专利名称：一种促甲状腺激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒及其制备方法和检测方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种结合了免疫磁微粒分离技术和化学发光免疫分析技术的促甲状腺激素(TSH)的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒及其制备方法和检测方法。
背景技术：
促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone, TSH)是腺垂体分泌的一种糖蛋白，分子量约28000。它由α和β两个亚单位组成。TSH的α亚单位与由垂体分泌的促黄体生成激素(luteinizing hormone,LH)和促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH),以及由胎盘产生的人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin, HCG)基本相同。它们的差别主要是在β亚单位的氨基酸序列上，使得这些激素有着各不相同的生物学特性，并可以用免疫分析方法把它们区别开来。TSH的作用靶器官是甲状腺。TSH的主要功能有几个方面1.促进甲状腺生长；
2.促进甲状腺的碘吸收、甲状腺过氧化物酶激活和增加合成甲状腺素的辅酶；3.促进甲状腺胶质(主要为甲状腺球蛋白)的合成和水解，分泌甲状腺激素，包括甲状腺素(T4)和三碘甲腺原氨酸(T3) ；4.促进甲状腺滤泡的增长扩散。TSH的合成和释放主要受到以下几方面的调控1.下丘脑一垂体调节系统，促甲状腺激素释放激素(TRH)促进TSH的分泌；2. —方面TSH可促进甲状腺激素的合成，另一方面甲状腺激素又通过负反馈机制调节TSH的分泌；3. TSH受昼夜节律的影响。正常情况下这些激素相互作用保持一种动态平衡，维持正常生理状态。TSH的半衰期为54分钟，每天分泌约165 μ IU，在肝脏和肾脏`代谢清除。临床检测TSH主要用于诊断甲状腺功能紊乱的各种疾病。由甲状腺本身病变引起的为原发性甲状腺功能紊乱，在负反馈机制的作用下TSH水平呈现与Τ3、Τ4相反的变化趋势，如原发性甲亢Τ3、Τ4升高而TSH低于正常水平。继发性甲状腺功能紊乱则因TSH过度刺激或含量过低引起Τ3、Τ4出现相同趋势的变化，如垂体性甲减表现为TSH与Τ3、Τ4均低于正常水平，此时常要进一步做TRH激发试验以确诊病情。检测TSH也常用于评价口服甲状腺素替代治疗的疗效，TSH较低说明用量过大，高于正常则说明用量不足。另外许多临床用药也会影响体内TSH的水平，临床评价检测结果时应予注意，例如糖皮质激素、多巴胺、一些安眠剂和生长抑素会抑制TSH分泌，使检测结果偏低；而组胺抑制剂、碘制剂和锂剂会促进TSH的分泌，使检测结果偏高。在优生优育方面，也常常要检测TSH，如怀孕妇女和婴幼儿，监测生长发育情况是否正常。目前用于检测促甲状腺激素的免疫分析方法主要有酶联免疫分析法、化学发光免疫分析法等。酶联免疫分析法存在灵敏度低，线性范围窄、不易实现全自动化等方法学限制因素。化学发光免疫分析法是在酶联免疫分析法基础上发展起来的一种免疫检测技术，具有灵敏度高、检测线性范围宽、操作简便，自动化程度高等优势。目前化学发光免疫分析技术因其具有上述诸多优点得到了广泛的应用。然而，在实际的免疫检测中，由于待测样品中所含的杂质成分较多，一定程度上影响了检测灵敏度和准确性，所以从复杂的样品基质中快速分离、纯化出目的待测物，是临床检验工作者面临的难题之一。磁微粒免疫检测技术是利用高分子材料合成一定粒度大小的磁性固相微粒作载体，以物理吸附、化学偶联等方法包被上具有特异性亲和力的抗体或抗原等各种免疫活性物质，具有分离速度快、效率高、可重复性好、操作简单、不影响被分离细胞或其他生物材料的生物学性状和功能等特点，在外加磁场作用下可定向运动，使得某些特殊成分得以分离、浓集或纯化。