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一种基于显微镜的细胞点标装置及显微镜的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种基于显微镜的细胞点标装置及显微镜，该细胞点标装置包括：固定部，用于固定在显微镜上；连接部，与所述固定部连接；以及点标部，与所述连接部连接，所述点标部的末端垂直地指向所述显微镜的光路中心，用于对载物台上的目标位置进行标记。所述显微镜包括该细胞点标装置。本实施例提供的细胞点标装置，能够固定在显微镜上，只要将点标部对准显微镜光路的中心位置，通过下压点标部就能够对目标细胞做标记，准确度高，节省人力；而且通过在固定部上开设调节槽，方便调节细胞点标装置在显微镜上的位置。
【专利说明】一种基于显微镜的细胞点标装置及显微镜

【技术领域】
[0001]本发明涉及显微镜【技术领域】，尤其涉及一种基于显微镜的细胞点标装置及包括该细胞点标装置的显微镜。

【背景技术】
[0002]透射电子显微镜(Transmiss1n electron microscope, TEM)技术是检测和研究病毒的重要手段，是诊断未知病原和鉴定生物恐怖袭击病原的首选技术之一。超薄切片技术是组成生物TEM技术体系的重要技术。通常情况下，贴壁培养细胞超薄切片制样过程需要以下步骤完成:首先直接用细胞刮子刮脱细胞或通过胰酶消化使细胞脱离培养界面，再将脱壁的细胞进行离心使其聚集成团块，继而对细胞团块进行醛类和四氧化锇双固定、梯度乙醇(或环氧丙烷或丙酮)脱水、树脂浸润、包埋、聚合、修块和切片等处理程序。刮取及酶消化等处理会导致细胞超微结构发生改变，从而难以反映贴壁细胞的真实自然状态。上述处理使细胞脱离了固有位置，经过离心聚集形成团块，使得细胞随机分布在细胞团块内，经过上述处理后，在切片上有很多细胞，难以实现通过透射电子显微镜观察光学显微镜所观察到的同一细胞，大大降低了透射电子显微镜对细胞超薄切片的检测效率。
[0003]为了能够在透射电子显微镜下观察到光学显微镜所观察到的目标细胞， 申请人:的在先前的一件专利建立了定位超薄切片技术(申请号为201310470347.8的专利《一种针对感染病毒的病变细胞的定位超薄切片方法》)。在应用定位超薄切片技术时，为了方便在切片前标记目标细胞的位置，通常以手工的方式对目标细胞所在位置进行标记，具体方法是在显微镜观察视野内用记号笔在载玻片上标记目标细胞的位置。由于手工标记微米级的细胞位置对手工操作而言难度较大，因而对操作者有较高的要求，例如要求操作者具有良好的手臂稳定性，在标记过程中不能出现手臂抖动，并需要操作者具备显微镜下的良好的立体感等。一旦手部发生些许抖动，将导致标记位置远离目标细胞的位置。另外，用于标记的记号笔的笔尖一般较粗，标记染料区域的大小远大于目标细胞区域，这也导致标记位置不准确。如上所述，手工对细胞位置进行标记的方式准确度和效率都较低。


【发明内容】

[0004]抟术问是页
[0005]有鉴于此，本发明要解决的技术问题是，如何准确高效的对载玻片上的目标细胞的位置进行标记，以方便后续的针对目标细胞的定位查找、分离细胞和进行目标细胞的超薄切片。
[0006]解决方案
[0007]为了解决上述技术问题，根据本发明的一实施例，提供了一种基于显微镜的细胞点标装置，包括:
[0008]固定部，用于固定在显微镜上；
[0009]连接部,与所述固定部连接；以及
[0010]点标部，与所述连接部连接，所述点标部的末端垂直地指向所述显微镜的光路中心，用于对载物台上的目标位置进行标记。
[0011]对于上述基于显微镜的细胞点标装置，在一种可能的实现方式中，所述固定部上开设有至少一对调节槽，所述调节槽位于水平方向和/或竖直方向上。
[0012]对于上述基于显微镜的细胞点标装置，在一种可能的实现方式中，所述点标部包括:
[0013]压件，通过弹性部件设置在所述连接部的远离所述固定部的一端；以及
[0014]点标件，以垂直于所述载物台的方向安装在所述压件上，为中空结构。
