEQIDNO6(GAS97)
SEQIDNO7(GAS80)，和
SEQIDNO8(SpeA),
或者其功能等价物，接触条件适合所述生物样品中存在的任何抗体结合至少一个 GAS抗原或者其功能等价物；
b)评价与至少一个GAS抗原或者其功能等价物结合的病人生物样品的任何抗体反应性，和
c)将步骤b)中的反应性与结合至少一个GAS抗原或者其功能等价物的健康个体的对照生物样品的抗体反应性作比较，
其中，病人生物样品的反应性低于健康个体的对照生物样品指示了该病人患有 GAS感染相关风湿性心脏病(RHD)，或者该病人有发展GAS感染相关RHD的风险。
术语“风湿性心脏病(RHD)”涵盖了急性风湿热影响心脏的情况，包括二尖瓣和/ 或动脉瓣的损害，心肌炎和心包炎。
对于受RHD影响的病人和健康个体的血清样品分析产生令人惊讶的发现，与RHD 健康个体的血清反应性相比，受RHD影响病人的血清显示与某些GAS抗原有显著较低的反应性。这些发现提供首要的证据，与GAS抗原的反应性能用来区分从健康个体得到的血清和从RHD病人得到的血清。具体地说，RHD病人的血清显示了与下表I鉴定的8个GAS抗原的低反应性
表I :本发明诊断方法中应用的GAS抗原。
权利要求
1/2页1.一种在病人中诊断GAS感染相关的风湿性心脏病(RHD)，或者鉴定一个病人有发生 GAS感染相关RHD风险的方法，所述方法包括以下步骤a)将病人的生物样品接触至少一个GAS抗原，接触条件适合该生物样品中存在的任何抗体结合至少一个GAS抗原，和b)将病人生物样品中抗体与至少一个GAS抗原的反应性与健康个体的对照生物样品中抗体与至少一个GAS抗原的反应性作比较，其中，病人的生物样品的反应性低于健康个体的对照生物样品，指示了该病人患有GAS 感染相关的风湿性心脏病(RHD)，或者该病人有发展GAS感染相关RHD的风险。
2.如权利要求I所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤a)将病人生物样品接触选自含有以下氨基酸序列组的至少一个GAS抗原SEQIDNOI(GAS5),SEQIDNO 2(GAS5F)，SEQIDNO 3(GAS25)，SEQIDNO4(GAS40)，SEQIDNO 5(GAS57)，SEQIDNO6 (GAS97)，SEQIDNO :7(GAS80)，和SEQIDNO8(SpeA)，或者其功能等价物，接触条件适合生物样品中存在的任何抗体结合至少一个GAS抗原或者其功能等价物；和b)评价与至少一个GAS抗原或者其功能等价物结合的病人生物样品中任何抗体的反应性，c)将步骤b)中的反应性与结合至少一个GAS抗原或者其功能等价物的健康个人的对照生物样品中抗体的反应性作比较，其中，病人的生物样品的反应性低于健康个体的对照生物样品的反应性，指示了该病人患有GAS感染相关的风湿性心脏病(RHD)，或者该病人有发展GAS感染相关RHD的风险。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤a)包括将样品接触1、2、3、4、5、6、7或者 8 个含氨基酸序列 SEQ ID NO 1,SEQ ID NO 2,SEQ ID NO 3,SEQ ID NO 4,SEQ ID NO: 5，SEQ ID NO 6, SEQ ID NO 7, SEQ ID NO 8 的 GAS 抗原或者其功能等价物。
4.如权利要求2或3所述的方法，其特征在于，步骤a)包括将样品接触含氨基酸序列 SEQ ID NO :1、2 和 3 ；SEQ ID NO :1、3 和 4 ；SEQ ID NO :1、4 和 5 ；SEQ ID NO :2、3 和 4 ；SEQ ID NO :2、4和5 ;或SEQ ID NO :3、4和5的3个GAS抗原或者其功能等价物。
5.如权利要求2或3所述的方法，其特征在于，步骤a)包括将样品接触含氨基酸序列 SEQ ID NO :1、2、3 和 4 ;或 SEQ ID NO :2、3、4 和 5 ；SEQ ID NO :1、3、4 和 5 的 4 个 GAS 抗原或者其功能等价物。
6.如权利要求2或3所述的方法，其特征在于，步骤a)包括将样品接触含氨基酸序列 SEQ ID NO :1、2、3、4 和 5 的 5 个 GAS 抗原。
7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其特征在于，所述生物样品是血清样品。
8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其特征在于，所述生物样品取自青少年或者儿童。
9.如权利要求1-8中任一项所述的方法，其特征在于，所述GAS抗原在一个或者多个蛋白质阵列上展示。
10.一个含有至少两个GAS抗原或者其功能等价物的蛋白质阵列，所述GAS抗原具有选自 SEQ ID NO :1，SEQ ID NO :2，SEQ ID NO :3，SEQ ID NO :4，SEQ ID NO :5，SEQ ID NO :6， SEQ ID NO 7或者SEQ ID NO 8的氨基酸序列。
11.一种试剂盒，所述试剂盒包括一个根据权利要求10的蛋白质阵列和使用所述阵列诊断病人患GAS感染相关的风湿性心脏病或者有发展GAS感染相关风湿性心脏病的风险的说明。
12.—种治疗或者预防GAS感染相关RHD的方法，所述方法包括对需要的病人给予选自氨基酸序列SEQ ID NO :1、2、3、4、5、6、7或者8的至少一个GAS抗原或者其功能等价物。
13.用于治疗或者预防GAS感染相关的RHD的选自氨基酸序列SEQID NO :1、2、3、4、5、 6、7或8的至少一个GAS抗原或者其功能等价物。
全文摘要
本发明涉及鉴定化脓链球菌(A组链球菌GAS)感染相关的风湿性心脏病(RHD)病人和鉴定有发生GAS感染相关RHD风险的病人的领域。本发明也提供预防和治疗GAS感染相关RHD的方法和组合物。
文档编号G01N33/569GK102947704SQ201080059368
公开日2013年2月27日 申请日期2010年10月20日 优先权日2009年10月20日
发明者I·马格丽特伊若斯, R·瓦莱里奥, S·阿罕默德, G·格兰迪, E·巴尔托利尼 申请人:诺华有限公司
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