中国发明专利公开CN101949943A公开了一种了促甲状腺激素定量检测试剂盒及其制备方法，其中，试剂盒包括包被有抗促甲状腺激素单克隆抗体的磁微粒混悬液、促甲状腺激素系列校准品、辣根过氧化物酶标记的抗促甲状腺激素单克隆抗体、发光底物A液、发光底物B液以及浓缩洗液。使用该专利公开的试剂盒成功利用了磁微粒免疫检测技术实现了对促甲状腺激素的准确检测。然而，该试剂盒的制备成本和使用成本高，原因是，一方面，在进行包被有抗促甲状腺激素单克隆抗体的磁微粒混悬液的制备时，不仅过程复杂，而且直接将抗促甲状腺激素单克隆抗体包被于磁微粒上的包被率较低，导致较高的成本；另一方面，其采取辣根过氧化物酶标记的抗促甲状腺激素单克隆抗体，该抗体的制备也是非常繁琐，且标记率低，限制其检测效果和导致成本增加。此外，试剂盒在制备工艺上所存在的不易控和稳定性较差的因素，除了导致如前所述的成本增加的问题外，还使得检测的批间差大，限制了检测方法的精密度。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种促甲状腺激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒，其能够以较低的成本制备得到，且能够实现促甲状腺激素准确和高精确地定量测定。本发明同时还提供一种一种促甲状腺激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒的制备方法，该方法工艺稳定，成本低，且所得试剂盒的精密度高。一种促甲状腺激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括第一试剂含荧光素标记的促甲状腺激素抗体的溶液；第二试剂含碱性磷酸酶(ALP)标记的促甲状腺激素抗体的溶液；磁分离剂含包被着荧光素抗体的磁微粒的悬浮液。优选地，该碱性磷酸酶标记的促甲状腺激素抗体由碱性磷酸酶与促甲状腺激素抗体通过交联剂4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烧-1-羧酸琥拍酰亚胺酯(Succinimidyl4-(N-Maleimidomethyl)Cyclohexane-l-Carbo, SMCC)和 2_ 亚氨基硫烧盐酸盐(2-1minothiolane HCl, 2-1T)连接构成。进一步地，所述磁微粒试剂中，包被有荧光素抗体的磁微粒由荧光素抗体与磁微粒通过偶联剂相化学偶联。进一步地，所述第一试剂中的荧光素标记的促甲状腺激素抗体的浓度为O. 5^1 μ g/mL，所述第一试剂的pH为7-9 ;所述第二试剂中的碱性磷酸酶标记的促甲状腺激素抗体的浓度为O. 5"! μ g/mL,所述第二试剂的pH为7_9。本领域技术人员应知晓，本发明的试剂盒还可以进一步包括有其它检测所需的试齐U，例如底物溶液。但是诸如底物溶液等其它试剂可以另行购买或配制，因此，虽然试剂盒中可以包括这些试剂，但它们对于本发明试剂盒来说并非必不可少。本发明采取的又一技术方案是一种上述的促甲状腺激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒的制备方法，其包括分别制备所述第一试剂、所述第二试剂以及磁分离剂的步骤，其中所述第二试剂的制备过程如下①将促甲状腺激素抗体加入交联剂2-亚氨基硫烷盐酸盐溶液中，室温静置后，再加入甘氨酸溶液，再次室温静置，收集活化后的促甲状腺激素抗体，于疒8°C下保存备用；②将碱性磷酸酶溶液加入交联剂4- (N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯溶液，室温静置，收集活化后的碱性磷酸酶，于疒8°C下保存备用；③将上述步骤①所得活化后的促甲状腺激素抗体与步骤②所得活化后的碱性磷酸酶混合，静置反应，使生成碱性磷酸酶标记的促甲状腺激素抗体，反应结束后，将反应液用Supperdex200凝胶纯化柱纯化,选择具有适当pH值的缓冲液调整浓度和pH值即得所述第二试剂；其中，所述的促甲状腺激素抗体、所述碱性磷酸酶的纯度均大于等于95wt%，且所述碱性磷酸酶的比活性超过1000u/mg。优选地，步骤①中，取促甲状腺激素抗体，加入交联剂2-1T溶液溶解，室温静置10mirT30min，加入甘氨酸溶液，再次室温静置2 10min，用G-25凝胶纯化柱除盐，收集活化后的促甲状腺激素抗体，于2-8°C保存备用。