[0015]为了解决上述技术问题，根据本发明的另一实施例，还提供了一种显微镜，包括上述基于显微镜的细胞点标装置。
[0016]为了解决上述技术问题，根据本发明的又一实施例，还提供了一种基于显微镜的细胞点标装置，包括:
[0017]固定部，用于固定在显微镜上；
[0018]调节部，与所述固定部连接，所述调节部的长度和宽度可以调节；以及
[0019]点标部，与所述固定部连接，所述点标部的末端垂直地指向所述显微镜的光路中心，用于对载物台上的目标位置进行标记。
[0020]对于上述基于显微镜的细胞点标装置，在一种可能的实现方式中，所述固定部包括:
[0021]固定板，所述固定板上开设有至少一对调节槽，所述调节槽位于水平方向和/或竖直方向上；以及
[0022]连接件，与所述调节部在水平方向上可转动地连接。
[0023]对于上述基于显微镜的细胞点标装置，在一种可能的实现方式中，所述连接件与所述调节部连接的部分通过销进行锁止。
[0024]对于上述基于显微镜的细胞点标装置，在一种可能的实现方式中，所述调节部包括:
[0025]第一调节件，所述第一调节件在沿所述调节部的长度方向上设置有滑轨；以及
[0026]第二调节件，所述第二调节件在沿所述调节部的长度方向上设置有滑块，所述滑块在所述滑轨中滑动，所述滑块上设置有紧固件。
[0027]对于上述基于显微镜的细胞点标装置，在一种可能的实现方式中，所述滑块设置在滑块载体上，所述滑块载体通过螺钉与所述第二调节件连接。
[0028]对于上述基于显微镜的细胞点标装置，在一种可能的实现方式中，所述滑轨的端部设置有阻挡件以及限位件。
[0029]对于上述基于显微镜的细胞点标装置，在一种可能的实现方式中，所述点标部包括:
[0030]压件，通过弹性部件设置在所述调节部的远离所述固定部的一端；以及
[0031]点标件，以垂直于所述载物台的方向安装在所述压件上，为中空结构。
[0032]为了解决上述技术问题，根据本发明的再一实施例，提供了一种显微镜，包括上述基于显微镜的细胞点标装置。
[0033]有益.效果
[0034]本实施例提供的基于显微镜的细胞点标装置，能够固定在显微镜上，只要将点标部对准显微镜光路的中心位置，通过下压点标部就能够对目标细胞做标记，准确度高，节省人力。而且通过在固定部上开设调节槽，方便调节细胞点标装置在显微镜上的位置。进一步地，由于调节部的长度和宽度都能够调节，从而使得该细胞点标装置能够应用于不同规格的显微镜上。本发明提供的细胞点标装置，能够代替人工对微米级细胞的位置轻松实现精确标记，对操作者无特殊要求，操作简单，精确度高，重复性好，易于推广。
[0035]根据下面参考附图对示例性实施例的详细说明，本发明的其它特征及方面将变得清楚。

【专利附图】

【附图说明】
[0036]包含在说明书中并且构成说明书的一部分的附图与说明书一起示出了本发明的示例性实施例、特征和方面，并且用于解释本发明的原理。
[0037]图1示出根据本发明一个实施例提供的基于显微镜的细胞点标装置的结构示意图；
[0038]图2示出根据本发明另一个实施例提供的基于显微镜的细胞点标装置的结构示意图；
[0039]图3示出根据本发明另一个实施例提供的基于显微镜的细胞点标装置的主视图；
[0040]图4示出根据本发明另一个实施例提供的基于显微镜的细胞点标装置的俯视图；
[0041]图5示出根据本发明另一个实施例提供的基于显微镜的细胞点标装置的部分结构示意图；
[0042]图6示出根据本发明另一个实施例提供的基于显微镜的细胞点标装置的部分结构示意图；
[0043]图7示出根据本发明另一个实施例提供的显微镜的结构示意图；
[0044]图8示出根据本发明实施例提供的基于显微镜的细胞点标装置在载玻片上做出标记的示意图；以及
[0045]图9(A)-图9(D)分别为采用本发明提供的基于显微镜的细胞点标装置所标记出的目标细胞的示意图。

【具体实施方式】
[0046]以下将参考附图详细说明本发明的各种示例性实施例、特征和方面。附图中相同的附图标记表示功能相同或相似的元件。尽管在附图中示出了实施例的各种方面，但是除非特别指出，不必按比例绘制附图。
[0047]在这里专用的词“示例性”意为“用作例子、实施例或说明性”。这里作为“示例性”所说明的任何实施例不必解释为优于或好于其它实施例。
[0048]另外，为了更好的说明本发明，在下文的【具体实施方式】中给出了众多的具体细节。本领域技术人员应当理解，没有某些具体细节，本发明同样可以实施。在一些实例中，对于本领域技术人员熟知的方法、手段、元件和电路未作详细描述，以便于凸显本发明的主旨。
[0049]实施例1
[0050]图1示出根据本发明一个实施例提供的基于显微镜的细胞点标装置的结构示意图,如图1所示,本实施例提供的细胞点标装置100包括固定部1、连接部2以及点标部3。
[0051]其中，固定部I用于将整个细胞点标装置100固定在显微镜上，由于大多数显微镜的镜臂上具有螺孔，为了便于安装，因此优选地将细胞点标装置100固定在镜臂上。连接部2与固定部I连接，点标部3与连接部2连接，点标部3的末端垂直地指向显微镜的光路中心，能够对载物台上的目标位置进行标记。
[0052]其中，固定部I上开设有至少一对调节槽4，可以使用螺钉等将固定部I固定在显微镜上。调节槽4可以位于水平方向和/或竖直方向上，以便调节整个细胞点标装置100在显微镜上的位置。固定部I的形状构造不限于本实施例所列举的形式，可将固定部I依据显微镜的不同而做不同的设计、加工成不同形状和形式。
[0053]连接部2可以为长方体或圆柱体结构。连接部2可以与固定部I固定连接，只要保证连接部2和点标部3的长度，使得点标部3末端恰好垂直地指向显微镜光路中心的位置即可。连接部2也可以与固定部I可转动地连接，例如铰接，并且当连接部2转到适当的位置时，通过销钉进行锁止，从而能够在水平方向上调节点标部3的位置。
[0054]点标部3包括压件5和点标件6。其中压件5通过弹性部件(未图示)设置在连接部2的远离固定部I的一端，点标件6在垂直于载物台的方向上安装在压件5上，点标件6为中空结构。点标件6与压件5可拆卸连接，由此方便不同规格(例如长度)的点标件6的更换。当在点标件6的末端涂抹颜料之后，通过按压压件5，点标件6能够标记出载玻片上的目标细胞的位置。
[0055]本实施例提供的细胞点标装置，利用显微镜上自带的螺孔，无需改变显微镜的结构，就能够把细胞点标装置固定在显微镜上，只要将点标部对准显微镜光路的中心位置，通过下压点标部就能够对目标细胞做标记，准确度高，节省人力。而且通过在固定部上开设调节槽，方便调节细胞点标装置在显微镜上的位置。
[0056]实施例2
[0057]图2示出根据本发明另一实施例提供的基于显微镜的细胞点标装置的结构示意图，图3示出对应的主视图，图4示出对应的俯视图，如图2-图4所示，该细胞点标装置200主要包括固定部10、调节部20以及点标部30。
[0058]其中，固定部10用于将整个细胞点标装置200固定在显微镜上。优选地，本实施例中，固定部10固定在显微镜的镜臂上。调节部20与固定部10连接，调节部20位于载物台上方，调节部20在图2中的X方向上的长度以及在图2中的y方向上的宽度均能够调节。点标部30与调节部20连接，用于垂直地对置于载玻片上的目标细胞的位置进行标记。
[0059]具体而言，如图5所示，固定部10包括固定板11和连接件12。固定板11上开设有调节槽13，通过调节槽13可以使用螺母将固定板10固定在镜臂上。其中，调节槽13的个数优选为2，可以将调节槽13设置为沿竖直方向或水平方向延伸，也可以在两个方向上都设置调节槽13。通过在固定板11上开设具有一定长度的调节槽13，能够调节固定部10在镜臂上的高度，或在水平方向上的位置，也就是说能够调节整个细胞点标装置200在显微镜上的位置。连接件12用于与调节部20连接，连接件12固定设置在固定板11的一侧，可以与固定板11分体形成并组装在一起，也可以与固定板11 一体形成。固定部I的形状构造不限于本实施例所列举的形式，可将固定部I依据显微镜的不同而做不同的设计、力口工成不同形状和形式。