优选地，步骤②中，取浓度大于等于5mg/mL的碱性磷酸酶溶液，加入交联剂SMCC溶液，室温静置2(T40min，用G-25凝胶柱除盐，收集活化后碱性磷酸酶，于2_8°C保存备用。优选地，步骤③中，将上述活化的促甲状腺激素抗体与活化的碱性磷酸酶按分子摩尔比为1:1 I 2混合，于2-8°C条件下静置12-24h。其中适当pH值的缓冲液可以为例如含有O. 5%牛血清白蛋白、pH8. O的TRIS缓冲液。进一步地，所述的第一试剂的制备方法如下配制含有荧光素的pH为扩10的缓冲液，然后按照荧光素与促甲状腺激素抗体的分子比为2(Γ200:1的比例,将所述含有荧光素的pH为CIO的缓冲液与促甲状腺激素抗体的pH为CIO的缓冲液混合，混匀后，室温静置反应，然后将反应液通过G-25凝胶柱进行分离，除去游离的荧光素，得到含有荧光素标记的促甲状腺激素抗体的溶液，接着用具有适当PH值的缓冲液调整浓度和pH，即得所述的第一试剂。其中适当PH值的缓冲液可以为例如含有0.5%牛血清白蛋白、ρΗ8. O的TRIS缓冲液。进一步地，所述磁分离剂的制备方法如下将含有羧基活性基团的磁微粒与荧光素抗体在偶联剂碳二亚胺的存在下，室温反应2 18小时，反应结束，磁分离，去上清，用具有适当PH值的缓冲液调整pH和浓度，即得所述的磁分离剂。其中所述的磁微粒具有超顺磁性，其直径为0. 5^2 μ m,每克磁微粒上所带的羧基活性基团的含量不低于0. 4mmol ;所述的荧光素抗体为单克隆抗体或多克隆抗体，纯度大于等于90wt%，稀释效价大于1:100万。
优选地，上述的具有适当pH值的缓冲液为含有O. 5%牛血清白蛋白、pH8. O的TRIS缓冲液。本发明所述的荧光素可以是已知的各种荧光素，常用的有例如异硫氰酸荧光素，四乙基罗丹明，四甲基异硫氰酸罗丹明等。本发明同时还提供了一种采用上述的试剂盒应用于促甲状腺激素定量检测的检测方法，其特征在于，包括以下步骤(I)免疫反应在检测管中加入待测样本原液，依次加入第一试剂和第二试剂，混匀，在25 40°C下进行第一次温育，然后加入磁分离试剂，混匀，在25 40°C下进行第二次
温育；(2)洗涤使磁微粒在磁场中沉降，去除上清，加入清洗液，去除磁�。鸬词勾盼⒘３浞只煨缓蟠欧掷耄コ锨澹�(3)加底物溶液检测发光强度在检测管中加入碱性磷酸酶催化的化学发光底物，去除磁�。浞只煨蠹觳夥⒐馇慷戎�。进一步地，步·骤(I)中所述第一次温育的时间可以为l(T40min，通常为30min ;第二次温育的时间可以为2"!Omin,通常为5min。由于以上技术方案的实施，本发明与现有技术相比具有如下优点1.采用本发明的试剂盒可以实现促甲状腺激素准确，精密的检测，其三种试剂均可以通过简易、稳定的制备工艺制备得到，生产成本低，且由于制备工艺的稳定性，试剂盒分析批间差异�。觳獾姆治黾渚芏忍岣撸�2.本发明的试剂盒中的含有碱性磷酸酶标记的促甲状腺激素抗体的溶液的制备方法，能够有效将促甲状腺激素抗体与碱性磷酸酶偶联，偶联效率高，标记率高，进一步降低试剂盒的成本低和确保试剂盒的检测效果；3.采取本发明的试剂盒进行检测，准确度好，精密度高，灵敏度高，检测范围宽，样品无需预稀释，操作简单省时，与采用进口试剂盒进行检测的方法相比，本发明的检测方法在成本上具有显著的优势。
图1为测试校准品标准曲线；图2为灵敏度评价拟合曲线；图3为血清样本检测结果相关性(其中横坐标X为实施例4制备得的试剂盒样本测值，浓度单位为μ IU/mL,纵坐标j为ROCHE公司试剂盒样本测值，浓度单位为μ IU/mL)。