[0060]固定部10与调节部20可以固定连接也可以可转动地连接，例如铰接。在本实施例中，连接件12可以包括平行且对称的两个夹持板121，两个夹持板121之间具有凹部122，两个夹持板上121分别开设有第一孔(未图示)，两个第一孔相互对应。
[0061]如图2?图5所示，调节部20包括第一调节件21和第二调节件22。具体而言，第一调节件21的一端为凸部211，凸部211的宽度与连接件12上的凹部122的宽度相适应，且该凸部211上对应于第一孔的位置开设有第二孔，从而通过螺母123能够实现凸部211与凹部122的铰接，即能够实现固定部10和调节部20的可转动连接。此外，凸部211和凹部122上对应的位置还设置有对应的第三孔212，当调整细胞点标装置200使得点标部30对准载玻片上目标细胞的位置之后，将销钉插入第三孔212中，能够锁止固定部10与调节部20，使之不能再转动，便于点标部30稳固地做标记。
[0062]第二调节件22与第一调节件21在长度方向上可活动的连接，例如，第二调节件22能够与第一调节件21在长度方向上相对运动，从而使得调节部20在长度方向上的长度可调，也即使得细胞点标装置200在长度方向上的长度可调。
[0063]具体而言，本实施例中，第一调节件21的侧面具有滑轨23，第二调节件22的侧面设置有滑块24，通过滑块24在滑轨23中滑动，能够调整调节部20的长度。滑块24上具有紧固件25，用于在滑块24滑到适当的位置时对滑块24进行紧固。优选地，滑轨23设置有两条，每个滑轨23中设置两个滑块24。为简化装置只设置一条滑轨23也可以。此外，紧固件25可以为销钉。
[0064]进一步地，滑轨23的一端或两端具有阻挡件26，用于阻挡滑块24滑出滑轨23，该阻挡件26可以安装固定在第一调节件21上，也可以与第一调节件21 —体形成。阻挡件26上还设置有限位件27，以调整滑块24在滑轨23中能够抵达的位置。本实施例中的限位件27具体可以为螺钉29，通过调节螺钉29伸出阻挡件26的长度，能够调节滑块24在滑轨23中的移动范围，螺钉29的数量和位置均与滑轨23相适应。
[0065]如图6所示，进一步地，第二调节件22与第一调节件21之间的宽度距离可调。具体地，滑块24固定在滑块载体28上，滑块载体28与第二调节件22分体设置且通过螺钉29相互连接，通过调节螺钉29伸出第二调节件22的长度，能够调整滑块载体28与第二调节件22之间的距离，从而实现调整细胞点标装置200的宽度。图6中以4个螺钉为例进行了说明，事实上3个螺钉也可以实现本发明。
[0066]如图6所示，点标部30具体包括压件31和点标件32。其中，第二调节件22的端部内部设置有弹性部件(未示出)，压件31的一端与弹性部件连接。点标件32设置在压件31上，垂直于载物台的方向，为中空结构，本实施例中点标件32的外径可以为1.5_，与后续工艺中钻头的外径相吻合。通过按压压件31或通过设置按钮33来按压压件31，能够带动点标件32竖直向下运动，点中放置在显微镜光路中心载玻片上的目标细胞的位置进行
T 己 O
[0067]本实施例提供的细胞点标装置，利用显微镜上自带的螺孔，无需改变显微镜的结构，就能够把细胞点标装置固定在显微镜上，只要将点标部对准显微镜光路的中心位置，并将细胞点标装置的各个部件进行固定，通过下压点标部就能够对目标细胞做标记，准确度高，节省人力。而且通过在固定部上开设调节槽，能够方便调节细胞点标装置在显微镜上的位置，此外调节部的长度和宽度都能够调节，从而使得该细胞点标装置能够应用于不同规格的显微镜上。需要说明的是，虽然本实施例中以滑块、铰接的方式为例进行了说明，本领域技术人员能够理解的是，齿轮传动、枢转等机械结构都可以用于实现本发明。
[0068]实施例3
[0069]本实施例提供了一种显微镜(未图示)，包括上述实施例1中的细胞点标装置100。
[0070]实施例4
[0071]如图7所示,本实施例提供了一种显微镜300,包括上述实施例2中的细胞点标装置200，该细胞点标装置200安装在显微镜300的镜臂301上。本实施例目标细胞可为携带绿色荧光蛋白基因病毒感染的细胞，相应地显微镜300可具体为荧光显微镜，从而通过显微镜300的紫外线激发能够清楚的观察到荧光目标细胞。
[0072]采用本发明提供的细胞点标装置200对目标细胞进行标记和观察的过程具体如下:将载玻片302置于显微镜300的载物台303上，调整点标部32使其恰好指向显微镜300的光路中心的位置，调整载玻片302的位置，使得目标细胞位于显微镜300的视野中心区域，然后按下按钮33对目标细胞的位置进行标记。如图8所示，在载玻片302上对应于目标细胞的位置具有一圆圈，即是细胞点标装置200所做的标记。图9(A)和图9(B)分别为在显微镜300下和在可见光下看到的目标细胞，然后对该目标细胞进行超薄切片和观察，能够容易地找到细胞内所含的大量病毒颗粒，其中图9 (C)示出了放大后的目标细胞，图9 (D)示出了目标细胞中包含的病毒。
[0073]以上所述，仅为本发明的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。
【权利要求】
1.一种基于显微镜的细胞点标装置，其特征在于，包括: 固定部，用于固定在显微镜上； 连接部，与所述固定部连接；以及 点标部，与所述连接部连接，所述点标部的末端垂直地指向所述显微镜的光路中心，用于对载物台上的目标位置进行标记。
2.根据权利要求1所述的基于显微镜的细胞点标装置，其特征在于，所述固定部上开设有至少一对调节槽，所述调节槽位于水平方向和/或竖直方向上。
3.根据权利要求1或2所述的基于显微镜的细胞点标装置，其特征在于，所述点标部包括: 压件，通过弹性部件设置在所述连接部的远离所述固定部的一端；以及 点标件，以垂直于所述载物台的方向安装在所述压件上，为中空结构。
4.一种显微镜,其特征在于,包括权利要求1-3任一项所述的基于显微镜的细胞点标>j-U ρ?α装直。
5.一种基于显微镜的细胞点标装置，其特征在于，包括: 固定部，用于固定在显微镜上； 调节部，与所述固定部连接，所述调节部的长度和宽度可以调节；以及点标部，与所述固定部连接，所述点标部的末端垂直地指向所述显微镜的光路中心，用于对载物台上的目标位置进行标记。
6.根据权利要求5所述的基于显微镜的细胞点标装置，其特征在于，所述固定部包括: 固定板，所述固定板上开设有至少一对调节槽，所述调节槽位于水平方向和/或竖直方向上；以及 连接件，与所述调节部在水平方向上可转动地连接。
7.根据权利要求6所述的基于显微镜的细胞点标装置，其特征在于，所述连接件与所述调节部连接的部分通过销进行锁止。
8.根据权利要求5所述的基于显微镜的细胞点标装置，其特征在于，所述调节部包括: 第一调节件，所述第一调节件在沿所述调节部的长度方向上设置有滑轨；以及 第二调节件，所述第二调节件在沿所述调节部的长度方向上设置有滑块，所述滑块在所述滑轨中滑动，所述滑块上设置有紧固件。
9.根据权利要求8所述的基于显微镜的细胞点标装置，其特征在于，所述滑块设置在滑块载体上，所述滑块载体通过螺钉与所述第二调节件连接。
10.根据权利要求8所述的基于显微镜的细胞点标装置，其特征在于，所述滑轨的端部设置有阻挡件以及限位件。
11.根据权利要求5-10任一项所述的基于显微镜的细胞点标装置，其特征在于，所述点标部包括: 压件，通过弹性部件设置在所述调节部的远离所述固定部的一端；以及 点标件，以垂直于所述载物台的方向安装在所述压件上，为中空结构。
12.—种显微镜,其特征在于,包括权利要求5-11任一项所述的基于显微镜的细胞点标装置。
【文档编号】G01N1/28GK104198255SQ201410498599
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年9月25日 优先权日:2014年9月25日
【发明者】宋敬东, 屈建国, 洪涛 申请人:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所