具体实施例方式实施例1第一试剂的制备(I)材料与仪器以磷酸盐缓冲液保存的促甲状腺激素(TSH)单克隆抗体(纯度超过95wt%，浓度为2mg/mL);异硫氰酸荧光素(FITC)，碳酸钠等试剂应达到化学纯；G_25凝胶纯化柱采购自GE公司。(2)制备步骤①用O.1 O. 2mol/L pH 9. (TlO. O的碳酸盐缓冲液配制O. 5mg/mL的FITC溶液；
②按照TSH抗体与FITC分子比为1:20的比例在抗体溶液中加入步骤①所配FITC溶液，混合均匀，室温静置12h小时，反应生成TSH抗体-FITC连接物；③将经过步骤②的反应液通过G-25凝胶柱进行分离，除去未反应的FITC，得到含有TSH抗体-FITC连接物(即FITC标记的TSH抗体)的溶液；④将步骤③所得含有TSH抗体-FITC连接物的溶液用含O. 5%牛血清白蛋白(BSA)pH 8. O的O. lmol/L的TRIS缓冲液稀释到TSH抗体-FITC连接物浓度为O. 5 I μ g/mL,即为第一试剂。实施例2第二试剂的制备(I)材料与仪器以磷酸盐缓冲液保存的TSH单克隆抗体(纯度超过95wt%，浓度为2mg/mL);以磷酸缓冲液保存的碱性磷酸酶(ALP溶液，ALP纯度为约99%，比活性为约1500U/mg,浓度为10mg/mL);交联剂SMCC，2-1T购自THERMO公司，TRIS等化学试剂应达到化学纯；G-25凝胶纯化柱为GE公司产品。(2)制备步骤①取Img TSH抗体，加入10mg/mL的偶联剂2-1T溶液2-4 μ L，室温静置20min，加入O. lmol/L的甘氨酸溶液10 μ L，室温静置5min，用G-25凝胶柱除盐，收集活化后TSH抗体，2-8 °C保存备用；②取1. 5mg的ALP溶液，加入5mg/mL的SMCC溶液10-20 μ L，室温静置30min，用G-25凝胶柱除盐，收集活化后ALP，2-8°C保存备用；③将上述活化的癌抗原TSH抗体与活化的ALP混合，2_8°C条件下静置12_24h，用Supperdex200凝胶纯化柱纯化偶联物，获得TSH抗体-ALP连接物浓溶液，2_8°C保存备用；④将TSH抗体-ALP连接物浓溶液用含0. 5%牛血清白蛋白(BSA)pH8. O的0.1mol/L的TRIS缓冲液稀释到0. 5-1 μ g/mL,完成第二试剂的制备。实施例3磁分离试剂的制备(I)材料与仪器磁微粒的悬浮液磁微�：�5wt%，磁微�：然�(C00H)活性集团，每克(g)磁微粒(干重)羧基含量不低于0. 4毫摩尔(mmol)，具有超顺磁性，直径在0. 5_2μπι之间。抗FITC抗体可以是多克隆抗体，也可以是单克隆抗体，纯度为90wt%以上，稀释效价超过1:100万；2-吗啉乙磺酸(MES)、碳二亚胺(EDC)、TRIS和其他试剂应达到化学纯。(2)制备步骤
①取IOOmg磁微粒的悬浮液，磁分离去上清，用0. 05mo 1/L, pH 4. 5 5MES缓冲液IOmL重悬；②加入2 4mg的抗FITC抗体,室温混悬30 60min ；③加入0. 5 ImL新鲜配制的10mg/mL的EDC水溶液，室温混悬2 12h ；④磁分离，去上清，用含0. 5%牛血清白蛋白(BSA) pH 8. O的0. lmol/L的TRIS缓冲液重悬到lmg/mL, pH 8. O,即为磁分离试剂。实施例4促甲状腺激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒该试剂盒包括按照实施例1方法制备的第一试剂(浓度为0. 75 μ g/mL), 50mL ；
按照实施例2方法制备的第二试剂(浓度为O. 75 μ g/mL), 50mL ；按照实施例3方法制备的磁分离试剂50mL。实施例5促甲状腺激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒该试剂盒包括按照实施例1方法制备的第一试剂(浓度为0. 5 μ g/mL), 50mL ；按照实施例2方法制备的第二试剂(浓度为0. 5 μ g/mL), 50mL ；按照实施例3方法制备的磁分离试剂50mL。实施例6促甲状腺激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒该试剂盒包括按照实施例1方法制备的第一试剂(浓度为1 μ g/mL), 50mL ；按照实施例2方法制备的第二试剂(浓度为1 μ g/mL), 50mL ；按照实施例3方法制备的磁分离试剂50mL。实施例7采取实施例4的试剂盒进行促甲状腺激素的定量检测(1)检测步骤①免疫反应在检测管中加入50 μ L待测样本(血清或血楽)原液,然后加入50 μ L第一试剂，50 μ L第二试剂，混匀，37土 1°C条件下温育30mi η ;加入50 μ L磁分离试剂，混匀，37 ± I °C条件下温育5min ；②洗涤使磁微粒在磁场中沉降，去除上清，加入300 μ L的清洗液，去除磁�。鸬词勾盼⒘３浞只煨缓蟠欧掷耄コ锨澹淮瞬街柚馗�3次；③加底物溶液检测发光强度在检测管中加入100 μ L碱性磷酸酶化学发光底物溶液(北京阿匹斯生物技术有限公司APCL-1 )，震荡使磁微粒充分混悬，在5min内检测发光强度。(2)绘制校准品标准曲线校准品标准曲线参见图1。(3)灵敏度评价检测“0”浓度样本，重复检测20次，计算相对发光强度(RLU)的平均值(M)和标准差(SD)，并计算M+2SD值，根据零浓度校准品和相邻校准品之间的浓度-RLU进行两点回归拟合得出一次方程，将M+2SD值带入上述方程中，求出对应的浓度值，即为最低检测限。本方法的灵敏度不大于0. 05 μ I U/mL。其中A点发光值分别参见表1:表
权利要求
1.一种促甲状腺激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒，所述试剂盒包括第一试剂含荧光素标记的促甲状腺激素抗体的溶液；第二试剂含碱性磷酸酶标记的促甲状腺激素抗体的溶液；磁分离剂含包被着荧光素抗体的磁微粒的悬浮液。
2.根据权利要求1所述的促甲状腺激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于所述碱性磷酸酶标记的促甲状腺激素抗体由碱性磷酸酶与促甲状腺激素抗体通过交联剂4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯和2-亚氨基硫烷盐酸盐连接构成。
3.根据权利要求1或2所述的促甲状腺激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于所述第一试剂中的荧光素标记的促甲状腺激素抗体的浓度为O. 5^1 μ g/mL，所述第一试剂的PH为7-9 ;所述第二试剂中的碱性磷酸酶标记的促甲状腺激素抗体的浓度为O.5^1 μ g/mL，所述第二试剂的pH为7-9。
4.一种如权利要求3所述的促甲状腺激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒的制备方法，其包括分别制备所述含有荧光素标记的促甲状腺激素抗体的溶液、所述含有碱性磷酸酶标记的促甲状腺激素抗体的溶液以及所述包被有荧光素抗体的磁微粒的悬浮液的步骤，其特征在于所述含有碱性磷酸酶标记的促甲状腺激素抗体的溶液的制备过程如下①将促甲状腺激素抗体加入交联剂2-亚氨基硫烷盐酸盐溶液中室温静置后，再加入甘氨酸溶液，再次室温静置，收集活化后的促甲状腺激素抗体，于疒8°C下保存备用；②将碱性磷酸酶溶液加入交联剂4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯溶液，室温静置，收集活化后的碱性磷酸酶，于2l°C下保存备用；③将上述步骤①所得活化后的促甲状腺激素抗体与步骤②所得活化后的碱性磷酸酶混合，静置反应，使生成碱性磷酸酶标记的促甲状腺激素抗体，反应结束后，将反应液用 Supperdex200凝胶纯化柱纯化,选择具有适当pH值的缓冲液调整浓度和pH值即得所述第二试剂；其中，所述的促甲状腺激素抗体、所述碱性磷酸酶的纯度均大于等于95wt%，且所述碱性磷酸酶的比活性超过1000u/mg。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于步骤①中，取促甲状腺激素抗体，加入偶联剂2-1T溶液溶解，室温静置10mirT30min，加入甘氨酸溶液，室温静置2 lOmin，用 G-25凝胶纯化柱除盐，收集活化后的促甲状腺激素抗体，于2-8°C保存备用。
6.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于步骤②中，取浓度大于等于5mg/ mL的碱性磷酸酶溶液，加入4- (N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯溶液， 室温静置2(T40min，用G-25凝胶柱除盐，收集活化后碱性磷酸酶，于2_8°C保存备用。
7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述第一试剂的制备方法如下配制含有荧光素的pH为9 10的缓冲液,然后按照荧光素与促甲状腺激素抗体的分子比为 20^200:1的比例,将所述含有荧光素的pH为9 10的缓冲液与促甲状腺激素抗体的pH为 9^10的缓冲液混合，混匀后，室温静置反应，然后将反应液通过G-25凝胶柱进行分离，除去游离的荧光素，得到含有荧光素标记的促甲状腺激素抗体的溶液，接着用具有适当PH值的缓冲液调整浓度和PH，即得第一试剂。
8.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述磁分离剂的制备方法如下使含有羧基活性基团的磁微粒与荧光素抗体在偶联剂碳二亚胺的存在下，室温反应2 18小时， 反应结束，磁分离，去上清，用具有适当PH值的缓冲液调整pH和浓度，即得所述的磁分离剂；其中所述的磁微粒具有超顺磁性，其直径为O. 5 2 μ m，每克磁微粒上所带的羧基活性基团的含量大于等于O. 4mmol ;所述的荧光素抗体为单克隆抗体或多克隆抗体，纯度大于等于90wt%,稀释效价大于1:100万。
9.根据权利要求4或7或8所述的制备方法，其特征在于所述的具有适当pH值的缓冲液为含有O. 5%牛血清白蛋白、pH8. O的TRIS缓冲液。
10.采用权利要求Γ3中任一项权利要求所述的试剂盒用于对促甲状腺激素定量检测的检测方法，其特征在于，包括以下步骤(1)免疫反应在检测管中加入待测样本原液，依次加入第一试剂和第二试剂，混匀，在 25 4(TC下进行第一次温育，然后加入磁分离试剂，混匀，在25 4(TC下进行第二次温育；(2)洗涤使磁微粒在磁场中沉降，去除上清，加入清洗液，去除磁场，震荡使磁微粒充分混悬，然后磁分离，去除上清；(3)加底物溶液检测发光强度在检测管中加入碱性磷酸酶催化的化学发光底物，去除磁�。浞只煨蠹觳夥⒐馇慷戎�。
全文摘要
本发明涉及一种促甲状腺激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒及其制备方法和检测方法，该试剂盒包括含有荧光素标记的促甲状腺激素抗体的溶液、包被有荧光素抗体的磁微粒的悬浮液，以及含有碱性磷酸酶标记的促甲状腺激素抗体的溶液。本发明使得能够以更低成本和更高准确度和精密度对促甲状腺激素进行定量检测。
文档编号G01N21/76GK103048474SQ20121054984
公开日2013年4月17日 申请日期2012年12月18日 优先权日2012年12月18日
发明者于大为, 程晓蕾, 赵文姬 申请人:苏州浩欧博生物医药有限公司
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